趙西珍，張松濤，高 黎

(1.三門(mén)峽市中心醫(yī)院 口腔科，河南 三門(mén)峽472000；2.三門(mén)峽口腔醫(yī)院，河南 三門(mén)峽472000；3.鄭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院 兒童口腔科，河南 鄭州450052)

慢性牙周炎是指在口腔衛(wèi)生不佳時(shí)由于大量細(xì)菌堆積成牙菌斑后形成齦上牙石或齦下牙石，進(jìn)而對(duì)牙周組織產(chǎn)生不斷的炎癥刺激作用而使牙周袋形成、附著喪失加重并伴有牙松動(dòng)的一組臨床疾病[1]。由于早期時(shí)炎癥因子主要分布在齦溝液中，隨著牙菌斑的不斷積累，導(dǎo)致牙石不斷增多，長(zhǎng)期蓄積的炎癥刺激最終導(dǎo)致牙周炎發(fā)生，因此，牙菌斑是引起牙周炎主要的病變因子[2]。慢性牙周炎在臨床上尚無(wú)有效的治療方法，通常采用藥物等保守治療，因此，臨床應(yīng)以預(yù)防慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展為重點(diǎn)[3]。目前，在臨床上對(duì)慢性牙周炎尚無(wú)明確的診斷方法，僅僅是通過(guò)對(duì)患者牙菌斑染色后用肉眼識(shí)別牙菌斑顏色的深淺程度來(lái)進(jìn)行診斷[4]。此種診斷方式缺乏系統(tǒng)的計(jì)分標(biāo)準(zhǔn)，并不可靠。為此，本研究對(duì)齦溝液中相關(guān)的炎癥因子進(jìn)行檢測(cè)，探討NLRP3炎癥小體、白細(xì)胞介素-18(IL-18)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)與牙周炎的關(guān)系，并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果對(duì)慢性牙周炎進(jìn)行診斷，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2016年2月至2017年2月在我院治療的慢性牙周炎患者58例為病例組，其中男37例，女21例，平均年齡(55.28±10.32)歲，平均BMI(23.71±2.03)kg/m2，牙齒數(shù)(26.01±2.05)顆。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合慢性牙周炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，即牙周袋深度>3 mm且伴有結(jié)蹄組織附著喪失；(2)天然牙≥16顆，且至少有4顆磨牙；(3)患者及家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近3個(gè)月內(nèi)有真菌、細(xì)菌、病毒感染者；(2)有嚴(yán)重心腦血管疾病、肝腎功能障礙等；(3)合并有口腔黏膜疾??；(4)近3個(gè)月內(nèi)接受過(guò)牙周治療。選取同期健康志愿者60例作為對(duì)照組，其中男40例，女20例，平均年齡(55.01±9.20)歲，平均BMI(24.01±1.95)kg/m2，牙齒數(shù)(26.35±1.81)顆。兩組患者性別、年齡、平均BMI等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

抽取患者清晨空腹靜脈血10 ml，2 500 r/min離心40 min后分離血清，置于-100℃冰箱保存待測(cè)。采用ELISA方法檢測(cè)白細(xì)胞介素-18(IL-18)和白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。RT-PCR檢測(cè)： RT-PCR擴(kuò)增后進(jìn)行無(wú)酶RNA逆轉(zhuǎn)錄后，檢測(cè)血清炎癥因子的NLRP3 mRNA表達(dá)情況。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用(x—±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組血清NLRP3mRNA、IL-18及IL-1β比較

病例組血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量、IL-18和IL-1β分別為(1.472±0.331)、(57.93±15.49)pg/ml和(34.29±8.99)pg/ml，明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組血清NLRP3 mRNA、IL-18及IL-1β比較

2.2兩組齦溝液IL-18、IL-1β比較

病例組齦溝液IL-18和IL-1β明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明病例組齦溝液炎癥水平明顯高于對(duì)照組，見(jiàn)表2。

表2 兩組齦溝液IL-18及IL-1β比較

2.3兩組PLI、BI、PD、AL比較

病例組PLI、BI、PD、AL明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明病例組牙周情況明顯差于對(duì)照組，見(jiàn)表3。

表3 兩組PLI、BI、PD、AL比較

2.4NLRP3與血清及齦溝液炎癥因子等相關(guān)分析

牙周炎患者血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量與血清IL-18和IL-1β呈正相關(guān)(r=0.302、0.297，P<0.05)，與齦溝液IL-18、IL-1β呈正相關(guān)(r=0.314、0.305，P<0.05)，與PLI、BI、PD、AL呈正相關(guān)(r=0.337、0.356、0.360、0.344，P<0.05)。

血清IL-18與PLI、BI、PD、AL呈正相關(guān)(r=0.322、0.301、0.302 1、0.328，P<0.05)，齦溝液IL-18與PLI、BI、PD、AL呈正相關(guān)(r=0.295、0.301、0.311、0.401，P<0.05)；血清IL-1β與PLI、BI、PD、AL呈正相關(guān)(r= 0.310、0.350、0.330、0.329，P<0.05)，齦溝液IL-1β與PLI、BI、PD、AL呈正相關(guān)(r=0.403、0.297、0.384、0.401，P<0.05),見(jiàn)表4。

表4 血清及齦溝液IL-18、IL-1β與PLI、BI、PD、AL相關(guān)性

注：*表示P<0.05。

3 討論

慢性牙周炎的病因主要有：(1)粘附于牙齒表面不能用漱口、水沖洗等方式去除的為礦化的細(xì)菌團(tuán)塊稱為牙菌斑，牙菌斑是造成慢性牙周炎的始動(dòng)因子[5]。(2)牙石是造成慢性牙周炎的外觀因素，牙結(jié)石是指沉積在牙面上已經(jīng)礦化的菌斑，可分為齦上牙石和齦下牙石兩種[6]：齦上牙石位于齦緣以上的牙面上，主要是食物殘?jiān)z留下來(lái)的細(xì)小碎屑與唾液中含鈣離子的無(wú)機(jī)鹽相結(jié)合而成，肉眼可見(jiàn)[7]；齦下牙石位于齦緣以下、齦溝內(nèi)等不能用肉眼觀察到的牙結(jié)石[8]。特別是位于齦溝內(nèi)的牙石與牙體組織緊密貼合，只能用探針才可以探到，是引起慢性牙周炎的主要刺激因素[9]。慢性牙周炎一旦形成則對(duì)牙周組織形成不可逆性損害，長(zhǎng)期慢性牙周炎的患者還會(huì)因炎癥的長(zhǎng)期存在而進(jìn)一步對(duì)牙槽骨發(fā)生破壞性作用，不僅容易造成牙體脫落，還會(huì)進(jìn)一步對(duì)頜骨骨質(zhì)發(fā)生影響與損壞[10]。因此，對(duì)于慢性牙周炎應(yīng)以預(yù)防為主，及早對(duì)可能發(fā)生慢性牙周炎的患者進(jìn)行早期診斷[11]。

NLRP3炎癥小體又稱為血管通透因子，是慢性牙周炎病理發(fā)生發(fā)展過(guò)程中重要的調(diào)控因子。NLRP3炎癥小體是特異性作用于慢性牙周炎的糖基化細(xì)胞分裂素，在增強(qiáng)慢性牙周炎時(shí)牙周膜的滲透性、誘導(dǎo)牙周膜末端毛細(xì)血管發(fā)生和生成及牙周膜細(xì)胞生長(zhǎng)、抑制牙周膜上皮細(xì)胞凋亡等方面發(fā)揮作用。白細(xì)胞介素-18是一種基因多顯性多肽調(diào)節(jié)因子，具有廣泛的生物學(xué)活性，參與調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答、細(xì)胞生長(zhǎng)和分化等[12]。主要由活化的單核產(chǎn)生，能殺傷和抑制慢性牙周炎相關(guān)細(xì)胞，促進(jìn)炎癥細(xì)胞的吞噬，抗感染，誘導(dǎo)慢性牙周炎癥急性期蛋白合成，促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化，是重要的炎癥因子，并參與某些自身免疫病的病理?yè)p傷[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞介素-18的升高可能與慢性牙周炎各項(xiàng)臨床表現(xiàn)有關(guān)[14]。白細(xì)胞介素-1β的血清水平主要通過(guò)刺激慢性牙周炎相關(guān)基因的表達(dá)，誘導(dǎo)環(huán)氧化酶2、磷脂酶A2、NO合酶、干擾素γ和黏附蛋白等效應(yīng)蛋白的表達(dá)，在免疫調(diào)節(jié)及炎癥進(jìn)程中扮演著重要的角色[11]；與慢性牙周炎引起的急性炎癥反應(yīng)程度有關(guān)[15]。當(dāng)出現(xiàn)慢性牙周炎時(shí)，需要對(duì)牙齦相關(guān)指數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，以明確病變進(jìn)展程度。包括對(duì)菌斑指數(shù)(PLI)、齦溝出血指數(shù)(BI)、探診深度(PD)和附著喪失水平(AL)等進(jìn)行測(cè)定。

本研究發(fā)現(xiàn)，病例組血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量、IL-18和IL-1β明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明慢性牙周炎患者血清中各炎癥因子的含量較高，刺激發(fā)生慢性牙周炎。病例組齦溝液IL-18、IL-1β明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明炎癥刺激造成的慢性牙周炎可反射性地使患者機(jī)體產(chǎn)生較多的白細(xì)胞，從而使白細(xì)胞介素的分泌增多。表3顯示病例組PLI、BI、PD和AL明顯高于對(duì)照組，說(shuō)明慢性牙周炎患者口腔常規(guī)檢查時(shí)各項(xiàng)指標(biāo)均異常，患者的牙周袋以及牙周出血較嚴(yán)重，可刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。

本研究的創(chuàng)新點(diǎn)在于改善傳統(tǒng)的對(duì)慢性牙周炎患者的檢查以及臨床應(yīng)對(duì)措施，應(yīng)用血清炎癥因子對(duì)慢性牙周炎患者進(jìn)行早期診斷和早期預(yù)防治療，避免了患者牙體脫落和頜骨吸收的可能，對(duì)臨床有借鑒指導(dǎo)意義。