多里坤·努爾沙發(fā),米吉提·莫合塔爾汗

布魯氏菌病,簡(jiǎn)稱(chēng)布病,是由布魯氏菌屬引起的人獸共患病.有關(guān)調(diào)查表明動(dòng)物鼻孔和口腔黏膜是新宿主最容易感染途徑之一[1].患病畜是人感染布病的主要傳染源,因此部分工業(yè)化國(guó)家,花費(fèi)大量財(cái)力消除家畜布病,并且取得了較好的防控效果[2].新疆畜牧業(yè)大體上是在健康有序發(fā)展,但是現(xiàn)有的養(yǎng)殖、流通、移動(dòng)方式的多樣性、復(fù)雜性及預(yù)防措施的不全面性,使布病陽(yáng)性畜的數(shù)量呈逐年上升趨勢(shì).為了解新疆部分地區(qū),在不同養(yǎng)殖方式狀態(tài)下布病流行狀況,于2015年上半年在新疆維吾爾自治區(qū)14個(gè)縣開(kāi)展了病原學(xué)監(jiān)測(cè)、現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷調(diào)查的同時(shí),對(duì)其中6縣的不同養(yǎng)殖方式的家畜進(jìn)行了血清學(xué)監(jiān)測(cè),根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果對(duì)各地在實(shí)際防控工作中所采取的預(yù)防措施、檢測(cè)方法進(jìn)行分析,并且提出相關(guān)建議等,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下.

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病原學(xué)及血清樣品 在未開(kāi)展布病免疫的14個(gè)縣,不分養(yǎng)殖方式收集羊流產(chǎn)胎兒167份,在其中的6個(gè)縣不同養(yǎng)殖方式點(diǎn)采集牛血清1 895份和羊血清2 446份,共4 341份血清,上述樣本按相關(guān)要求保存和檢測(cè).

1.1.2 主要診斷試劑 布魯氏菌病虎紅平板、試管凝集抗原及陽(yáng)性、陰性血清,由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司提供.培養(yǎng)基胰蛋白示(TRYPTOSE),購(gòu)自O(shè)XOID LTD.BASINGSTOKE,HAMPSHIRE.ENLAND.AMOS-PCR試劑盒2×Taq PCR Master Mix購(gòu)自北京莊明國(guó)際生物基因科技有限公司.布病S2苗及A19苗、由新疆畜牧科學(xué)院提供.

1.1.3 器材 一次性平皿、PCR儀、電泳儀、圖像分析儀等.

1.2 方法

1.2.1 問(wèn)卷調(diào)查 根據(jù)此次流行病學(xué)調(diào)查的目的,設(shè)計(jì)了含飼養(yǎng)方式、疫苗免疫、繁育方式、移動(dòng)、檢測(cè)、養(yǎng)殖戶(hù)對(duì)布病的了解程度等內(nèi)容的調(diào)查表,逐戶(hù)分別詳細(xì)記錄.

1.2.2 培養(yǎng)基的制作 根據(jù)布病專(zhuān)用培養(yǎng)基制作方法制作,并根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室常年工作經(jīng)驗(yàn)確定配置溶液p H值,接種培養(yǎng)疫苗等方式確定培養(yǎng)基的合格率.

1.2.3 結(jié)果判定依據(jù) 血清學(xué)檢測(cè)中虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)和試管凝集實(shí)驗(yàn)(SAT),根據(jù)動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)(GB/18646-2002)指定方法開(kāi)展.細(xì)菌學(xué)檢測(cè),按常規(guī)布魯氏菌屬確定方法分離菌株.AMOS-PCR檢測(cè),按試劑盒說(shuō)明及姜海等[3]介紹方法開(kāi)展.

2 結(jié) 果

2.1 問(wèn)卷調(diào)查調(diào)查結(jié)果 被調(diào)查的14個(gè)縣均未開(kāi)展布病疫苗免疫,各縣也都開(kāi)展過(guò)不同程度的布魯氏菌病檢測(cè),基本了解本縣布病流行狀況,但都未開(kāi)展檢疫凈化工作,牧區(qū)散養(yǎng)戶(hù)自繁自養(yǎng)率較高,但在放牧狀態(tài)下和其它羊群、牛群接觸機(jī)率高,羊繁育方式為自然交配,農(nóng)區(qū)散養(yǎng)戶(hù)和規(guī)模場(chǎng)家畜流動(dòng)性高,飼養(yǎng)密度大,農(nóng)區(qū)散養(yǎng)戶(hù)幾戶(hù)共用種畜,共同特點(diǎn)是對(duì)布病了解不深或不了解,自我保護(hù)和防疫意識(shí)淡薄,羊群流產(chǎn)率在逐年升高,存在不同程度逃避檢疫情況.

2.2 不同養(yǎng)殖方式牛布病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果 在4個(gè)縣共檢出布病陽(yáng)性牛10頭,平均陽(yáng)性率為0.53%,除屠宰場(chǎng)其他養(yǎng)殖方式均有不同程度布病感染,其中規(guī)模戶(hù)陽(yáng)性率為0.95%,散養(yǎng)戶(hù)陽(yáng)性率為0.43%,規(guī)模戶(hù)的場(chǎng)群感染率高于散養(yǎng)戶(hù)場(chǎng)群感染率分別為17.6%和2.7%,詳見(jiàn)表1.

表1 不同養(yǎng)殖方式牛布病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果和牛布病場(chǎng)群感染情況Tab.1 Serological test results of cattle Brucella and infection results of cattle farm herds Brucella in different breeding way

2.3 不同養(yǎng)殖方式羊布病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果 對(duì)6個(gè)縣血清樣品的血清學(xué)檢測(cè)當(dāng)中,在5個(gè)縣檢測(cè)到布病陽(yáng)性血清88份.規(guī)模戶(hù)陽(yáng)性率為5.84%,散養(yǎng)戶(hù)陽(yáng)性率2.67%,屠宰場(chǎng)陽(yáng)性率0.64%.規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性率明顯高于其他兩個(gè)場(chǎng)點(diǎn),規(guī)模戶(hù)的場(chǎng)群感染率高于散養(yǎng)戶(hù)場(chǎng)感染率,分別為32.26%和21.43%,詳見(jiàn)表2.2.4 病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果 對(duì)14個(gè)縣的167份羊流產(chǎn)胎兒樣品細(xì)菌學(xué)檢測(cè),在7個(gè)縣的病原樣品中分離羊種布魯氏菌19株、平均檢出率為11.3%,該區(qū)域引起母羊流產(chǎn)的主要致病菌是羊種布魯氏菌,此次由于未收集到牛的病原學(xué)樣品故暫不做評(píng)論.

表2 不同養(yǎng)殖戶(hù)羊布病血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果Tab.2 Serological test results of sheep Brucella and infection results of sheep farm herds Brucella in different breeding way

3 討 論

本調(diào)查表明,羊種布魯氏菌平均出菌率為11.3%.其羊布病血清學(xué)平均感染率與湖北省莫縣不同規(guī)模羊群感染率接近[4].上海市奶牛布病檢測(cè)陽(yáng)性率低于0.1%與本次牛平均陽(yáng)性率0.53%[5].現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果均顯示布病在這些地區(qū)的規(guī)模場(chǎng)感染率的原因和飼養(yǎng)密度、飼養(yǎng)方式、繁育方式與檢疫凈化度有密切關(guān)系,主要表現(xiàn)在規(guī)模場(chǎng)牛羊流動(dòng)性頻繁,接觸機(jī)會(huì)較多,沒(méi)有系統(tǒng)的檢疫進(jìn)場(chǎng)制度,因此也成為疫病收集、擴(kuò)大、釋放的感染源.規(guī)模牛群一年全檢1至2次、部分牛群納入農(nóng)牧業(yè)保險(xiǎn),檢出陽(yáng)性可以實(shí)施撲殺處理,其余畜群只是進(jìn)行抽樣檢測(cè),陽(yáng)性畜由于沒(méi)有撲殺經(jīng)費(fèi)而無(wú)法處理,所以造成本監(jiān)測(cè)中牛陽(yáng)性率明顯低于羊陽(yáng)性率.養(yǎng)殖戶(hù)個(gè)人防病意識(shí)不強(qiáng)、科學(xué)規(guī)范養(yǎng)殖水平低、糞便墊料等污染物未能按有關(guān)要求進(jìn)行無(wú)害化處理的情況下運(yùn)到農(nóng)田當(dāng)肥料或棄置荒野,污染環(huán)境,成為感染源,陽(yáng)性畜群和健康畜群同用草場(chǎng)等導(dǎo)致感染持續(xù)不斷.

根據(jù)此次調(diào)查結(jié)果,分析造成本疫情的主要原因可能有一下幾種:一是暴露風(fēng)險(xiǎn),牛羊等家畜未進(jìn)行免疫接種;二是釋放風(fēng)險(xiǎn),感染源未清除;三是感染途徑目前無(wú)法避免,傳染病擴(kuò)散的要素都存在,牛和羊已成為該區(qū)域主要布病傳染源,其中羊種布魯氏菌對(duì)人、畜均有較強(qiáng)致病力.在易感動(dòng)物中容易造成暴發(fā)和流行等[6],應(yīng)引起有關(guān)部門(mén)的高度警惕和重視.該疫情在可控范圍內(nèi),如果免疫、檢疫、撲殺、消毒、凈化措施不及時(shí)、不全面,疫情進(jìn)一步擴(kuò)散、蔓延的可能性較大.

考慮到本監(jiān)測(cè)中所采用RBPT和SAT試驗(yàn),在敏感、特異性等方面所具備的局限性而造成的誤檢[7],SAT試驗(yàn)對(duì)檢出的可疑畜,多數(shù)散養(yǎng)戶(hù)因養(yǎng)殖空間的局限性,很難實(shí)現(xiàn)隔離飼養(yǎng)21 d后再檢等要求.建議首先對(duì)檢出陽(yáng)性畜的畜群、要施行長(zhǎng)期跟蹤監(jiān)測(cè).疫區(qū)內(nèi)的動(dòng)物門(mén)診、看病前、對(duì)假設(shè)患布病的動(dòng)物未進(jìn)行布病檢測(cè)而直接進(jìn)行治療是產(chǎn)生變異布氏菌的潛在因素之一[8],因此,診療前實(shí)施布病檢測(cè)是防止發(fā)生變異和跟蹤患病畜畜源的有效途徑之一.對(duì)陽(yáng)性畜所污染的環(huán)境進(jìn)行消毒、用科學(xué)檢測(cè)方法對(duì)消毒效果進(jìn)行評(píng)估等具體措施的缺乏、在徹底消滅傳染源等方面是需要解決的技術(shù)難題之一,因此希望引起有關(guān)部門(mén)的重視.

本調(diào)查的局限性:首先是血清學(xué)檢測(cè)方面,本調(diào)查采用的是RBPT和SAT方法,因此部分樣本不能排除假陰性和假陽(yáng)性所出現(xiàn)的可能性.其次是病原學(xué)檢測(cè)方面,對(duì)分離菌株的毒力、菌型、遺傳同源性未進(jìn)行測(cè)毒、鑒定、分析等,因此全面掌握該菌生物特征和致病機(jī)制等方面有不足.在以后的類(lèi)似調(diào)查工作中,需進(jìn)一步完善,為準(zhǔn)確確診及科學(xué)分析提供有效的參考依據(jù).