蔣元寶

宮頸癌是我國女性常見惡性腫瘤之一，發(fā)病率位居女性惡性腫瘤第二位，應(yīng)當(dāng)給予較高的重視。隨著生活習(xí)慣的改變，宮頸癌的發(fā)病年齡趨向年輕化。目前，普遍研究認(rèn)為宮頸癌的發(fā)生是1個漫長的發(fā)展過程，從宮頸癌前病變發(fā)展為宮頸癌需要近十年時間，并且有效的篩查手段和干預(yù)措施。流行病學(xué)研究顯示，幾乎所有的宮頸癌患者中都可以檢測到HPV-DNA，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌變的根本原因。因此，HPV-DNA的早期發(fā)現(xiàn)和早期干預(yù)是預(yù)防宮頸癌的關(guān)鍵措施。本研究對近5年來我院婦科門診采用HPV-DNA基因分型檢測宮頸病變的患者資料進(jìn)行分析，評估HPV-DNA分型檢測用于篩查宮頸癌的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年6月至2016年6月在我院婦科門診進(jìn)行宮頸癌篩查的患者2560例，年齡18～70歲，平均年齡(34.7±9.6)歲。排除宮頸手術(shù)史，曾經(jīng)宮頸細(xì)胞學(xué)檢測異?；颊?，婦科腫瘤患者，妊娠，24 h內(nèi)有性生活史者。

1.2 標(biāo)本采集

選擇月經(jīng)干凈后3～7天，取材前72 h禁止沖洗陰道及使用陰道藥物?；颊呷“螂捉厥?，使用陰道窺器暴露宮頸，將一次性宮頸刷尖端插入宮頸口，順時針旋轉(zhuǎn)動3～5周，采集足夠細(xì)胞標(biāo)本后取出宮頸刷，裝入專用的細(xì)胞保存液收集管中，標(biāo)記好患者詳細(xì)信息。

1.3 檢測方法

將保存液中的標(biāo)本離心，取沉淀物，采用PCR熒光法檢測HPV-DNA，試劑盒來自深圳亞能生物公司，共檢測23個HPV基因型，分別為高危型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83、MM4，低危型：HPV6、11、42、43、45。HPV-DNA高危型陽性患者行液基細(xì)胞學(xué)(TCT)檢測，TCT陽性者行陰道鏡取活檢病理檢測。TCT標(biāo)本采用新柏2000全自動制片機進(jìn)行制片，巴氏染色后鏡檢，按照TBS分類報告法分為非典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASC)、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)、高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)和鱗狀細(xì)胞癌(SCC)。病理診斷根據(jù)2003年WHO《乳腺與女性生殖系統(tǒng)腫瘤病理與遺傳學(xué)》診斷標(biāo)準(zhǔn)將結(jié)果分為：慢性炎癥、宮頸輕度不典型增生(CIN-Ⅰ)、宮頸中度不典型增生(CIN-Ⅱ)、宮頸重度不典型增生(CIN-Ⅲ)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV-DNA高危型分布情況

2560例婦女中共檢測出HPV-DNA陽性者711例(27.8%)，其中高危型265例(10.4%)，低危型446例(17.4%)。其中HPV16型49例，18型13例，31型12例，35型2例，39型19例，45型3例，51型11例，52型92例，53型34例，56型7例，58型59例，59型10例，66型13例，68型19例，73型1例。

2.2 不同高危型在各級宮頸病變中的分布

CINⅠ患者中，HPV16占15.7%，HPV18占2.0%； CINⅡ患者中，HPV16占58.3%，HPV18占11.1%；CINⅢ患者中，HPV16占53.8%，HPV18占23.1%；宮頸癌患者中，HPV16占60.0%，HPV18占20.0%；不同分級宮頸病變中HPV類型感染分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同高危型在各級宮頸病變中的分布(例，%)

2.3 HPV-DNA高危型感染在各年齡段分布

HPV-DNA高危型感染在各年齡段的分布如表2所示，以30歲以下和50歲以上的人群感染率較高。各年齡段患者HPV-DNA高危型感染率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=5.673，P=0.339)。

表2 HPV-DNA高危型感染在各年齡段分布

2.4 HPV-DNA陽性與病理診斷結(jié)果對照

HPV-DNA高危型感染者中病理診斷為宮頸癌患者10例(3.8%)，低危型感染者中病理診斷為宮頸癌者2例(0.4%)，二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.5 高危型HPV用于篩查宮頸癌的價值分析

TCT聯(lián)合HPV-DNA分型檢測的敏感度高于二者單獨檢測，特異度和假陽性率低于HPV-DNA分型檢測，假陰性率低于二者單獨檢測，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表3 HPV-DNA陽性與病理診斷結(jié)果對照(例，%)

表4 高危型HPV用于篩查宮頸癌的價值分析/%

注：與TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測比較，*為P<0.05。

3 討論

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤，隨著生活水平的提高，宮頸癌的發(fā)病呈現(xiàn)年輕化趨勢。研究顯示宮頸癌的發(fā)生和HPV的持續(xù)感染密切相關(guān)[1]，HPV與宿主基因的整合是宮頸病變發(fā)展到宮頸癌的標(biāo)志[2-3]，也是宮頸癌術(shù)后復(fù)發(fā)的危險因素[4]。但是宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展是1個量變到質(zhì)變，漫長的過程，且未發(fā)展成宮頸癌的變病存在可逆性[5-6]，所以有效的篩查及恰當(dāng)?shù)母深A(yù)，能阻斷宮頸癌的進(jìn)展，對降低宮頸癌的發(fā)病率和死亡率至關(guān)重要。

宮頸細(xì)胞學(xué)檢測用于臨床宮頸癌的篩查已有近40年歷史，使宮頸癌的發(fā)生率和死亡率得到明顯下降。但是宮頸細(xì)胞學(xué)檢測有其局限性，一方面標(biāo)本的取材對宮頸細(xì)胞學(xué)檢測的結(jié)果有一定的影響，而且其結(jié)果受閱片者主觀因素及經(jīng)驗影響較大；另一方面，宮頸細(xì)胞學(xué)只能在宮頸病變以后對宮頸病變類型定性，不能預(yù)估病變。相比于宮頸細(xì)胞學(xué)檢測，HPV的檢測更為客觀，且可重復(fù)性檢測，避免不同檢測者之間的主管差異，減少假陰性結(jié)果的發(fā)生。本組患者中，HPV檢測的敏感性和特異性均高于宮頸細(xì)胞學(xué)檢測。

大多數(shù)女性感染HPV為一過性的，可在2年內(nèi)被機體免疫系統(tǒng)清除，只有約10%的持續(xù)感染者最終會發(fā)生宮頸上皮內(nèi)瘤變。HPV感染主要通過性接觸傳播，因此在20～30歲性活躍年齡段HPV的感染率較高，感染類型主要以單一感染為主。而50歲以上人群處于絕經(jīng)期，性激素水平低下，免疫功能減弱，因此成為HPV感染的第二個年齡高峰，且此時感染類型中雙重以上感染類型比例增加。本研究中30歲以前是HPV感染的第一個高峰年齡段，雙重以上感染類型的人數(shù)占18.4%，50～70歲是第二個高峰年齡段，此階段婦女高危型HPV雙重以上感染類型的人數(shù)占53.0%。鑒于HPV感染的年齡相關(guān)性特點，美國癌癥協(xié)會根據(jù)年齡制定了宮頸病變的篩查方案[7]：性生活開始后3年內(nèi)的女性即需要進(jìn)行宮頸病變的篩查，30歲以下婦女每1～2年進(jìn)行宮頸細(xì)胞學(xué)檢測，30歲以上婦女每1～2年進(jìn)行宮頸細(xì)胞學(xué)聯(lián)合HPV檢測，二者皆為陰性可3年后復(fù)查；70歲以上婦女連續(xù)3次宮頸細(xì)胞學(xué)檢測陰性即可停止篩查。

目前，許多研究認(rèn)為CINⅠ主要與低危型HPV有關(guān)，而CINⅡ和CINⅢ主要和高危型HPV有關(guān)，尤其是HPV16型和18型[8]。姜霞[9]的研究顯示CINⅠ患者中HPV16占16.9%，HPV18占6.8%，CINⅡ患者中HPV16陽性占33.3%，HPV18占10.5%，CINⅢ患者中HPV16陽性占50.0%，HPV18占12.5%，且三組中HPV感染分布差異顯著。本研究中，CINⅠ患者中，HPV16占15.7%，HPV18占2.0%； CINⅡ患者中，HPV16占58.3%，HPV18占11.1%；CINⅢ患者中，HPV16占53.8%，HPV18占23.1%，與姜霞的研究結(jié)果基本一致。由此可見，對于高危型HPV感染的患者，尤其是HPV16和18型患者，做好后續(xù)的監(jiān)測很重要。美國陰道鏡及宮頸病理學(xué)會2013年宮頸病變指南也指出存在HPV16或HPV18感染的女性，就算細(xì)胞學(xué)顯示正常，也需要接受陰道鏡檢查[10]。Koutsky等[11]研究顯示細(xì)胞學(xué)檢測結(jié)果正常的女性，HPV陽性者2年內(nèi)發(fā)生宮頸病變的發(fā)生率為30%，而陰性者僅為3%。HPV作為宮頸細(xì)胞學(xué)檢測的補充手段，可以顯著提高檢測的敏感性和特異性，眾多研究結(jié)果證實了這一觀點。本研究結(jié)果顯示宮頸細(xì)胞學(xué)聯(lián)合高危型HPV檢測的敏感性和特異性顯著高于二者的單獨檢測，同時降低了假陽性率和假陰性率。

綜上所述，高危型HPV檢測用于篩查宮頸癌敏感性和特異性高，可作為輔助宮頸細(xì)胞學(xué)檢測的手段，二者聯(lián)合檢測能顯著提高檢測的敏感性和特異性，同時降低假陽性率的發(fā)生，臨床應(yīng)用價值較高。

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