劉愛(ài)玲，馬清霞，韓 雪，沈朝建，康京麗，張 毅，王幼明

（1. 中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032；2. 青島市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東青島 266071；3. 北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，北京 100107）

牛結(jié)核?。╞ovine tuberculosis，bTB）是由牛結(jié)核分枝桿菌引起的一種人獸共患慢性傳染病，可侵害多種動(dòng)物，家畜中奶牛最易感染[1]。結(jié)核病病原為分支桿菌屬細(xì)菌，在自然界分布廣泛，對(duì)動(dòng)物有致病性的主要是結(jié)核分支桿菌、牛分支桿菌、禽分支桿菌和副結(jié)核分支桿菌。可引起牛結(jié)核病的主要是牛分支桿菌、結(jié)核分支桿菌、禽分支桿菌，其中牛分支桿菌致病性最強(qiáng)。本屬病原菌均為一種纖細(xì)、平直或稍彎曲的桿菌，革蘭氏染色陽(yáng)性，無(wú)莢膜，不產(chǎn)生內(nèi)外毒素，不形成芽孢，無(wú)運(yùn)動(dòng)性，對(duì)外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，耐干燥和濕冷，但不耐熱[2]。

bTB的潛伏期長(zhǎng)短不一，自然感染病例的潛伏期一般為16～45 d，但有的可在幾個(gè)月以上，甚至數(shù)年。Morris等[3]研究表明，雖然牛結(jié)核分枝桿菌宿主廣泛，但近些年主要感染牛和人。bTB可通過(guò)空氣傳播[4]，不容易通過(guò)污染的飼料和牧草傳播，因?yàn)樵诂F(xiàn)實(shí)條件下污染物中感染細(xì)菌的存活時(shí)間相對(duì)較短，動(dòng)物通過(guò)消化道途徑不容易暴露至感染劑量，但可以通過(guò)口咽部黏膜感染[3]。有研究表明，將患牛引進(jìn)到無(wú)疫牛群是bTB傳播的主要風(fēng)險(xiǎn)因素。在動(dòng)物水平方面，bTB傳播的風(fēng)險(xiǎn)因素包括易感動(dòng)物年齡、性別、品種、健康狀況、免疫狀況，以及對(duì)bTB的遺傳抗性和易感性，還有垂直傳播等[5]。

近年來(lái)，奶產(chǎn)品銷量迅速上升，奶牛飼養(yǎng)量也明顯提高，因此對(duì)奶牛疾病的預(yù)防不可忽視。尤其是bTB，其不但影響奶牛生產(chǎn)力，而且威脅人類身體健康。因此，加強(qiáng)bTB防控具有重要意義。萊西市是山東省主要奶牛生產(chǎn)基地，擁有“雀巢、迎春樂(lè)、新希望”等多家龍頭奶業(yè)企業(yè)[6]。為評(píng)估該市無(wú)bTB奶牛場(chǎng)（戶）通過(guò)引進(jìn)奶牛感染該病的風(fēng)險(xiǎn)，本研究繪制了奶牛引入傳播bTB的風(fēng)險(xiǎn)路徑，建立了定量評(píng)估模型，以期為該市bTB防控策略制定提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 模型假設(shè)

奶牛來(lái)源地區(qū)bTB場(chǎng)群流行率和個(gè)體流行率無(wú)差異。

引進(jìn)奶牛到達(dá)萊西市后，采用單純皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)（SICT）方法，對(duì)所有奶牛進(jìn)行bTB檢測(cè)；采用全進(jìn)全出方式隔離30 d，每天對(duì)所有奶牛進(jìn)行臨床癥狀和體溫變化監(jiān)測(cè)，隔離后進(jìn)行消毒。

1.2 風(fēng)險(xiǎn)路徑

bTB通過(guò)奶牛引進(jìn)傳播的風(fēng)險(xiǎn)路徑見(jiàn)圖1。從存在bTB的養(yǎng)殖場(chǎng)引入奶牛，采用SICT檢測(cè)方法，不能夠發(fā)現(xiàn)所有感染奶牛，引入后存在bTB釋放風(fēng)險(xiǎn)；引入的bTB感染奶牛即使未出現(xiàn)癥狀，在隔離階段也存在bTB釋放風(fēng)險(xiǎn)；在隔離結(jié)束后混群，動(dòng)物暴露于bTB，存在感染風(fēng)險(xiǎn)。

該風(fēng)險(xiǎn)路徑假設(shè)奶牛能夠持續(xù)感染并傳播疫病，并在引入后釋放感染。本研究對(duì)隔離期間，bTB通過(guò)奶牛直接接觸以及糞便或空氣傳播感染的概率不作探討。

1.3 模型參數(shù)

將參數(shù)整合到模型中進(jìn)行概率分布分析，在Microsoft Excel中使用@Risk 軟件，采用Monte Carlo方法將批量為50的模型運(yùn)行10 000次。參數(shù)描述和賦值見(jiàn)表1。參數(shù)估計(jì)來(lái)自萊西市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心調(diào)查數(shù)據(jù)和專家觀點(diǎn)。

1.4 敏感性分析

使用@Risk軟件，對(duì)影響模型的重要參數(shù)進(jìn)行敏感性分析，確定各參數(shù)的影響程度及相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 引進(jìn)奶牛傳播bTB的概率分布

根據(jù)下列公式計(jì)算通過(guò)從感染地區(qū)引進(jìn)1頭奶牛傳播bTB的概率為2.93×10-3（95%CI：1.14×10-3～8.25×10-3），概率分布結(jié)果見(jiàn)圖 2。

圖1 奶牛引進(jìn)傳播bTB的風(fēng)險(xiǎn)路徑

根據(jù)下列公式，計(jì)算通過(guò)從感染地區(qū)引進(jìn)50頭奶牛至少有1頭傳播bTB的概率為0.137（95%CI：0.056～0.339），概率分布結(jié)果見(jiàn)圖3。

2.2 不確定性分析

該模型中的參數(shù)計(jì)算結(jié)果及不確定分析見(jiàn)表2。

2.3 敏感性分析

模型主要影響參數(shù)的相關(guān)系數(shù)見(jiàn)圖4。結(jié)果顯示，奶牛是否暴露于bTB感染奶牛的概率和群流行率相關(guān)系數(shù)分別為0.63和0.37，對(duì)奶牛引進(jìn)時(shí)傳播bTB的概率影響較大，是主要風(fēng)險(xiǎn)因素。隔離措施相關(guān)系數(shù)分別為-0.52和-0.28，是主要保護(hù)因素。

3 討論

萊西市是奶牛養(yǎng)殖示范地區(qū)，養(yǎng)殖模式分為規(guī)模場(chǎng)、養(yǎng)殖小區(qū)和奶牛集中村3種，規(guī)?；潭缺容^高，生物安全措施較好。本研究數(shù)據(jù)來(lái)自2016年萊西市監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。該地區(qū)場(chǎng)群流行率為7.3%，感染場(chǎng)內(nèi)個(gè)體流行率為1.9%[8]。引進(jìn)地區(qū)的bTB流行率可能存在差異，因此模型存在一定的不確定性。

在奶牛引進(jìn)時(shí)，萊西市采用SICT方法進(jìn)行檢測(cè)。雖然目前SICT仍是bTB檢測(cè)的國(guó)際通用方法，但其敏感性較低并不是最佳方法[9]。IFN-γ檢測(cè)方法也被廣泛應(yīng)于bTB檢測(cè)，但是試驗(yàn)的特異性和敏感性也不是最好。診斷試驗(yàn)方法的不足也是造成bTB傳播的一個(gè)重要因素[10]。本研究采用SCIT方法進(jìn)行場(chǎng)群流行率和個(gè)體流行率估算，由于試驗(yàn)敏感性較低，引進(jìn)感染bTB奶牛的可能性較大。

表1 通過(guò)奶牛引進(jìn)傳播bTB的定量風(fēng)險(xiǎn)模型輸入?yún)?shù)

圖2 引進(jìn)1頭奶牛感染的概率模擬結(jié)果

圖3 至少有1頭奶牛感染的概率模擬結(jié)果

表2 模型中重要參數(shù)模擬結(jié)果和不確定性分析

圖4 至少有1頭奶牛感染的概率敏感性分析結(jié)果

通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，隔離措施是奶牛引進(jìn)時(shí)降低bTB傳播風(fēng)險(xiǎn)的主要保護(hù)因素。因bTB的潛伏期一般為16～45 d，因此在采取嚴(yán)格隔離措施的同時(shí)，要延長(zhǎng)隔離時(shí)間，并再次進(jìn)行抽樣檢測(cè)，這樣可以有效降低bTB傳播風(fēng)險(xiǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，是否暴露于感染動(dòng)物是引進(jìn)時(shí)感染bTB的主要風(fēng)險(xiǎn)因素，因此在混群后，要提高生物安全措施，進(jìn)行嚴(yán)格消毒，同時(shí)加強(qiáng)奶牛臨床癥狀和體溫監(jiān)測(cè)。

4 結(jié)論

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估顯示，萊西市奶牛場(chǎng)戶從感染地區(qū)引進(jìn)1頭奶牛傳播bTB的概率為2.93×10-3（95%CI：1.14×10-3～8.25×10-3）； 引 進(jìn) 50頭奶牛至少有1頭傳播bTB的概率為0.137（95%CI：0.056～0.339）。敏感性分析結(jié)果顯示，暴露于感染動(dòng)物、群流行率和隔離措施，對(duì)引進(jìn)奶牛時(shí)傳播bTB的風(fēng)險(xiǎn)影響較大。建議在引進(jìn)奶牛時(shí)進(jìn)行嚴(yán)格隔離，延長(zhǎng)隔離時(shí)間，并在混群前再進(jìn)行1次bTB檢測(cè)，混群后進(jìn)行嚴(yán)格消毒并加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，這樣可以降低引進(jìn)奶牛時(shí)傳播bTB的風(fēng)險(xiǎn)。