肖云峰，李文妍，馬睿婷，喬俊纏

（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學新藥安全評價研究中心，內(nèi)蒙古呼和浩特 010110）（2.內(nèi)蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院藥學處，內(nèi)蒙古呼和浩特 010017）（3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010000）（4.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學藥學院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010110）

近年來，我國動脈粥樣硬化引起的心腦血管疾病發(fā)生率顯著升高，而其最重要的誘發(fā)因素為高脂血癥[1]。高脂血癥，是指脂肪代謝或運轉(zhuǎn)異常使血漿中一種或多種脂質(zhì)濃度超出正常范圍的而誘發(fā)的一系列疾病[2]，即為古籍中常述之為“膏”的病癥表現(xiàn)?！饵S帝內(nèi)經(jīng)靈樞集注》記載：中焦之氣，蒸津液化，其精微溢于外則皮肉膏肥，余于內(nèi)則清育豐滿[3]。研究發(fā)現(xiàn)，高血脂癥會導致機體氧自由基增加，抗氧化能力下降，脂質(zhì)過氧化作用增強[4]；臨床主要表現(xiàn)為血管硬化、血漿或血清渾濁、血管某部位形成斑塊等。目前，臨床常使用他汀類藥物治療高血脂癥，但需長期服用，副作用較多。因此，研究具有輔助調(diào)節(jié)血脂功能的保健食品日益受到關(guān)注。

和輝膠囊以丹參、蓽茇和沙棘為主要原料，是一種具有輔助降脂功能的保健食品。丹參祛瘀止痛、活血通經(jīng)、清心除煩?！侗窘?jīng)》記載：丹參主心腹邪氣，寒熱積聚；破癥除瘕，止煩滿，益氣；臨床主要用于冠心病以及血栓閉塞性脈管炎等疾病的治療[5,6]。蓽茇溫中散寒，下氣止痛。《本草綱目》記載：蓽茇辛熱，入陽明經(jīng)散浮熱；臨床用于脘腹冷痛、嘔吐、泄瀉以及冠心病等疾病的治療[7,8]。沙棘能消食化滯，活血散瘀?！端牟酷t(yī)典》記載：沙棘健脾養(yǎng)胃、破瘀治血；臨床用于消化不良、食積腹痛以及跌撲瘀腫等疾病的治療[9～11]。組方后發(fā)現(xiàn)，和輝膠囊不僅能夠改善血脂異常、脂肪肝和各種肥胖相關(guān)的癥狀，而且對血脂異常所引發(fā)的高血壓、糖尿病具有良好的調(diào)節(jié)作用。本文就和輝膠囊的食用安全問題，進行毒理學研究，報告如下。

1 材料與方法

1.1 受試物

和輝膠囊，內(nèi)容物為黃棕色顆粒和粉末（內(nèi)蒙古謹康醫(yī)藥科技有限公司，批號 20101014），基本組方為丹參、蓽茇和沙棘等藥食同源的物品；粒重0.32 g，人體推薦用量為3次/d，3粒/次，常溫保存。

1.2 實驗動物及飼養(yǎng)環(huán)境

SD大鼠，清潔級，由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證編號：SCXK（軍）2007-007。

昆明種小鼠，清潔級，由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證編號：SCXK（軍）2007-007。全部實驗均于陜西省中醫(yī)醫(yī)院/陜西省疾病預防控制中心開展，實驗動物使用許可證編號：SYXK（陜）2007-004。

1.3 主要儀器與試劑

全自動生化分析儀，型號OLYMPUS AU400；全自動血細胞計數(shù)儀，型號 HEMAVET950FS；電子天平，型號YB1201/0.1 g；電子天平，型號DT200A/0.01 g；電子天平，型號BS323S320/0.001 g；生物顯微鏡，型號OLYMPUS41。

1.4 主要試劑

復方環(huán)磷酰胺片，天津金世制藥有限公司；阿的平，Sigma公司；注射用鹽酸柔紅霉素，浙江海正藥業(yè)股份有限公司；疊氮化鈉，Sigma公司；2-氨基芴，Sigma公司；絲裂霉素C，Sigma公司；1,8-二羥基蒽醌，Sigma公司。

1.5 試驗方法

1.5.1 大鼠急性經(jīng)口毒性試驗[12]

選取SD大鼠20只，雌、雄各半，體重180～220 g，于試驗前隔夜禁食12 h。將受試物按最大耐受劑量設(shè)計為15.0 g/kg·bw，試驗時稱取樣品50.0 g加蒸餾水至100 mL制成混懸液備用，以1.0 mL/100 g·bw的灌胃劑量，給予大鼠灌胃三次（間隔4 h）。觀察其飲食情況、活動情況、中毒癥狀及死亡現(xiàn)象等，連續(xù)14 d。按急性毒性劑量分級標準評價受試物的急性毒性強弱。

1.5.2 遺傳毒性試驗[13～15]

1.5.2.1 小鼠骨髓細胞微核試驗

選取昆明種小鼠50只，雌、雄各半，體重25～30 g，采用數(shù)字隨機法分為5組，每組10只。將受試物設(shè)3個劑量組，分別為10.0 g/kg·bw、5.0 g/kg·bw、2.5 g/kg·bw，同時設(shè)陰性對照組（蒸餾水）和陽性對照組（環(huán)磷酰胺40 mg/kg·bw）。將受試物10.0 g、5.0 g、2.5 g各加蒸餾水至20 mL分別配成50.0%、25.0%、12.5%的混懸液。以0.2 mL/10 g·bw的灌胃劑量，給予小鼠灌胃兩次（間隔24 h）。第二次灌胃6 h后，頸椎脫臼處死小鼠，取其股骨骨髓用小牛血清稀釋涂片，甲醇固定，Giemsa染色。在光學顯微鏡下，每只小鼠計數(shù)1000個嗜多染紅細胞（PCE），觀察含有微核的嗜多染紅細胞數(shù)，微核率以千分率表示；同時計數(shù)200個嗜多染紅細胞，計算嗜多染紅細胞與成熟紅細胞的比值（PCE/NCE）。采用卡方檢驗統(tǒng)計處理結(jié)果，若試驗組的微核率比陰性對照組高，并有明顯的劑量-反應關(guān)系和統(tǒng)計學意義，則為陽性結(jié)果。

1.5.2.2 小鼠精子畸形試驗

選取昆明種小鼠50只，雄性，體重25～35 g，數(shù)字隨機法分為5組，每組10只。將受試物設(shè)3個劑量組，分別為 10.0 g/kg·bw、5.0 g/kg·bw、2.5 g/kg·bw，同時設(shè)陰性對照組（蒸餾水）和陽性對照組（環(huán)磷酰胺40 mg/kg·bw）。將受試物10.0 g、5.0 g、2.5 g各加蒸餾水至20 mL分別配成50.0%、25.0%、12.5%的混懸液。每天以0.2 mL/10 g·bw的灌胃劑量，給予小鼠灌胃一次，連續(xù)5 d。于首次給受試物后的第35 d，頸椎脫臼處死小鼠，取其雙側(cè)附睪的精子于生理鹽水稀釋液涂片，甲醇固定，伊紅染色。在光學顯微鏡下，每只小鼠計數(shù)完整精子1000個，計算精子畸形率。采用Wilcoson秩和檢驗統(tǒng)計處理結(jié)果，若試驗組的精子畸形率比陰性對照組增高，并有明顯的劑量-反應關(guān)系和統(tǒng)計學意義，則為陽性結(jié)果。

1.5.2.3 Ames試驗

將受試物設(shè)計 5000 μg/皿、1000 μg/皿、200 μg/皿、40 μg/皿、8 μg/皿五個劑量組。稱取受試物1.0 g加蒸餾水至20 mL配成5%濃度的混懸液（高劑量），高壓滅菌（0.103 MPa，20 min）后使用，依次加無菌水5倍稀釋為其它各劑量的混懸液備用。另設(shè)自然回變對照組、陰性對照組（蒸餾水）和陽性對照組（環(huán)磷酰胺）。用Ames試驗標準菌株TA97、TA98、TA100和TA102，在加與不加肝S-9混合液的條件下，分別對受試物做平板摻入法Ames試驗。各菌株每劑量做三個平行皿，每皿加菌加樣各0.1 mL，整個試驗重復二次，培養(yǎng)48 h后，記錄各皿回變菌落數(shù)。若受試物的回變菌落數(shù)是自然回變菌落數(shù)的二倍以上且有劑量-反應關(guān)系者，則為誘變試驗陽性。

1.5.3 大鼠30 d喂養(yǎng)試驗[16,17]

選取SD大鼠80只，雌、雄各半，體重51.0～77.3 g，數(shù)字隨機法分為4組，每組20只。受試物設(shè)3個劑量組，分別為 4.80 g/kg·bw（相當于人體推薦用量的 100 倍）、2.40 g/kg·bw 和 1.20 g/kg·bw，另設(shè)一個陰性對照組（蒸餾水）。將受試物48 g、24 g和12 g各加蒸餾水至100 mL分別配成48%、24%和12%的混懸液備用，各組均以1.0 mL/100 g·bw灌胃劑量（陰性對照組灌胃等容量蒸餾水）每天給予小鼠灌胃一次，連續(xù)30 d。小鼠自由進食和飲水，每天觀察并記錄動物的一般表現(xiàn)（包括外表、體形、行動、呼吸、被毛、鼻、口腔、眼、耳、生殖器、尿、糞便及其它異常），每周稱體重及進食量，最后計算食物利用率。試驗結(jié)束時，摘眼球取血，用全自動生化分析儀測定血清生化指標（血紅蛋白、紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)和白細胞分類計數(shù)等）。然后將試驗動物脫頸椎處死，進行大體解剖，取肝、腎、脾、睪丸等臟器稱重，觀察有無異常，并將陰性對照組和高劑量組動物的肝、腎、脾、胃腸、睪丸（卵巢）固定，進行組織病理學檢查。

1.5.4 統(tǒng)計學方法[18]

試驗數(shù)據(jù)應用SPSS統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。在統(tǒng)計分析時，先對數(shù)據(jù)進行方差齊性檢驗，若方差齊，采用單因素方差分析進行總體比較，發(fā)現(xiàn)差異再用Dunnett檢驗進行多個劑量組與對照組均數(shù)間的兩兩比較。若方差不齊則對數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，滿足方差齊性檢驗后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)仍未達到方差齊要求，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計分析。

2 實驗結(jié)果

2.1 大鼠急性毒性試驗

以受試物最大劑量 15.0 g/kg·bw 給予大鼠灌胃后，大鼠飲食活動正常，生長良好，未見體重受到影響，未發(fā)現(xiàn)大鼠有明顯中毒表現(xiàn)及死亡現(xiàn)象。試驗結(jié)束解剖大鼠，大體觀察：肝、腎、脾、胃、腸、心、肺等主要臟器均未見明顯異常改變。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003年版）中急性毒性分級標準，保健食品和輝膠囊急性毒性屬無毒級。結(jié)果表明，相當于人體推薦用量312.5倍劑量的和輝膠囊對雌、雄大鼠體重及臟器均無影響，屬無毒級保健食品，結(jié)果見表1。

表1 和輝膠囊對急性毒性試驗大鼠體重的影響Table 1 The effect of Hehui capsules on the body weight of rats in acute toxicity test

2.2 遺傳毒性試驗

2.2.1 小鼠骨髓細胞微核試驗

與陰性對照組相比，雌、雄小鼠陽性對照組微核率均明顯升高，具有極顯著性差異（p＜0.01）；受試物各劑量組微核率與陰性對照組，無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊在試驗劑量 2.5 g/kg·bw～10.0 g/kg·bw 范圍內(nèi)，小鼠骨髓細胞微核試驗結(jié)果為陰性。初步認為和輝膠囊無明顯致小鼠骨髓細胞染色體完整性受損及染色體分離作用。

2.2.2 小鼠精子畸形試驗

與陰性對照組比較，陽性對照組小鼠畸形率明顯高于陰性對照組，有極顯著性差異（p＜0.01）；受試物各劑量組小鼠精子畸形率與陰性對照組比較，均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊在試驗劑量2.5 g/kg·bw～10.0 g/kg·bw 范圍內(nèi)，對小鼠精子無明顯毒性，初步認為無明顯致小鼠精子畸形作用。結(jié)果見表3。

表2 和輝膠囊對小鼠骨髓細胞微核試驗的影響Table 2 The effect of Hehui capsules on the bone marrow cells of mice in micronucleus test

表3 和輝膠囊對小鼠精子畸形試驗的影響Table 3 The effect of Hehui capsules on the mouse sperm abnormality test

2.2.3 Ames試驗

與自然回變菌落數(shù)相比，受試物各劑量組及陰性對照組各菌株回變菌落數(shù)均未超過自然回變菌落數(shù)的二倍，而陽性對照組菌落數(shù)達到自然回變菌落數(shù)的二倍以上。結(jié)果表明，和輝膠囊在試驗劑量8 μg/皿～5000 μg/皿范圍內(nèi)，Ames試驗結(jié)果為陰性。未發(fā)現(xiàn)和輝膠囊存在誘變作用。結(jié)果見表4。

表4 和輝膠囊對Ames試驗的影響Table 4 The effect of Hehui capsules on the Ames test（±s）

表4 和輝膠囊對Ames試驗的影響Table 4 The effect of Hehui capsules on the Ames test（±s）

菌株組別 TA97 TA98 TA100 TA102 S-9(-) S-9(+) S-9(-) S-9(+) S-9(-) S-9(+) S-9(-) S-9(+)陰性對照 144±7 146±14 37±2 37±3 168±12 167±11 269±15 278±9陽性對照 2721±233 1808±192 2956±144 5808±194 2857±212 2951±298 2169±284 969±62自然回變 148±22 147±8 38±7 35±2 173±19 161±12 275±23 278±28 5000 μg 皿 151±12 158±21 33±3 30±2 156±6 167±14 276±24 280±22 1000 μg 皿 150±8 160±10 39±2 38±2 186±6 170±9 273±21 270±11 200 μg/皿 138±10 153±9 34±4 33±1 180±16 172±3 281±9 277±14 40 μg/皿 151±5 140±22 37±7 33±6 174±24 172±22 287±8 282±4 8 μg/皿 142±15 145±14 39±5 38±8 184±4 171±8 266±9 274±4阿的平10 μg/皿10 μg/皿 柔毛霉素6.0 μg/皿2AF 2AF 10 μg/皿NaN3 1.5 μg/皿2AF 10 μg/皿絲裂霉素C 0.5 μg/皿1,8-二羥基蒽醌50.0 μg/皿

2.3 30 d喂養(yǎng)試驗

與陰性對照組比較，受試物各劑量組雌、雄鼠各期體重均無顯著性差異（p＞0.05）；受試物各劑量組雌、雄大鼠各周進食量、食物利用率及總食物利用率均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊長期食用不會影響大鼠體重、進食，觀察期內(nèi)未發(fā)現(xiàn)大鼠出現(xiàn)明顯毒作用表現(xiàn)。

2.3.1 對大鼠體重的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠給藥期間體重均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠給藥期間體重增長無影響。結(jié)果見表5。

表5 和輝膠囊對大鼠體重的影響Table 5 The effect of Hehui capsules on the body weight of rats（±s）

表5 和輝膠囊對大鼠體重的影響Table 5 The effect of Hehui capsules on the body weight of rats（±s）

性別 劑量/(g/kg?bw) 始重/g 一周末/g 二周末/g 三周末/g 終重/g陰性對照 63.39±8.04 113.67±10.24 149.28±15.32 172.58±14.22 199.16±12.29雌性雄性4.80 63.8±8.59 111.9±11.20 152.1±10.05 179.45±7.63 202.01±9.11 2.40 63.7±8.62 110.00±12.40 147.56±11.60 172.27±10.41 194.31±8.80 1.20 63.38±8.10 112.43±9.66 151.19±7.80 174.60±8.36 198.38±6.00 4.80 61.90±8.76 116.18±13.40 168.76±16.55 216.90±20.34 268.07±18.08 2.40 62.00±8.51 116.97±11.18 172.88±13.03 225.53±15.84 276.00±15.49 1.20 62.10±8.35 117.18±7.29 172.91±9.01 221.39±12.38 267.34±20.25陰性對照 61.90±8.63 119.98±11.80 171.29±18.46 226.78±16.80 285.00±23.66

2.3.2 對大鼠進食量和食物利用率的影響

2.3.2.1 對大鼠各周進食量的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠給藥期間各周進食量均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠各周進食無影響。結(jié)果見表6。

2.3.2.2 對大鼠食物利用率的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠給藥期間食物利用率均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠給藥期間食物利用率無影響。結(jié)果見表7。

2.3.2.3 對大鼠總食物利用率的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠給藥期間總食物利用率均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠給藥期間總食物利用率無影響。

表6 和輝膠囊對大鼠各周進食量的影響Table 6 The effect of Hehui capsules on the food intake of rats each week（±s，n=10）

表6 和輝膠囊對大鼠各周進食量的影響Table 6 The effect of Hehui capsules on the food intake of rats each week（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg?bw) 第一周/g 第二周/g 第三周/g 第四周/g陰性對照 95.17±7.69 101.08±11.09 101.68±8.64 149.04±10.52雌性雄性4.80 94.84±6.35 106.26±10.43 109.56±8.79 149.39±16.18 2.40 91.13±3.85 101.14±9.74 97.34±8.48 144.24±12.48 1.20 94.12±6.56 102.07±6.87 106.84±8.85 143.21±16.89陰性對照 105.01±9.12 119.81±14.27 142.99±11.42 204.18±14.17 4.80 98.76±6.49 120.82±11.69 135.97±16.83 198.43±14.03 2.40 98.64±5.04 124.72±4.79 135.42±7.45 194.10±16.19 1.20 100.54±4.00 120.78±13.22 133.88±15.77 193.91±24.52

表7 和輝膠囊對大鼠各周食物利用率的影響Table 7 The effect of Hehui capsules on the weekly food utilization of rats（±s，n=10）

表7 和輝膠囊對大鼠各周食物利用率的影響Table 7 The effect of Hehui capsules on the weekly food utilization of rats（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg?bw) 第一周/% 第二周/% 第三周/% 第四周/%陰性對照 52.84±1.69 34.91±6.03 23.03±4.27 17.67±3.50雌性雄性4.80 50.60±2.54 38.23±5.43 24.56±5.29 14.98±2.25 2.40 50.60±3.19 37.07±3.19 25.40±6.02 15.17±2.12 1.20 52.15±2.30 38.14±5.47 21.69±3.99 16.39±2.96陰性對照 55.37±2.55 42.38±6.70 38.84±4.82 28.33±5.91 4.80 54.92±4.46 43.56±2.41 35.57±2.66 25.82±3.69 2.40 55.74±4.02 44.82±2.36 38.86±3.59 25.78±6.65 1.20 54.76±3.30 46.48±5.01 36.42±4.97 23.41±3.21

表8 和輝膠囊對大鼠總食物利用率的影響Table 8 The effect Hehui capsules on the total food utilization of rats（±s，n=10）

表8 和輝膠囊對大鼠總食物利用率的影響Table 8 The effect Hehui capsules on the total food utilization of rats（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg·bw) 體重總增重/g 總進食量/g 總食物利用率/%陰性對照 135.77±10.10 446.97±24.66 30.38±1.55雌性雄性4.80 138.12±12.45 460.05±18.32 30.00±2.04 2.40 130.52±7.35 433.85±15.18 30.10±1.75 1.20 135.00±7.74 446.24±19.30 30.28±1.88陰性對照 223.10±26.09 571.99±34.86 38.96±3.32 4.80 206.17±12.11 553.98±37.69 37.27±1.75 2.40 214.00±12.72 552.88±17.36 38.72±2.21 1.20 205.24±18.97 549.11±41.42 37.39±2.31

2.3.3 對大鼠血常規(guī)的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠血常規(guī)各指標均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠血液中紅細胞、白細胞和血紅蛋白的數(shù)量變化及形態(tài)分布無影響。結(jié)果見表9。

表9 和輝膠囊對大鼠血常規(guī)的影響Table 9 The effect of Hehui capsules on the blood routine of rats（±s，n=10）

表9 和輝膠囊對大鼠血常規(guī)的影響Table 9 The effect of Hehui capsules on the blood routine of rats（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg?bw) 血紅蛋白/(g/L) 紅細胞計數(shù)/(1012/L) 白細胞計數(shù)/(109/L)陰性對照 158.20±20.88 7.08±0.86 10.86±3.54雌性雄性4.80 166.40±13.11 7.50±0.53 11.12±2.78 2.40 163.00±17.55 7.43±0.74 12.06±3.66 1.20 167.10±9.67 7.60±0.48 10.64±2.96陰性對照 164.80±11.04 7.53±0.47 10.62±1.33 4.80 162.10±11.12 7.41±0.38 9.61±1.77 2.40 163.30±7.85 7.47±0.35 11.30±1.54 1.20 154.40±29.87 7.25±0.73 10.83±2.92

2.3.4 對大鼠生化指標的影響

與陰性對照組比較，雄鼠受試物各劑量組肌酐均有顯著性差異（p＜0.05），受試物高劑量組總膽固醇有極顯著性差異（p＜0.01）；其余受試物各劑量組各項生化指標均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，雄性雄鼠受試物各劑量組肌酐和高劑量組總膽固醇均低于陰性對照組，但均在本實驗室正常參考值范圍內(nèi)，故無生物學意義。結(jié)果見表10。

表10 和輝膠囊對大鼠生化指標的影響Table 10 The effect of Hehui capsules on the biochemical indicators of rats(1)（±s，n=10）

表10 和輝膠囊對大鼠生化指標的影響Table 10 The effect of Hehui capsules on the biochemical indicators of rats(1)（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg?bw) 谷丙轉(zhuǎn)氨酶/(U/L) 谷草轉(zhuǎn)氨酶/(U/L) 白蛋白/(g/L) 總蛋白/(g/L) 白/球陰性對照 30.15±5.46 195.40±37.62 34.40±2.42 71.32±4.11 0.94±0.08雌性4.80 33.11±8.50 167.80±12.52 34.50±1.40 71.02±3.15 0.94±0.07 2.40 31.50±12.50 176.70±39.74 34.59±2.39 71.70±4.94 0.95±0.05 1.20 34.03±7.72 184.80±21.09 34.82±1.14 71.75±2.66 0.96±0.05雄性陰性對照 33.91±5.80 198.60±23.66 33.00±1.27 66.61±1.12 1.00±0.07 4.80 34.18±7.67 206.50±17.92 31.93±1.21 64.38±1.62 0.97±0.05 2.40 39.87±8.82 222.80±28.40 31.42±2.09 64.97±2.82 0.93±0.10 1.20 42.39±10.47 204.90±20.20 31.99±2.18 64.90±2.85 0.97±0.08性別 劑量/(g/kg?bw) 尿素氮/(mmol/L) 肌酐/(μmol/L) 血糖/(mmol/L) 總膽固醇/(mmol/L)甘油三酯/(mmol/L)雌性 陰性對照 6.61±0.72 50.54±2.50 3.44±0.63 2.06±0.35 1.22±0.34 4.80 6.71±1.06 51.84±4.50 3.63±0.63 1.82±0.27 1.44±0.34

注：與陰性對照組比較，*p＜0.05，**p＜0.01。

2.3.5 病理學大體解剖觀察檢查

各組大鼠肝臟、腎臟、胃和脾臟的大體檢查結(jié)果均正常，病理組織學檢查也未見明顯的病理改變。2.3.5.1 對大鼠臟器重量的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠臟器重量均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠臟器重量無影響。結(jié)果見表11。

表11 和輝膠囊對大鼠臟器重量的影響Table 11 The effect of Hehui capsules on the organ weight of rats（±s，n=10）

表11 和輝膠囊對大鼠臟器重量的影響Table 11 The effect of Hehui capsules on the organ weight of rats（±s，n=10）

性別 劑量/(g/kg·bw) 空腹重/g 肝重/g陰性對照 189.33±9.68 6.18±0.70雌性4.80 193.05±7.38 6.62±0.48 2.40 186.05±6.36 6.20±0.44 1.20 189.48±4.50 6.22±0.41雄性陰性對照 268.61±19.10 8.60±0.84 4.80 255.52±14.73 8.16±0.63 2.40 259.91±9.59 7.91±0.34 1.20 255.94±12.08 7.92±0.58腎重/g 脾重/g 1.52±0.12 0.50±0.08 1.56±0.08 0.48±0.04 1.53±0.11 0.47±0.09 1.55±0.10 0.45±0.09 2.39±0.17 0.72±0.13 2.21±0.20 0.68±0.10 2.24±0.15 0.69±0.11 2.26±0.32 0.61±0.13

2.3.5.2 對大鼠臟器系數(shù)的影響

與陰性對照組相比，受試物各劑量組大鼠臟器系數(shù)均無顯著性差異（p＞0.05）。結(jié)果表明，和輝膠囊對大鼠臟器系數(shù)無影響。結(jié)果見表12。

表12 和輝膠囊對大鼠臟器系數(shù)的影響（±s，n=10）Table 12 The effect for rats of organ coefficient by Hehui capsules (±s, n=10)

表12 和輝膠囊對大鼠臟器系數(shù)的影響（±s，n=10）Table 12 The effect for rats of organ coefficient by Hehui capsules (±s, n=10)

性別 劑量/(g/kg·bw) 肝臟系數(shù)/g陰性對照 3.26±0.26雌性4.80 3.43±0.22 2.40 3.33±0.16 1.20 3.28±0.22雄性陰性對照 3.20±0.26 4.80 3.19±0.19 2.40 3.04±0.10 1.20 3.10±0.23腎臟系數(shù)/g 脾臟系數(shù)/g 0.80±0.04 0.26±0.04 0.81±0.03 0.25±0.02 0.82±0.05 0.25±0.04 0.82±0.05 0.24±0.04 0.89±0.05 0.27±0.04 0.86±0.05 0.27±0.04 0.86±0.04 0.27±0.05 0.88±0.12 0.24±0.05

3 結(jié)論

為科學地評價和輝膠囊作為保健食品的安全性，本次試驗中，對其進行了大鼠急性經(jīng)口毒性試驗、3項遺傳毒性試驗和大鼠30 d喂養(yǎng)試驗。大鼠急性經(jīng)口毒性試驗結(jié)果顯示和輝膠囊對雌、雄大鼠急性經(jīng)口最大耐受劑量（MTD）均大于15.0 g/kg·bw，急性經(jīng)口毒性屬無毒級。Ames試驗采用標準的摻入法，實驗結(jié)果顯示和輝膠囊受試樣品各劑量組的回變菌落數(shù)均未出現(xiàn)超過對照組回變菌落數(shù)的2倍，且無劑量-反應關(guān)系，Ames試驗結(jié)果為陰性，表明和輝膠囊無致突變作用。小鼠骨髓微核試驗和小鼠精子畸變試驗的結(jié)果皆為陰性，表明和輝膠囊對哺乳動物體細胞和生殖細胞無致染色體畸變和基因突變的作用。上述3項遺傳毒性試驗采用不同試驗方法對和輝膠囊進行了遺傳毒性檢測，結(jié)果均為陰性，表明該樣品無遺傳毒性。大鼠30 d喂養(yǎng)試驗中，在1.20、2.40和4.80 g/kg·bw劑量下(相當于人體推薦量的25、50和100倍)，連服1個月，大鼠一般生理體征、行為、大小便和皮毛等均無異常，各臟器未見明顯的功能損害，體重和食物利用率指標正常，血液學和血液生化學指標均無統(tǒng)計學差異，組織病理學檢查結(jié)果未見特異性病理改變。以上試驗表明在本試驗條件下口服和輝膠囊無明顯毒副作用。