姜勇超 聶鈺君

近年來急性髓性白血病的發(fā)病率呈上升趨勢，且呈現(xiàn)年輕化趨勢，嚴重危及患兒的健康[1]。因此，早期診斷并判斷患者的預后以及進行早期干預對挽救該病患者的生命具有重要臨床價值[2]。本研究應用酶聯(lián)免疫吸附法(Elisa)技術檢測犬尿氨酸和miR-335在急性髓性白血病患兒血清中的水平，旨在探討犬尿氨酸和miR-335在急性髓性白血病患兒血清中的水平，并分析其臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2013年5月至2015年5月間我院收治的急性髓性白血病患兒共85例。初發(fā)26例中男性14例，女性12例；年齡6～14歲，平均(11.31±2.06)歲。緩解29例中男性18例，女性11例；年齡5～13歲，平均(10.97±2.23)歲。復發(fā)30例中男性16例，女性14例；年齡5～14歲，平均(11.09±2.62)歲。按FAB分型：M110例，M222例，M315例，M424例，M514例。同期納入體檢健康者30例為對照組，男性17例，女性13例；年齡7～14(11.22±2.70)歲。4組研究對象的性別、年齡等基本臨床資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究獲得我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 診斷標準

急性髓性白血病及其初發(fā)、緩解、復發(fā)、分型參照《血液病診斷及療效標準》[3]。

1.3 病例納入和排除標準

納入標準：①滿足急性髓性白血病患兒；②年齡5～14歲；③所有患兒家屬自愿接受加入本研究，且簽署協(xié)議書。排除標準：①合并心、肺、肝、腎等臟器功能嚴重不全患兒；②伴有其他類型惡性腫瘤患兒；③依從性較差患兒；④早產兒。

1.4 方法

1.4.1 治療方法 所有患兒在常規(guī)檢查后予常規(guī)方案化療，并且輔以輸血和對癥支持療法，療程中定期復查血常規(guī)、肝腎功能，在出院后行定期隨診。

1.4.2 檢測指標 3組(初發(fā)、緩解、復發(fā)急性髓性白血病患兒)于入院時行抽取空腹靜脈血約3 mL，對照組30例于晨起空腹抽取靜脈血約3 mL，所有樣本放于采血管中，室溫1 000 r/min 離心后置于-70 ℃?zhèn)錅y。應用酶聯(lián)免疫吸附(Elisa)法檢測4組血清中犬尿氨酸和miR-335水平。

1.4.3 分析指標 ①比較急性髓性白血病患兒和對照組血清中犬尿氨酸和miR-335水平。②比較初發(fā)、緩解、復發(fā)組患兒血清中犬尿氨酸和miR-335水平。③分析患兒血清中犬尿氨酸和miR-335水平與急性髓性白血病臨床特征間的相關性。

1.5 統(tǒng)計學方法

2 結果

2.1 4組血清中犬尿氨酸和miR-335水平比較

與對照組比較，急性髓性白血病患兒血清犬尿氨酸和miR-335水平明顯升高，比較有統(tǒng)計學差異(P<0.01)。急性髓性白血病初發(fā)和復發(fā)組患兒血清中犬尿氨酸和miR-335水平明顯高于緩解組(P<0.01)。急性髓性白血病初發(fā)與復發(fā)組患兒間的血清中犬尿氨酸和miR-335水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 4組血清中犬尿氨酸和miR-335水平比較

2.2 血清犬尿氨酸和miR-335水平與宮頸癌臨床因素間的臨床意義

血清犬尿氨酸和miR-335水平與急性髓性白血病患兒的年齡、性別、骨髓中白血病細胞比例及FAB分型無明顯相關性(P>0.05)，見表2。

3 討論

急性髓性白血病是一種由造血干細胞或祖細胞突變所致造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，以異常造血細胞的分化障礙、惡性增殖、凋亡受阻以及正常血細胞減少為病理特征[4]。急性髓性白血病的發(fā)生發(fā)展是一個多因素、多步驟的病理過程，目前已證實了大量的細胞遺傳學、分子生物學相關指標，但臨床資料顯示該病仍易復發(fā)，與急性髓性白血病復發(fā)相關的因素尚有待進一步闡明[4]。監(jiān)測骨髓、染色體、微小殘留病灶對判斷白血病預后、復發(fā)及治療效果具有重要臨床價值，但上述檢測費用高、時間長。尋求其他便捷、廉價且患者依從性好的檢測方法仍是當前臨床面臨的重要難題[5]。

犬尿氨酸是人體必需氨基酸色氨酸的代謝產物，具有多種特殊生理作用，人體生理機能與其代謝狀態(tài)密切相關[6]。人體的色氨酸經吲哚胺2，3-雙加氧酶分解，最終生成犬尿氨酸，在色氨酸耗竭的同時產生過多的犬尿氨酸，后者可誘導發(fā)生腫瘤免疫逃逸[7]。研究發(fā)現(xiàn)，吲哚胺2，3-雙加氧酶在各種白血病的細胞中呈高表達，且活性高于正常水平，白血病化療治療可通過影響白血病患者血清中吲哚胺2，3-雙加氧酶活性，進而影響犬尿氨酸代謝，與白血病的發(fā)病、療效和復發(fā)密切相關[7]。國外研究發(fā)現(xiàn)[8]，急性髓性白血病患者體內的犬尿氨酸水平與其總體生存期密切相關。本組資料顯示，與對照組比較，急性髓性白血病患兒血清犬尿氨酸水平明顯升高。血清犬尿氨酸水平與急性髓性白血病患兒的年齡、性別、骨髓中白血病細胞比例及FAB分型無明顯相關性。急性髓性白血病初發(fā)和復發(fā)組患兒血清中犬尿氨酸水平明顯高于緩解組。急性髓性白血病初發(fā)和復發(fā)組患兒間的血清中犬尿氨酸水平比較，差異無統(tǒng)計學意義。提示了血清中犬尿氨酸水平與急性髓性白血病患兒的病情及預后有關。

表2 血清犬尿氨酸和miR-335水平與宮頸癌臨床因素間的臨床意義

miR-335位于人染色體7q32上，參與癌細胞的增殖、分化、凋亡、侵襲及轉移[9]。microRNA作為一種小分子RNA，新近發(fā)現(xiàn)在轉錄后調控基因表達中發(fā)揮重要作用，與急性白血病的發(fā)生發(fā)展聯(lián)系密切。PCR檢測證實，急性髓性白血病患者血清中循環(huán)的miR-335含量較正常情況下明顯升高，miR-335可能是急性髓性白血病患者臨床的輔助診斷標志物之一[10]。國外研究表明，血清中miR-335含量可能與急性髓性白血病患者的病情發(fā)展及預后聯(lián)系密切[11]。本組資料顯示：與對照組比較，急性髓性白血病患兒血清中miR-335水平明顯升高。血清中miR-335水平與急性髓性白血病患兒的年齡、性別、骨髓中白血病細胞比例及FAB分型無明顯相關性。急性髓性白血病初發(fā)和復發(fā)組患兒血清中miR-335水平明顯高于緩解組。急性髓性白血病初發(fā)和復發(fā)組患兒間的血清中miR-335水平比較，差異無統(tǒng)計學意義。提示了血清中miR-335水平與急性髓性白血病患兒的病情及預后有關。

綜上所述，急性髓性白血病患兒血清中犬尿氨酸和miR-335水平明顯升高，與該病的預后密切相關。

[1] Rooney CM.Can treg elimination enhance NK cell therapy for AML〔J〕.Blood,2014,123(25):3848-3849.

[2] 朱荷艷,李慧慧.MicroRNA-145在急性髓系白血病患者中的表達及意義〔J〕.重慶醫(yī)學,2016,45(3):377-379.

[3] 張之南,沈 悌.血液病診斷及療效標準〔M〕.北京:科學出版社,2007:125-139.

[4] 廖 君,孔佩艷.尿激酶型纖溶酶原激活物系統(tǒng)與急性髓細胞白血病關系的研究進展〔J〕.腫瘤防治研究,2016,43(4):305-308.

[5] 孔 榮,邱宏春,吳鵬飛,等.血清乳酸脫氫酶及β2-微球蛋白聯(lián)合C反應蛋白檢測在診斷急性髓細胞白血病中價值〔J〕.中華實用診斷與治療雜志,2011,25(11):1061-1066.

[6] 王麗莎,劉新民,馮 利,等.犬尿氨酸通路在神經退行性疾病中的研究進展〔J〕.中國比較醫(yī)學雜志,2015,25(11):69-75.

[7] 周曉君,黃 濤,符生苗,等.白血病患者化療前后吲哚胺2，3-雙加氧酶活性變化及意義〔J〕.廣東醫(yī)學,2013,34(10):1584-1586.

[8] Mabuchi R,Hara T,Matsumoto T,et al.High serum concentration of L-kynurenine predicts unfavorable outcomes in patients with acute myeloid leukemia〔J〕.Leuk Lymphoma,2016,57(1):92-98.

[9] 熊思維,伏 雯,鐘唯德,等.miR-335表達失調對前列腺癌細胞株LNCaP生物學的影響〔J〕.實用醫(yī)學雜志,2013,299(13):2086-2088.

[10] 黃淑英,魯 勇,劉 靜.急性髓系白血病患者循環(huán)microRNA-335的檢測及其臨床意義〔J〕.實驗與檢驗醫(yī)學,2015,33(2):147-149,160.

[11] Lin X,Wang Z,Zhang R,et al.High serum microRNA-335 level predicts aggressive tumor progression and unfavorable prognosis in pediatric acute myeloid leukemia〔J〕.Clin Transl Oncol,2015,17(5):358-364.