岳子強(qiáng)，陳瓊科，吳 清

（1.重慶市巴蜀中學(xué)高2018級22班，重慶 400013；2.重慶市人民醫(yī)院三院院區(qū)中西醫(yī)結(jié)合科/檢驗(yàn)科，重慶 400015）

本研究觀察金銀花、蒲公英體外抑菌作用，總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 材料

藥材：金銀花、蒲公英均購于重慶市人民醫(yī)院三院院區(qū)中藥房。

菌珠：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌由重慶市人民醫(yī)院三院院區(qū)檢驗(yàn)科凍存。

試劑：氯化鈉、營養(yǎng)瓊脂粉、瓊脂培養(yǎng)基、蒸餾水、生理鹽水均由重慶市人民醫(yī)院三院院區(qū)提供。儀器：電子天平、立式電熱壓力蒸餾滅菌器、恒溫水浸鍋。

1.2 方法

金銀花及蒲公英水煎液的制備：稱取藥材粉末約10g，精密稱定；加蒸餾水50mL，用大火煮開后轉(zhuǎn)小火煎煮30min，趁熱抽濾；濾渣再加蒸餾水50mL同法煎煮1次，抽濾；合并兩次濾液，濃縮至含生藥1g/mL.4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

實(shí)驗(yàn)菌珠：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌由重慶市人民醫(yī)院三院院區(qū)檢驗(yàn)科微生物室提供的菌種，經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)獲得。

菌懸液的制備：分別將金黃色葡萄球菌、大腸桿菌接種于瓊脂培養(yǎng)基斜面，37°培養(yǎng)24h，然后以無菌水沖洗，配成含菌落數(shù)約為108個(gè)/mL的菌懸液備用待用［1］。

抑菌試驗(yàn)方法：測藥物的抑菌直徑圈直徑定性分析藥物的抑菌作用。 采用瓊脂擴(kuò)散法［2］，每平加0.1mL菌液，涂布整個(gè)培養(yǎng)基表面，37°吸附30min。正面均勻放置4個(gè)直徑約為6mm的無菌不銹鋼牛津環(huán)。再用移液器在孔中加金銀花、蒲公英及兩者混合液約0.1mL，37°恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h，觀察并記錄抑菌圈的有無及直徑大小（重復(fù)2次，每次做4孔，求直徑的平均值）。按抑菌圈直徑的大小作為判定敏感度高低的標(biāo)準(zhǔn)，抑菌圈直徑大于20mm為極敏，15～20mm為高敏，10～14mm為中敏，10mm以下為低敏，無抑菌圈為不敏［3］。

2 結(jié) 果

金銀花、蒲公英水提取物對金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)的抑菌直徑皆大于15mm，金銀花水提取物對大腸桿菌的抑菌環(huán)直徑小于10mm，但蒲公英水提取物對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌的抑菌環(huán)直徑皆大于15mm，兩種聯(lián)合對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌的抑菌環(huán)均大于20mm。金銀花及蒲公英水提取物對金黃色葡萄球菌均有抑制作用，蒲公英對大腸桿菌也有抑制作用，但金銀花對大腸桿菌的抑制作用較弱，但兩者聯(lián)合后對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌均有抑制作用，而且比單用效果更強(qiáng)。見表1。

表1 金銀花及蒲公英抑菌作用比較 （mm，±s）

表1 金銀花及蒲公英抑菌作用比較 （mm，±s）

藥物 抑菌環(huán)直徑平均值金黃色葡萄球菌 大腸桿菌金銀花 16.14±0.53 9.43±0.64蒲公英 16.43±0.62 15.12±0.71金銀花加蒲公英 21.26±0.49 20.92±0.58

3 討 論

金銀花［4］又名忍冬花，是忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或帶初開的花。金銀花味甘，性寒。具清熱解毒、疏散風(fēng)熱功效。用于癰腫疔瘡、喉痹、丹毒、風(fēng)熱感冒、溫病發(fā)熱、熱血毒痢等。蒲公英［5］是菊科植物蒲公英、堿地蒲公英或同屬植物的全稱。蒲公英性寒，具有清熱解毒、散結(jié)消腫、清利濕熱等功效?，F(xiàn)代藥理研究表明，金銀花主要含有有機(jī)酸以及黃酮類化合物，如綠原酸、咖啡酸、原兒茶酸等，另含木犀草素、木犀草苷、揮發(fā)油、皂苷、鞣質(zhì)等，具有抗病毒、抗毒素、解熱抗炎等作用，所以對多種致病菌有抑制作用［6］。本實(shí)驗(yàn)觀察到金銀花水提物對革蘭氏陽性菌有明顯的抑制作用，對革蘭氏陰性菌抑制作用較弱，這與楊海霞等［7］觀察研究的結(jié)果一致。蒲公英主要成分包括黃酮類、酚酸類、揮發(fā)油類等，具廣譜抗菌消炎、調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤等作用，故對革蘭氏陽性菌及陰性菌皆有明顯的抑菌效果，這與孟靜思［8-9］的研究結(jié)果相符。二者聯(lián)合應(yīng)用抑菌作用比單藥作用均強(qiáng)。這也為臨床用藥提供了試驗(yàn)抑菌，同時(shí)從以上可以看出，中藥復(fù)方制劑的療效是現(xiàn)代藥理研究中藥單體所不能比擬的，更不能取代，兩者聯(lián)合增強(qiáng)了效果，同時(shí)也 改變了抗菌譜。當(dāng)然中藥復(fù)方制劑的工藝有待進(jìn)一步完善提高，才能更好地應(yīng)用于臨床。本實(shí)驗(yàn)只是對金銀花、蒲公英進(jìn)行了粗提，下一步將進(jìn)一步觀察研究其抑菌有效成分及最低抑菌濃度。

［1］黃秀華.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)［M］.北京：高等教育出版社，1999：62.

［2］蘇香萍，龔大春，張亞雄，等.金銀花二氧化碳超臨界萃取物的體外抑菌作用研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2009，20（4）：832-834.

［3］魯文茹，劉廣鐸，郭志勛，等.金銀花、連翹對溶珊瑚弧菌及其生物膜活性的影響［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2014，30（3）：297-300.

［4］陸茵，張大方.中藥藥理學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：84-86.

［5］侯京玲，周霄楠，趙興華，等.幾種蒲公英成分的提取及體外抑菌效果試驗(yàn)［J］.中國獸醫(yī)雜志，2016，52（12）：53-55.

［6］莊麗，張超，阿里穆斯.金銀花的藥理作用與臨床應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2013，40（2）：378-380.

［7］楊海霞，張孝霞，程小平，等.金銀花和野菊花乙醇提取物抑菌作用比較［J］.濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，36（2）：97-99.

［8］孟靜思，袁進(jìn)罡，馬輝.中草藥蒲公英的體外抑菌試驗(yàn)［J］.河北化工，2013，36（3）：29-31.

［9］張忠，張洪峰，聶尚芬，等.蒲公英抑菌的研究進(jìn)展［J］.中外健康和文摘，2012，9（17）：50-52.