■宋明杰 宋丹丹 刁藍(lán)宇 王鵬飛 劉敏燕 譚本杰

（廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣西南寧530005）

近年來畜禽產(chǎn)品的質(zhì)量安全問題受到廣泛的關(guān)注，使用富含營(yíng)養(yǎng)成分的植物及其果實(shí)等保健品代替抗生素等藥物來提高畜禽的生產(chǎn)力和抗病力逐漸成為一個(gè)趨勢(shì)。我國(guó)現(xiàn)有大量的天然植物都富含不飽和脂肪酸，眾所周知松籽就是這些天然植物中的一種。眾多科學(xué)研究分析的結(jié)果可知松籽成分中富含不飽和脂肪酸、多種維生素和礦物質(zhì)元素[1-3]，不飽和脂肪酸能夠有效的防高血壓、高血脂、脂肪肝和高黏血癥等常見的心腦血管疾病，還可以降低血液中膽固醇的含量。夏中生等[4]研究表明日糧中添加棕櫚油、亞麻油、火麻油等可以顯著降低血清中的低密度脂蛋白膽固醇和血清甘油三酯的含量。還有研究表明松籽中含有一種特殊的不飽和脂肪酸——皮諾斂酸，皮諾斂酸又稱為洗血因子，可以降低低密度脂蛋白膽固醇（LDL），還可以調(diào)節(jié)水鹽的代謝，促進(jìn)脂肪降解，具有極好的降血脂的作用，此外，它還具有促進(jìn)淋巴細(xì)胞因子和血清細(xì)胞因子中干擾素釋放以及滅活病毒和癌細(xì)胞的功能[5]。松籽富含的VE在一定程度上有調(diào)節(jié)血脂代謝以及抗氧化作用，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫機(jī)能，提高對(duì)疾病的抵抗能力[6-8]。因此，此試驗(yàn)將松籽添加到蛋雞日糧中，以探究松籽以及其添加量對(duì)廣西富鳳麻雞蛋雞免疫性能和血清生化指標(biāo)的影響。為松籽在蛋雞養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)在廣西富鳳農(nóng)牧有限公司（高峰分廠）進(jìn)行；血清指標(biāo)分析測(cè)定在廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院生化實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

1.2 材料

松籽購于大興安嶺干貨批發(fā)市場(chǎng)，使用烘干機(jī)進(jìn)行烘干脫水，待冷卻后用實(shí)驗(yàn)室的粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)動(dòng)物選用48周齡、體況一致、體重相近的360只蛋雞。隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只。每個(gè)組分別飼喂一種日糧。預(yù)試期1周，正式期6周。

1.4 飼喂日糧以及添加松籽的水平

試驗(yàn)1組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中均勻添加1%、2%、3%的松籽?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

1.5 樣品采集

正式試驗(yàn)后，每?jī)芍苓M(jìn)行一次血樣采集。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取一只采血5 ml，分離血清，用于血清生化指標(biāo)和免疫功能的測(cè)定。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

2 結(jié)果與分析

2.1 松籽添加水平對(duì)血清代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

2.1.1 松籽添加水平對(duì)血清血脂指標(biāo)水平的影響（見表2）

表2 血脂指標(biāo)水平(mmol/l)

表2所示，試驗(yàn)3組的總膽固醇含量顯著低于試驗(yàn)1組(P＜0.05)，試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組的血清甘油三酯和低密度脂蛋白的含量顯著低于試驗(yàn)1組(P＜0.05)，試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組高密度脂蛋白含量，顯著高于試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組(P＜0.05)；試驗(yàn)1組和試驗(yàn)2組血清中膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白差異不顯著(P＞0.05)；試驗(yàn)1組血清中低密度脂蛋白差異顯著高于試驗(yàn)2、3、4組(P＜0.05)；試驗(yàn)2、3、4組之間差異不顯著；試驗(yàn)3組與試驗(yàn)4組之間這四個(gè)指標(biāo)的含量的差異不顯著(P＞0.05)。

2.1.2 松籽添加水平對(duì)血清酶活指標(biāo)的影響（見表3）

表3 血清酶活指標(biāo)

表3所示，日糧中松籽添加水平對(duì)四個(gè)組血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的酶活均無顯著影響（P＞0.05），單從結(jié)果來看，試驗(yàn)2、3、4組酶活都低于試驗(yàn)1組。

2.2 松籽添加水平對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響

2.2.1 松籽添加水平對(duì)血清免疫蛋白含量的影響（見表4）

表4表示，試驗(yàn)3組總蛋白和白蛋白含量顯著高于其他三組（P＜0.01），試驗(yàn)4組總蛋白和白蛋白含量顯著高于試驗(yàn)1組（P＜0.05），試驗(yàn)1組的總蛋白含量與試驗(yàn)2組無顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)1組的白蛋白含量顯著低于試驗(yàn)2組（P＜0.05）。四個(gè)組血清中球蛋白含量和白球比無顯著差異?？傮w來看，試驗(yàn)組總蛋白、球蛋白和白蛋白的含量均高于試驗(yàn)1組。

表4 血清免疫蛋白含量

2.2.2 松籽添加水平對(duì)血清部分免疫球蛋白含量的影響（見表5）

表5 血清免疫球蛋白含量(g/l)

表5所示試驗(yàn)3組血清中IgG和IgM含量顯著高于試驗(yàn)1組（P＜0.05），其他三組血清中IgG和IgM含量差異不顯著（P＞0.05）。四組血清中IgA的含量無顯著差異（P＞0.05）?？傮w來看，試驗(yàn)2、3、4組血清中IgG、IgM和IgA含量都高于試驗(yàn)1組。

2.2.3 松籽添加水平對(duì)血清細(xì)胞因子含量的影響（見表6）

表6 血清細(xì)胞因子含量(ng/l)

表6所示，試驗(yàn)2、3、4組血清干擾素-γ和白介素-2的含量均顯著高于試驗(yàn)1組（P＜0.05）。試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組血清干擾素-γ含量顯著高于試驗(yàn)2組(P＜0.05)。試驗(yàn)3組和試驗(yàn)4組血清干擾素-γ含量無顯著(P＜0.05)差異。試驗(yàn)2、3、4組之間血清白介素-2含量無顯著(P＜0.05)差異。隨著日糧中松籽添加水平的提高，血清干擾素-γ和白介素-2含量有增加的趨勢(shì)。

2.2.4 松籽添加水平對(duì)血清病毒抗體滴度的影響（見表7）

表7 病毒抗體滴度

表7所示，四組血清的H5型禽流感抗體滴度、H9型禽流感抗體滴度和新城疫病毒抗體滴度之間無顯著差異（P＞0.05）。由表中數(shù)據(jù)可知，隨著松籽添加水平的提高，H5型禽流感病毒抗體滴度有先升后降的趨勢(shì)，H9型禽流感病毒抗體滴度和新城疫病毒抗體滴度有升高的趨勢(shì)。

3 討論

3.1 松籽添加水平對(duì)血清代謝相關(guān)指標(biāo)的影響

血清膽固醇是指血液中所有膽固醇的總和，包括膽固醇酯和游離膽固醇，它的血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。王振宇等[9]對(duì)紅松仁不飽和脂肪酸的研究得出的結(jié)果，表明其對(duì)大鼠血清的甘油三酯水平有顯著的降低作用（P＜0.05）。鄭曉珂等[10]試驗(yàn)研究結(jié)果表明，同樣為松樹產(chǎn)物的松針的提取物黃酮類、維生素以及礦物質(zhì)等物質(zhì)都可以降低低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、血清甘油三酯（TG）和血清總膽固醇（TC）。本試驗(yàn)的結(jié)果顯示，高水平松籽添加量的試驗(yàn)組富鳳麻雞血清膽固醇、血清甘油三酯以及低密度脂蛋白膽固醇含量要低于對(duì)照組，而高密度脂蛋白膽固醇高于對(duì)照組，此結(jié)果與王振宇研究結(jié)果一致。說明適量的松籽有降低血脂和減少血管中脂肪的沉積作用。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是檢測(cè)肝功能的重要指標(biāo)。蔣燕燕[11]研究含有豐富脂肪酸的亞麻籽對(duì)鵝血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的影響，隨著亞麻籽添加量的增大，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶先升高后降低。本試驗(yàn)的試驗(yàn)組谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性要低于對(duì)照組，而且隨著松籽添加量的不斷增加，它的酶活在不斷降低，但是松籽量的繼續(xù)添加會(huì)使酶活升高。松籽添加量為1%時(shí)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶酶活最低。與蔣燕燕結(jié)果不同，可能是因?yàn)樗勺雅c亞麻籽中不飽和脂肪酸的含量及種類以及研究的動(dòng)物不一樣所導(dǎo)致。

3.2 松籽添加水平對(duì)血清免疫指標(biāo)的影響

不同學(xué)者對(duì)不同動(dòng)物研究均表明松籽有增強(qiáng)動(dòng)物免疫力的功能[12-14]。田庚元等[15]研究松籽殼中的多糖可以作為免疫調(diào)節(jié)劑，提高人體的免疫功能。夏兆剛等[16]把各種不同種類的多不飽和脂肪酸添加到日糧中，研究表明，日糧中添加多不飽和脂肪酸具有提高產(chǎn)蛋雞機(jī)體內(nèi)的抗體水平。本試驗(yàn)的試驗(yàn)結(jié)果表明，蛋雞基礎(chǔ)日糧中添加不同水平的松籽能提高血清中總蛋白、白蛋白以及一些免疫球蛋白的含量。其中試驗(yàn)結(jié)果得出：在基礎(chǔ)日糧中添加量為2%的松籽時(shí)，血清中免疫球蛋白含量最高。這個(gè)結(jié)果是由于松籽中的不飽和脂肪酸含有動(dòng)物機(jī)體所需的必需脂肪酸，即當(dāng)攝入一定量的必需脂肪酸時(shí)，機(jī)體的免疫器官以及免疫機(jī)能都能正常的或者促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，抑制免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞和B細(xì)胞）的有絲分裂，提高免疫細(xì)胞的活性。但當(dāng)攝入必需脂肪酸過多時(shí)，可能會(huì)引起脂質(zhì)的過氧化作用增強(qiáng)，從而影響到免疫細(xì)胞的性能[17]。

干擾素具有抗病毒活性和免疫調(diào)節(jié)作用，與白介素-2、自然殺傷細(xì)胞一起構(gòu)成免疫調(diào)解網(wǎng)絡(luò)[18]。呂鐵鋼[14]、胡廷俊等[19]的研究結(jié)果，多糖有促進(jìn)血清干擾素和白介素-2的作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加松籽的試驗(yàn)組相對(duì)于對(duì)照組均有促進(jìn)干擾素-γ和白介素-2釋放的作用，與呂鐵鋼和胡廷俊等研究結(jié)果一致。原因是不飽和脂肪酸是磷脂的組成成分，可以影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性，因?yàn)槟さ牧鲃?dòng)性的變化會(huì)影響動(dòng)物機(jī)體的免疫性能，所以增加細(xì)胞膜的流動(dòng)性就會(huì)增強(qiáng)淋巴細(xì)胞白介素-2的受體表達(dá)，從而導(dǎo)致機(jī)體的淋巴細(xì)胞的有絲分裂受到抑制，影響免疫調(diào)節(jié)的作用。

徐前明等[20]實(shí)驗(yàn)證明白介素-2可以有效提高禽流感H9型滅活疫苗的免疫效果，劑量在0.06～0.1 mg之間，效果比較理想。Lowenthal J W等[21]研究發(fā)現(xiàn)給雛雞注射白介素-2等細(xì)胞因子可以增加IgA抗體的分泌水平和對(duì)疾病的抵抗力，這些與本試驗(yàn)結(jié)果一致。通過H5型禽流感抗體滴度、H9型禽流感抗體滴度和新城疫病毒抗體滴度來反映免疫功能，抗體效價(jià)的高低直接反映機(jī)體的體液免疫情況。在基礎(chǔ)日糧中添加松籽可以不同程度的提高各病毒的抗體滴度，特別是松籽添加量為2%、3%，各抗體效價(jià)均高于對(duì)照組，說明松籽具有增強(qiáng)免疫力的特性。

4 結(jié)論

在產(chǎn)蛋雞日糧中添加適量的松籽可以達(dá)到降低蛋雞血脂和調(diào)控血清酶活的作用，間接提高健康水平。適量的松籽添加量還能直接通過調(diào)控免疫系統(tǒng)的相關(guān)指標(biāo)，從而提高蛋雞的免疫力。