黨盼玉，王文婷，劉志新，尹 文，胡興斌

(空軍軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院輸血科，西安 710032)

Lewis血型系統(tǒng)抗體(簡(jiǎn)稱(chēng)Lewis抗體)大多是天然產(chǎn)生的，以IgM型為主，具有補(bǔ)體結(jié)合性質(zhì)，多數(shù)僅在室溫下反應(yīng)，在37℃無(wú)反應(yīng)活性[1]。以往輸血觀(guān)念認(rèn)為L(zhǎng)ewis抗體多無(wú)臨床意義，進(jìn)行相容性輸注血液制品即可。但近年來(lái)多篇文獻(xiàn)[2-6]報(bào)道關(guān)于Lewis抗體引起新生兒溶血病及輸血反應(yīng)，同時(shí)本實(shí)驗(yàn)室也檢測(cè)出多例在37℃下仍具有反應(yīng)活性的IgG類(lèi)Lewis抗體?，F(xiàn)將我院Lewis抗體的檢出率及輸血情況進(jìn)行回顧性分析，具體如下：

1材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 2014年2月～2018年12月我實(shí)驗(yàn)室接收的所有門(mén)急診及住院患者標(biāo)本，要求靜脈采血3～5 ml，EDTA抗凝。

實(shí)驗(yàn)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)：將血型正反不相符或卡式抗體初篩陽(yáng)性或交叉配血不合的2 923例標(biāo)本納入研究范圍，血型正反不相符標(biāo)本1 106例，卡式抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本1 108例，卡式抗體初篩陰性但交叉配血不合標(biāo)本709例。血液輸注病例排除了僅輸注血漿、血小板或冷沉淀凝血因子的實(shí)驗(yàn)病例。

1.2 試劑和儀器 單克隆抗A抗B試劑、IgM抗D試劑、ABO反定型紅細(xì)胞試劑、抗體篩選細(xì)胞試劑、譜細(xì)胞、改良凝聚胺試劑盒、樣本釋放劑均來(lái)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，血型卡、全自動(dòng)血型儀由強(qiáng)生公司提供，抗人球蛋白卡、抗體篩選細(xì)胞、全自動(dòng)血型/配血分析儀DG-57、預(yù)溫箱50-60HZ由戴安娜公司提供，譜細(xì)胞、抗Lea、抗Leb血型定型試劑來(lái)自Sanquin公司，卡式離心機(jī)由GRIFOLS提供，交叉配血選用日本久保田離心機(jī)KA-2200。

1.3 血清學(xué)檢測(cè)方法

1.3.1 血型鑒定：利用強(qiáng)生或戴安娜全自動(dòng)血型儀進(jìn)行。

1.3.2 卡式抗體初篩：利用戴安娜抗人球蛋白卡通過(guò)全自動(dòng)血型/配血儀進(jìn)行。

1.3.3 交叉配血：進(jìn)行鹽水試管法、凝聚胺法和抗人球蛋白法三種交叉配血試驗(yàn)，抗人球蛋白試驗(yàn)利用戴安娜抗人球蛋白卡通過(guò)全自動(dòng)血型/配血儀進(jìn)行。

1.3.4 抗體特異性鑒定：使用鹽水試管法、凝聚胺法、經(jīng)典抗人球蛋白法確定特異性，并進(jìn)行效價(jià)測(cè)定。

1.3.5 血型正反定型不相符、卡式抗體初篩陽(yáng)性、任一介質(zhì)交叉配血不合時(shí)，均須進(jìn)行進(jìn)一步分析，懷疑有不規(guī)則抗體存在的，應(yīng)鑒定抗體特異性。必要時(shí)可采取其他血清學(xué)試驗(yàn)方法。血清學(xué)常用技術(shù)均嚴(yán)格按照文獻(xiàn)[1]操作。

2結(jié)果

2.1 Lewis抗體檢出情況

2.1.1 Lewis抗體特異性分布：2 923例送檢標(biāo)本有147例檢出Lewis抗體，占所有送檢標(biāo)本的5.0%(147/2 923)。抗Lea抗體83例占56.5%(83/147)，抗Leb抗體51例占34.7%(51/147)，抗Lea+Leb抗體13例占8.8%(13/147)。單純IgM型135例占91.8%(135/147)，IgG型或IgG+IgM型Lewis抗體12例占8.2%(12/147)。

2.1.2 不同血清學(xué)方法檢出情況：見(jiàn)表1。1 106例血型正反定型不符標(biāo)本中有38例檢出Lewis抗體，占Lewis抗體標(biāo)本的25.9%(38/147)。38例Lewis抗體均為IgM型，卡式抗體初篩試驗(yàn)均陰性。26例抗Leb抗體占68.4%(26/38)，6例抗Lea抗體占15.8%(6/38)。

1 108例卡式抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本中有101例檢出Lewis抗體，占Lewis抗體標(biāo)本的68.7%(101/147)，凝集強(qiáng)度<1+者有64例占63.4%(64/101)，卡式抗體初篩試驗(yàn)Lewis抗體檢出率68.7%(101/147)，漏檢率為31.3%(46/147)。74例檢出抗Lea抗體占73.3%(74/101)，21例檢出抗Leb抗體占20.8%(21/101)。

709例卡式抗體初篩陰性但交叉配血不合的標(biāo)本中8例檢出Lewis抗體，占Lewis抗體標(biāo)本的5.4%(8/147)，均為鹽水介質(zhì)不合被檢出。

表1 不同血清學(xué)方法檢出Lewis抗體情況(n)

2.2 交叉配血與輸血 147例檢出Lewis抗體的患者中，83例申請(qǐng)紅細(xì)胞輸注，51例輸注紅細(xì)胞。共輸注67.5U，平均輸注紅細(xì)胞1.5U(67.5/51，只進(jìn)不舍)。51例均選擇獻(xiàn)血員Lewis表型為L(zhǎng)e(a-b-)的紅細(xì)胞，采用鹽水試管法、凝聚胺法和卡式抗人球蛋白法三種方法進(jìn)行交叉配血。配合性輸注后無(wú)輸血不良反應(yīng)或輸注無(wú)效發(fā)生。

3討論近年來(lái)，不規(guī)則抗體篩查中Lewis抗體檢出率不斷上升[7-8]，但以往輸血理論認(rèn)為L(zhǎng)ewis抗體大多沒(méi)有臨床意義，相容性輸血即可。本研究發(fā)現(xiàn)12例IgG型或IgG+IgM型Lewis抗體，在37℃下仍具有反應(yīng)活性，所以L(fǎng)ewis抗體的臨床意義值得進(jìn)一步探討。在相容性輸注的基礎(chǔ)上，應(yīng)選擇對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞輸注，可有效避免輸注無(wú)效或者輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。

本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)147例Lewis抗體中，單純IgM型135例占91.8%(135/147)，IgG型或IgG+IgM型Lewis抗體12例占8.2%(12/147)，這與文獻(xiàn)報(bào)道[9]相比，IgG類(lèi)抗體明顯增多。血型檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)的38例Lewis抗體中，有25例(占65.8%，25/38)是由于O細(xì)胞凝集導(dǎo)致的血型正反定型不符，所以臨床工作中應(yīng)重視O細(xì)胞凝集，進(jìn)行鹽水交叉配血或開(kāi)展鹽水抗體初篩試驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)抗Leb抗體檢出率34.7%(51/147)，血型檢測(cè)抗Leb抗體68.4%(26/38)，抗Leb抗體檢出率也明顯高于文獻(xiàn)報(bào)道[6]，其原因可能為ABO試劑紅細(xì)胞上面有Leb無(wú)Lea抗原所導(dǎo)致?？ㄊ娇贵w初篩中微柱凝膠凝集強(qiáng)度≤1+者有64例占63.4%(64/101)，操作不當(dāng)或?qū)嶒?yàn)污染等被遺漏或判讀為假陽(yáng)性而忽視，導(dǎo)致Lewis抗體漏檢率高達(dá)28.5%(42/147)。

卡式抗體篩選是交叉配血試驗(yàn)前的主要試驗(yàn)之一，以測(cè)IgG類(lèi)不規(guī)則抗體為主，僅有部分高效價(jià)IgM類(lèi)不規(guī)則抗體可影響卡式結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)中卡式抗體篩查中凝集強(qiáng)度≤1+者有64例占63.4%(64/101)，且其反應(yīng)很弱極容易造成漏檢。凝聚胺法與卡式抗人球蛋白法是目前各個(gè)醫(yī)院里普遍運(yùn)用的兩種交叉配血方法，但各有利弊：凝聚胺法簡(jiǎn)便快速，容易漏檢低效價(jià)抗體[10]，對(duì)Rh系統(tǒng)抗體較敏感，對(duì)Kell系統(tǒng)抗體不敏感；卡式抗人球蛋白法操作簡(jiǎn)單規(guī)范，敏感穩(wěn)定，但其耗時(shí)長(zhǎng)且易受IgM抗體或其他雜質(zhì)干擾。交叉配血作為臨床安全輸血的最有力保障，應(yīng)采用多種介質(zhì)的交叉配血方法[11]，避免因不規(guī)則抗體漏檢導(dǎo)致的溶血性輸血反應(yīng)，最大限度地保證臨床輸血安全有效。對(duì)已經(jīng)檢出特異性抗體患者的輸血，應(yīng)選擇該抗體對(duì)應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行相容性輸注，可有效減少臨床輸血不良反應(yīng)的發(fā)生率，降低和預(yù)防臨床輸注無(wú)效。

總之，臨床應(yīng)重視Lewis血型系統(tǒng)抗體的檢出，該抗體的存在不僅干擾血型及交叉配血試驗(yàn)，可影響臨床輸血效果，對(duì)臨床輸血安全也有著重要的意義。對(duì)于血清學(xué)法檢出Lewis抗體患者，應(yīng)給予相應(yīng)抗原陰性的紅細(xì)胞輸注。同時(shí)應(yīng)盡可能采用三種介質(zhì)交叉配血方法來(lái)保障臨床輸血安全。