李思齊，呂素芳，李 峰，唐世云，徐倩倩

（1.山東省北鎮(zhèn)中學(xué)，濱州 256600；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，濱州 256600）

全株玉米青貯飼料是將乳熟期至蠟熟期帶穗整株玉米切碎后，在密閉無氧環(huán)境下，通過微生物厭氧發(fā)酵和化學(xué)作用，制成的一種適口性好、消化率高、營養(yǎng)豐富的飼料。全株玉米青貯飼料品質(zhì)受品種、刈割期、鍘碎長度及添加劑等因素影響。其品質(zhì)的評定方法可概括為感官評定、理化評定、微生物評定、霉菌毒素安全評價(jià)等［1］，其中霉菌毒素因關(guān)系動(dòng)物生產(chǎn)、食品安全，乃至人類健康，備受關(guān)注和重視。為了評估魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料霉菌毒素含量及危害情況，筆者等于2017年11—12月，隨機(jī)抽取了魯北地區(qū)18家規(guī)模養(yǎng)殖場，采集樣品，開展了嘔吐毒素（DON）、黃曲霉毒素 B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、T-2、赭曲霉毒素（OTA）等5種常見霉菌毒素檢測分析。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

樣品采集自魯北地區(qū)18家規(guī)?；馀ｐB(yǎng)殖場，其中6家養(yǎng)殖場全株玉米青貯制作過程中，添加了某公司生產(chǎn)的青貯用乳酸菌制劑，標(biāo)記為A組；另外12家未添加任何添加劑，標(biāo)記為B組。均采用半地上青貯池存放，容量300～1 500 m3。每場按照青貯池橫斷面上中下不同位置，采集3個(gè)樣品，混合后用四分法縮減取樣200～300 g，作為檢測樣品。

1.2 檢測項(xiàng)目與方法

采用間接競爭ELISA方法測定樣品中嘔吐毒素（DON）、黃曲霉毒素 B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、T-2、赭曲霉毒素（OTA）含量。上述ELISA檢測試劑盒均為山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn)，其檢測靈敏度分別為 0.05 μg/kg、5.0 μg/kg、0.1 μg/kg、0.5 μg/kg、0.5 μg/kg。

1.3 結(jié)果判定

參照 GB/T 13078—2001、GB/T 13078.2—2006、GB/T 13078.3—2007、GB/T 13078.2—2006等資料，將黃曲霉毒素 B1≤20 μg/kg、嘔吐毒素≤1 000 μg/kg、玉米赤霉烯酮≤500 μg/kg、赭曲霉毒素≤100 μg/kg、T-2≤300 μg/kg作為超標(biāo)臨界標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS13.0進(jìn)行差異分析，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)（CV/%）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 全部樣品霉菌毒素檢測情況

共采集檢測18家養(yǎng)殖場飼料樣品，其檢測結(jié)果見表1。從檢出率看，嘔吐毒素、T-2毒素檢出率均為100%，黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮檢出率分別為55.56%、27.78%，赭曲霉毒素檢出率僅為5.56%。從超標(biāo)率看，僅有1例黃曲霉毒素B1超出20 μg/kg的限量標(biāo)準(zhǔn)，超標(biāo)率5.56%；其他項(xiàng)目均沒有超出限量標(biāo)準(zhǔn)。從檢測平均含量看，嘔吐毒素平均含量最高，達(dá)128.84 μg/kg；赭曲霉毒素平均含量僅0.05 μg/kg，接近于沒有檢出。

表1 魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料霉菌毒素檢測結(jié)果

2.2 不同制備工藝下霉菌毒素檢測結(jié)果比較

按照青貯全株玉米制備過程是否添加乳酸菌制劑分A、B組統(tǒng)計(jì)比較，經(jīng)采用SPSS 13.0對A、B兩組不同檢測項(xiàng)目含量進(jìn)行ANOVA分析，差異均不顯著（P＞0.05）。其中，赭曲霉毒素、T-2毒素兩組在平均含量、檢出率等指標(biāo)上接近一致；但嘔吐毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮平均含量A組明顯低于B組；特別是玉米赤霉烯酮在A組6個(gè)樣品中均未檢出。詳見表2。

表2 A組和B組霉菌毒素檢測結(jié)果比較

2.3 多重霉菌毒素檢出情況

對同一樣品不同霉菌毒素檢出情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，全部樣品均有2種或以上不同霉菌毒素檢出。其中二重霉菌毒素檢出的樣品為3/18，三重霉菌毒素檢出的樣品為10/18，四重霉菌毒素檢出的樣品為5/18；以DON+T-2+AFB1三種霉菌毒素的組合檢出率最高，達(dá)38.89%。詳見表3。

表3 魯北地區(qū)全株玉米青貯飼料多重霉菌毒素檢出情況

3 小結(jié)與討論

（1）本次采樣檢測發(fā)現(xiàn)，17/18養(yǎng)殖場青貯全株玉米飼料5項(xiàng)霉菌毒素檢測結(jié)果均在限量范圍之內(nèi)，1/18樣品僅存在黃曲霉毒素超出限量標(biāo)準(zhǔn)；黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素3種霉菌毒素的檢出率分別為55.56%、22.78%、5.56%，檢出率較低。較未經(jīng)青貯的玉米秸、青貯全株玉米霉菌毒素的檢出率和含量均較低［3］，主要是全株玉米在青貯過程中產(chǎn)生了有機(jī)酸，降低了pH值，抑制了霉菌毒素生長。同時(shí)，本次霉菌毒素檢測數(shù)值較低，與開窖時(shí)間普遍較短也有一定關(guān)系［4-5］。

（2）對制備過程中添加乳酸菌制劑的青貯全株玉米飼料檢測發(fā)現(xiàn)，嘔吐毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮3種霉菌毒素檢測平均含量均低于制備過程中未添加乳酸菌制劑的樣品組，其中嘔吐毒素含量降低了84.27%，黃曲霉毒素B1含量降低了34.29%，與周磊等［6］試驗(yàn)結(jié)果基本一致。李寶明等［7-8］研究認(rèn)為，乳酸菌的添加能夠加快玉米青貯的發(fā)酵酸化進(jìn)程，不僅快速降低了pH值，縮短腐敗菌有氧發(fā)酵3～5 d，而且還降低了5%～10%營養(yǎng)物質(zhì)的損失，最大程度地抑制了有害污染物的產(chǎn)生。不僅如此，李旭業(yè)等［9］研究發(fā)現(xiàn)，添加乳酸菌制備青貯全株玉米能顯著提高飼料的粗蛋白含量。

（3）本研究檢測發(fā)現(xiàn)，嘔吐毒素、T-2毒素檢出率均達(dá)100%，且100%樣品為二重及以上霉菌毒素檢出。其中二重霉菌、三重霉菌、四重霉菌毒素檢出率分別為27.78%、55.55%、16.67%。研究表明［10-11］，多種霉菌毒素并存會(huì)引起霉菌毒素加性效應(yīng)，對動(dòng)物健康產(chǎn)生一定的危害。因此，開展青貯玉米飼料霉菌毒素檢測工作，積極研究尋找有效降低霉菌毒素危害的技術(shù)方法，對推動(dòng)畜牧業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。