梁海英,王雅麗，劉鐵梅,張麗榮

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 輸血科；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 病理科,吉林 長春130033)

ABO血型鑒定是保證輸血安全的基礎(chǔ)，而對其亞型正確定型具有非常重要的臨床意義[1]。凡紅細(xì)胞上顯示較弱的B特異性抗原的血型稱為B亞型，B亞型在分類上與A亞型基本上平行。已經(jīng)報(bào)道有B3、BX、Bm及Bel等亞型，跟Aend及Ay相當(dāng)?shù)腂亞型還沒見報(bào)道[2]。本科室應(yīng)一位無償獻(xiàn)血者要求對其血樣進(jìn)行血型鑒定，發(fā)現(xiàn)該樣本出現(xiàn)正反定型不符現(xiàn)象，用不同試劑檢測出現(xiàn)不同的結(jié)果，并對其進(jìn)行家系調(diào)查，現(xiàn)報(bào)告分析如下。

1 材料與方法

1.1樣本受檢者在加拿大獻(xiàn)血時(shí)，正定為O型，反定為B型，因正反定型不符而被拒絕，回國來本科室進(jìn)行血型鑒定。因其母親為本院職工，母親同時(shí)也采集樣本。后來外婆在外院住院，外院檢測正定A型反定AB型，也采標(biāo)本來本科室檢測，其余標(biāo)本后來主動(dòng)采集送檢。

1.2試劑抗-A、抗-B長春博德公司；抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品；人ABO血型反定型用紅細(xì)胞,為長春博迅公司產(chǎn)品。

1.3儀器Baso 2002-2離心機(jī)，恒溫水浴箱。

1.4正反定型測試方法正定型測試方法和反定型試驗(yàn)方法正好相反，其中正定型測試方法為用2滴抗血清加上1滴待檢者的2%紅細(xì)胞懸液，輕搖離心，觀察有無凝集反應(yīng)，用“O”表示無凝集，用“+”表示凝集，分別在表格內(nèi)標(biāo)記清楚；而反定型測試方法為用2滴待檢者的血清加1滴標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液，輕搖離心(離心機(jī)1000 rpm)60 s，觀察有無凝集反應(yīng)，然后標(biāo)記在相應(yīng)表格內(nèi)。

1.5吸收放散測試方法吸收用于驗(yàn)證真假凝集反應(yīng)，方法有冷吸收和熱吸收，我們采用冷吸收方法。用反復(fù)鹽水洗滌的已知抗原的標(biāo)準(zhǔn)B型1 ml壓積紅細(xì)胞，加1 ml被檢血清即抗-B血清，混勻后置4℃冰箱內(nèi)吸收1 h，1 000 rpm離心,吸取上清液倍比稀釋，加標(biāo)準(zhǔn)B型紅細(xì)胞1滴，行吸收后血清效價(jià)分析，真凝集經(jīng)吸收后凝集減弱或呈陰性；假凝集經(jīng)吸收后凝集不變。

我們采用熱放散試驗(yàn)方法，即將吸收后懷疑有抗體附著的紅細(xì)胞用生理鹽水洗洗5次，棄上清，加在壓積紅細(xì)胞中加等量的生理鹽水，60℃水浴中振蕩放散10 min，3 000 rpm高速離心2 min，取上清2排管，倍比稀釋，再分別加入標(biāo)準(zhǔn)的B型紅細(xì)胞懸液1滴和O型紅細(xì)胞懸液1滴，進(jìn)行效價(jià)分析，如抗體較弱可預(yù)先用酶處理紅細(xì)胞后再做試驗(yàn)。注意控制溫度，如果溫度降低，抗原抗體會(huì)重新結(jié)合。

1.6測定唾液血型物質(zhì)方法人的唾液中分泌有ABH抗原，如果6℃冰箱保存1周其抗原活性不變。取待測者唾液離心取上清，煮沸再離心取清液。將抗-A、抗-B、抗-H倍比稀釋后與相應(yīng)紅細(xì)胞反應(yīng)，唾液用標(biāo)化血清(效價(jià)128)等體積混合，再用相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢測相應(yīng)的抗體,觀察有無凝集反應(yīng)進(jìn)行分析判斷。

2 結(jié)果

2.1血型鑒定結(jié)果見表1。

表1 血型鑒定結(jié)果

2.2吸收放散檢測結(jié)果

吸收液與標(biāo)準(zhǔn)B型紅細(xì)胞反應(yīng)，待檢標(biāo)本吸收液與標(biāo)準(zhǔn)B細(xì)胞的凝集強(qiáng)度比標(biāo)準(zhǔn)血清與標(biāo)準(zhǔn)B細(xì)胞吸收液的凝集強(qiáng)度低3個(gè)梯度；待檢標(biāo)本放散液與標(biāo)準(zhǔn)B型、O型紅細(xì)胞反應(yīng)，待檢標(biāo)本放散液與標(biāo)準(zhǔn)B細(xì)胞凝集，與標(biāo)準(zhǔn)O細(xì)胞不凝集，說明待檢標(biāo)本含有B抗原。

2.3唾液血型物質(zhì)檢測結(jié)果

將處理過唾液和標(biāo)化血清(效價(jià)為128)等體積混合,室溫放置10 min后，與標(biāo)準(zhǔn)B型紅細(xì)胞1 000 rpm離心60 s沒有凝集，從而判斷待檢唾液中含有B、H血型物質(zhì)。

2.4家系調(diào)查結(jié)果如下圖

先證者在加拿大留學(xué)期間獻(xiàn)血，被告知血型有問題沒能獻(xiàn)血，回國后想得到確切結(jié)果來本科室檢測，因檢測出其血型為B亞型中的Bm型，同時(shí)對其母親檢測得到同樣的結(jié)果。后來外婆住院血型同樣正反定型不符，正定A型，反定AB型，又采樣到本科室檢測得出為ABm型。因其三代均有這樣的血型，遂進(jìn)行了家系調(diào)查，因外祖父已經(jīng)去世，沒法檢測，其余有親緣關(guān)系的均進(jìn)行血型鑒定，得出結(jié)果如圖1。

3 討論

根據(jù)該標(biāo)本的相應(yīng)血型血清學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出其血型為Bm型，這是B亞型的一種[3-5]。鑒于現(xiàn)在有些醫(yī)院，特別是二級醫(yī)院輸血科，雖然國家和省里的檢查總是要求受血者要進(jìn)行ABO的正反定型檢測，仍然有部分醫(yī)院只做正定型，或者有的醫(yī)院即使做了正反定型，當(dāng)正反定型不相符時(shí)只相信正定型，就按正定型來給患者輸血，這是非常危險(xiǎn)的[6]。

當(dāng)出現(xiàn)正反定型不符時(shí)應(yīng)分析原因，通過科學(xué)的實(shí)驗(yàn)鑒定出準(zhǔn)確的血型。就如本例如果做為受血者，按正定型給予少量的O型紅細(xì)胞可能不會(huì)有什么反應(yīng)，因?yàn)楣┱哐獫{中的抗-B抗體可能被受血者血漿中的血型物質(zhì)中和；但是如果大量輸O型血，供者血中的抗-B抗體可能與受血者紅細(xì)胞發(fā)生溶血反應(yīng)。

對于一個(gè)擁有如此特殊血型的個(gè)體來說，有必要進(jìn)行家系調(diào)查，讓直系家庭成員對自己的特殊血型有一定的了解，當(dāng)發(fā)生需要輸血的情況時(shí)，為血型鑒定提供參考意見。