楊健莉, 王 猛, 李兆陽, 鄭志紅
(中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部, 遼寧 沈陽10001)
實(shí)驗(yàn)動物是生命科學(xué)研究的重要對象和材料,作為活的試劑和度量衡被廣泛應(yīng)用于高等醫(yī)藥院校及綜合性大學(xué)進(jìn)行教學(xué)實(shí)驗(yàn)和科學(xué)研究[1]。在多數(shù)實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)單位,實(shí)驗(yàn)用動物供應(yīng)是屬于必須按時(shí)提供給購買單位,然而實(shí)驗(yàn)動物不同于其它商品,生產(chǎn)周期較長,一般需要2~3個(gè)月[2],而且各個(gè)單位對實(shí)驗(yàn)用動物的規(guī)格要求相對單一,只側(cè)重于體質(zhì)量和性別,使用量大,使用時(shí)間又相對集中[3],所以探尋一個(gè)行之有效的實(shí)驗(yàn)用動物生產(chǎn)繁殖方法,確保動物的生產(chǎn)量以及規(guī)格最大程度符合要求顯得非常重要。在本單位實(shí)驗(yàn)用小鼠的使用中,KM小鼠的使用數(shù)量遠(yuǎn)大于其它封閉群以及近交系小鼠,所以本文以KM小鼠作為研究對象,通過控制雌鼠哺乳仔鼠數(shù)量,探討對雌鼠繁殖性能和生長發(fā)育的影響。
6~8周齡清潔級KM小鼠140只,雌雄各半,中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供[SCXK(遼)2013-0001]。飼養(yǎng)于屏障環(huán)境中[SYXK(遼)2013-0007],溫度20~26℃,相對濕度40%~70%,10h/14h明暗交替,換氣次數(shù)18 次/h,使用北京科澳協(xié)力飼料有限公司[SCXK(京)2014-0010]生產(chǎn)的60Co滅菌全價(jià)飼料(水分49 g/kg,粗蛋白228 g/kg,粗脂肪41.3 g/kg,粗纖維35 g/kg,粗灰分68 g/kg,鈣13.1 g/kg,總磷7.6 g/kg),高溫高壓滅菌飲用水,自由采食。墊料使用刨花墊料, 一周更換兩次。
電子秤(型號LD5100-1), 分度值0.1 g, 購自沈陽龍騰電子有限公司。
選取6~8周齡KM小鼠70對,隨機(jī)分為2組,每組35對,按雌雄1∶1交配, 實(shí)驗(yàn)組在仔鼠出生2~3 d左右調(diào)整雌鼠帶仔數(shù)量, 保證每胎帶仔10只,21 d離乳,多余仔鼠補(bǔ)入仔鼠數(shù)少于10只的繁殖籠內(nèi),其余淘汰; 對照組雌鼠哺乳全部仔鼠, 21 d離乳。觀測和記錄小鼠1~3胎窩產(chǎn)仔數(shù)、仔鼠初生體質(zhì)量、仔鼠的離乳體質(zhì)量、離乳數(shù)量、離乳率以及胎間隔等。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果均使用±s表示,組間差異比較使用t檢驗(yàn)和x2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
從表1可以看出實(shí)驗(yàn)組從第2胎開始初生到離乳, 體質(zhì)量都明顯高于對照組(P<0.05),而且增長速度也要較高于對照組。從第二胎開始,實(shí)驗(yàn)組仔鼠的初生體質(zhì)量也要高于對照組(P<0.05)(表1)。
表1 兩組小鼠初生和離乳時(shí)體質(zhì)量的比較
實(shí)驗(yàn)組與對照組1~3胎的離乳率分別為98.22%±2.56%、99.46%±3.45%、98.76%±3.58%和96.23%±2.75%、95.45%±3.65%、93.75%±4.26%,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
實(shí)驗(yàn)組與對照組1~2胎及2~3胎的胎間隔分別為26.77±1.56 d、26.17±2.78 d和28.21±2.02 d、28.32±3.16 d, 二者差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
除第1胎的前2周兩組小鼠體質(zhì)量增長無明顯差異外,從第2胎開始,實(shí)驗(yàn)組仔鼠由于數(shù)量受到控制,可以得到充足的母乳,體質(zhì)量明顯高于對照組,詳見表2。
表2 兩組小鼠生長情況的比較 g
本研究主要通過控制母鼠帶仔數(shù)量的方式,來探討對封閉群小鼠的繁殖性能和生長發(fā)育的影響。本文仔鼠數(shù)量控制在10只,首先因?yàn)樵谥暗膶?shí)驗(yàn)研究中,雌鼠帶仔數(shù)量分別控制在10只(模仿理想狀態(tài)),13只(模仿日常狀態(tài)),16只(模仿特殊狀態(tài))的情況下進(jìn)行比較分析,結(jié)果表明帶仔數(shù)量為10只的情況下仔鼠生長狀態(tài)是最優(yōu)的[4],其次考慮雌鼠的乳頭總數(shù)為10個(gè),盡量保證一只仔鼠一個(gè)乳頭,這樣雌鼠的哺乳資源可以得到充分的利用,減輕哺乳壓力; 但是之前的實(shí)驗(yàn)只是簡單討論單一胎次下的不同帶仔數(shù)量對子代生長發(fā)育的影響,并未對母鼠的繁殖性能進(jìn)行詳細(xì)的分析,所以本文選擇帶仔數(shù)量為10只,通過比較實(shí)驗(yàn)組與對照組從第1胎到第3胎,兩組仔鼠的初生體質(zhì)量、雌鼠產(chǎn)仔數(shù)、仔鼠的離乳體質(zhì)量、離乳數(shù)量、離乳存活率以及胎間隔之間的差異,來進(jìn)一步研究控制雌鼠帶仔數(shù)量對雌鼠繁殖性能和仔鼠生長發(fā)育的影響,摸索更加有效的繁殖方法。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果和日常管理觀察表明,實(shí)驗(yàn)組通過控制仔鼠的數(shù)量,使其能夠得到充分的母乳和雌鼠更多的照料,實(shí)驗(yàn)組小鼠離乳時(shí)外觀比較健康,仔鼠狀態(tài)比較活躍,體質(zhì)量增長較快,離乳率也要高于對照組,雌鼠由于帶仔數(shù)量減少, 哺乳壓力減輕,所以胎間隔與對照組相比較有一定的縮短,胎間隔是衡量雌鼠繁殖性能的一個(gè)指標(biāo),所以控制帶仔數(shù)量對雌鼠繁殖性能也有一定的益處[5,6],延長小鼠的繁殖周期,提高生產(chǎn)量,能夠更好滿足實(shí)驗(yàn)要求,更有效為實(shí)驗(yàn)動物教學(xué)服務(wù)。而對照組,由于未對子代仔鼠數(shù)量進(jìn)行控制, 導(dǎo)致各個(gè)繁殖籠內(nèi)動物數(shù)量不均勻,有的繁殖籠內(nèi)仔鼠數(shù)量甚至達(dá)到18只,雌鼠的哺乳壓力增大,出現(xiàn)體質(zhì)量下降,精神渙散等現(xiàn)象[7]; 而有的繁殖籠內(nèi)動物數(shù)量少于10只,甚至只有2~3只,造成雌鼠哺乳資源的浪費(fèi),雖然每只仔鼠可以得到更加充足的母乳和充分的照料,但是由于其離乳時(shí)體質(zhì)量會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于仔鼠數(shù)量過多的繁殖籠,造成離乳動物體質(zhì)量分布不均勻,降低了教學(xué)用實(shí)驗(yàn)動物發(fā)放的可選擇范圍,不利于教學(xué)動物的正常供應(yīng)。
通過對雌鼠子代數(shù)量進(jìn)行控制,去弱留強(qiáng)的過程中,我們對子代小鼠的性別也可以進(jìn)行選擇性控制,根據(jù)各院系上報(bào)的教學(xué)計(jì)劃,合理控制雌雄比例,有計(jì)劃進(jìn)行生產(chǎn)繁育,從而可以進(jìn)一步提高封閉群小鼠的使用率,避免因?yàn)榇菩叟浔扰c教學(xué)需求不符,耽誤實(shí)驗(yàn)動物教學(xué)的進(jìn)度。
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