彭 玲陳 瑩鄒 瑩

重度抑郁癥（Major depressive disorder，MDD）是一種常見的精神科疾病，其臨床特征主要有思維遲緩、情緒低落以及興趣減退[1]。目前，其發(fā)病機制尚未研究清楚，臨床研究[2-3]顯示，神經(jīng)營養(yǎng)因子的失調(diào)在抑郁癥的病理生理學(xué)中起重要作用。MDD的神經(jīng)營養(yǎng)假說說明壓力降低了邊緣腦結(jié)構(gòu)中神經(jīng)營養(yǎng)因子的水平，而抗抑郁藥具有相反的作用，因此是MDD的病理生理和治療的基礎(chǔ)[4-5]。血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生的血管生成和促有絲分裂因子[6]，研究[5，7]顯示VEGF有助于海馬神經(jīng)發(fā)生，對應(yīng)激相關(guān)神經(jīng)元損傷的神經(jīng)具有保護(hù)作用。有研究[8]顯示，電驚厥性發(fā)作增加了海馬VEGF表達(dá)，海馬中VEGF表達(dá)水平的增加對于發(fā)揮與抗抑郁藥有關(guān)的作用相關(guān)。在MDD的發(fā)病過程中，環(huán)境因素與遺傳因素均起重要作用，本研究探討VEGF基因rs2010963位點基因多態(tài)性與負(fù)性生活事件相關(guān)性及對重度抑郁癥易感性的影響，具體研究報道如下。

1 臨床資料

選擇2014年8月—2016年8月我院收治的重度抑郁癥患者85例作為研究組，根據(jù)研究組患者的年齡、性別匹配招募85名健康人作為對照組。研究組中納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡 20～65 歲；（2）所有重度抑郁癥患者均由我院精神科兩名具有豐富臨床經(jīng)驗的精神科醫(yī)生根據(jù)《精神障礙診斷和統(tǒng)計手冊 (第五版)（DSM-IV）》[9]進(jìn)行確診。（3）患者的抑郁癥嚴(yán)重程度由17項漢密爾頓評分抑郁量表（HAMD-17）[10]評估。HAMD-17總分在17分及以上。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有藥物引起的繼發(fā)性抑郁障礙史；（2）有嚴(yán)重的暴力和自殺傾向；（3）木僵狀態(tài)或者有嚴(yán)重的強迫癥；（4）有酒精濫用史；（5）處于懷孕期或哺乳期的婦女。對照組的排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有家族性抑郁癥發(fā)病史；（2）有精神類疾病史。本研究獲得了我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)，所有受試者均簽署了知情同意書。研究組與對照組的年齡、性別比例、教育背景等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見表 1。

表1 研究組與對照組一般資料比較[例（%）]

表2 VEGF基因rs2010963位點序列擴(kuò)增引物信息

2 方法

2.1 VEGF基因rs2010963位點測序 取所有受試者外周血2mL，采用Qiagen公司（德國）生產(chǎn)的血液基因組抽提試劑盒（QIAamp DNA Blood Mini Kit，批號51140）抽提基因組DNA，設(shè)計引物（見表2），擴(kuò)增VEGF基因rs2010963位點，將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物送上海桑尼生物科技有限公司測序，并對測序結(jié)果進(jìn)行基因分型研究。

2.2負(fù)性生活事件評估采用生活事件量表[11]（Life event scale，LES）進(jìn)行評價。該量表包含48條常見的生活事件，分為三個方面，第一個方面是家庭生活方面（28條目），第二個方面是工作學(xué)習(xí)方面（13條目），第三個方面是社交和其他（7條目），該量表由受試者根據(jù)自身實際情況獨立自主答題。負(fù)性生活事件包括喪親、離婚、發(fā)生嚴(yán)重疾病、住房和金融危機、失業(yè)、工作壓力和與同事的關(guān)系問題等。正性和負(fù)性生活事件的得分由研究人員評定，算出總生活事件評分。生活事件的評估包括四個方面：發(fā)生時間（“無”=1；“一年以上”=2；“過去一年”=3；“慢性”=4），性格（“好”=1；“壞”=2），影響情緒（“無”=1；“輕度”=2；“中度”=3；“嚴(yán)重”=4；“極其嚴(yán)重”=5） 和影響持續(xù)的時間（“≤3 個月”=1；“3-6 個月”=2；“6-12 個月”=3；“＞12 個月”=4）。高、低水平負(fù)性生活事件的臨界值規(guī)定為2分，2分及以上為高水平負(fù)性生活事件。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析應(yīng)用SPSS 20.0軟件，首先進(jìn)行χ2檢驗，以測試SNP基因型分布的Hardy-Weinberg平衡（HWE），計數(shù)資料的表示方法為[n（%）]，VEGF 基因 rs2010963 位點基因型以及等位基因在研究組與對照組的比較采用χ2檢驗，采用多重Logistic回歸分析VEGF基因與環(huán)境的相互作用，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 VEGF基因rs2010963位點各基因型和等位基因頻率 研究組與對照組VEGF基因rs2010963位點各基因型分布符合哈迪-溫柏格（Hardy-Weinberg）平衡（P＞0.05）。研究組與對照組VEGF基因rs2010963位點各基因型頻率之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=7.201，P=0.027），但是各等位基因頻率之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.963，P=0.327），見表3，rs2010963位點各基因型測序結(jié)果見圖1。

表3 研究組與對照組VEGF基因rs2010963位點各基因型和等位基因頻率比較[例（%）]

圖1 VEGF基因rs2010963位點測序結(jié)果。A為CC基因型，B為CG基因型，C為GG基因型

3.2 VEGF基因多態(tài)性與負(fù)性生活事件的相關(guān)性VEGF基因rs2010963位點C等位基因攜帶者與較高的負(fù)性生活事件之間的相互作用顯著，P=0.002，OR=4.832，95%CI=1.522～15.877，其它基因攜帶者與負(fù)性生活事件之間的相互作用見表4。

4 討論

環(huán)境因素在重度抑郁癥的發(fā)病過程中起著非常重要的作用，其中壓力已經(jīng)被證實是重度抑郁癥的誘發(fā)因素之一，負(fù)性生活事件是壓力的來源之一，包括常見的健康問題、人際交往問題、工作問題等相關(guān)方面[12-13]。臨床研究[14]顯示，MDD患者經(jīng)歷比健康人更為緊張的生活事件，表明負(fù)性生活事件與MDD相關(guān)。

表4 VEGF基因多態(tài)性與負(fù)性生活事件的相關(guān)性[例（%）]

研究[15]發(fā)現(xiàn)，VEGF基因的rs699947位點多態(tài)性與耐藥性抑郁癥顯著相關(guān)，另外還有研究[16]發(fā)現(xiàn)，VEGFR2 1416T/A多態(tài)性與復(fù)發(fā)性抑郁障礙有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，重度抑郁癥患者組與對照組VEGF基因rs2010963位點各基因型頻率之間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=7.201，P=0.027），VEGF 基因 rs2010963位點C等位基因攜帶者與較高的負(fù)性生活事件之間明 顯 相 關(guān) （P=0.002，OR=4.832，95%CI=1.522 ～15.877）。這些結(jié)果表明，VEGF基因多態(tài)性與環(huán)境因素的相互作用增加了發(fā)展MDD的風(fēng)險，與相關(guān)研究[17]結(jié)果一致。有研究[18]認(rèn)為，遺傳學(xué)不僅增加了MDD的易感性，而且還能夠增加患者通過選擇高風(fēng)險環(huán)境來體驗負(fù)性生活事件的可能性。本研果發(fā)現(xiàn)，攜帶C等位基因（CC+CG）的個體在暴露于高程度負(fù)性生活事件時患MDD風(fēng)險最高。本研究的不足，首先是樣本量較少，在統(tǒng)計基因型頻率時可能存在較大的誤差影響結(jié)果的客觀性。另外，本研究中LES量表的使用是回顧性的，可能存在一定的主觀偏差影響結(jié)果的客觀性。