陳伊　翁瓊琳　鄧君麗

【摘要】 目的 探討基質(zhì)金屬蛋白酶-8（MMP-8）與肺結(jié)核復(fù)發(fā)的相關(guān)性及評(píng)估其臨床價(jià)值。方法 選取初治活動(dòng)性肺結(jié)核患者86例（初治活動(dòng)性肺結(jié)核組）、復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者46例（復(fù)發(fā)肺結(jié)核組）、健康體檢者56例（健康對(duì)照組）， 采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）法檢測三組的血清MMP-8濃度， 并作比較， 分析復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的診斷臨界值、敏感度、特異度。結(jié)果 初治活動(dòng)性肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-8.145， P=0.000<0.05）。復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-6.528， P=0.000<0.05）。初治活動(dòng)性肺結(jié)核組與復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.236， P=0.813>0.05）。根據(jù)復(fù)發(fā)肺結(jié)核組及健康對(duì)照組血清MMP-8 濃度繪制受試者工作特征曲線（ROC）曲線， 得出復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的診斷臨界值為1.88 ng/ml、敏感度為91.3%和特異度為69.6%。表明血清MMP-8 濃度在復(fù)發(fā)肺結(jié)核的診斷中有一定的準(zhǔn)確度[曲線下面積（AUC）=0.875， 95%CI=（0.811， 0.940）， P=0.000<0.05]。結(jié)論 MMP-8與肺結(jié)核復(fù)發(fā)有一定的相關(guān)性并具有一定的臨床價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 基質(zhì)金屬蛋白酶-8;肺結(jié)核;復(fù)發(fā)

【Abstract】 Objective ? To discuss the correlation between matrix metalloproteinase-8 （MMP-8） and recurrence of tuberculosis and evaluate its clinical value. Methods ? 86 patients with newly diagnosed active pulmonary tuberculosis （initial active pulmonary tuberculosis group）， 46 patients with recurrent pulmonary tuberculosis （recurrent pulmonary tuberculosis group）， and 56 healthy subjects （healthy control group） were selected. The serum MMP-8 concentrations of the three groups were tested by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） and compared to analyze the diagnostic threshold， sensitivity and specificity of patients with recurrent pulmonary tuberculosis. Results ? Initial active pulmonary tuberculosis group had higher concentrations of serum MMP-8 than healthy control group， and the difference was statistically significant （Z=-8.145， P=0.000<0.05）. Recurrent pulmonary tuberculosis group had higher concentrations of serum MMP-8 than healthy control group， and the difference was statistically significant （Z=-6.528， P=0.000<0.05）. Initial active pulmonary tuberculosis group and recurrent pulmonary tuberculosis group had no statistically significant in concentrations of serum MMP-8 （Z=-0.236， P=0.813>0.05）. The receiver operating characteristic （ROC） curve was drawn according to the serum MMP-8 concentration in the recurrent pulmonary tuberculosis group and the healthy control group. The diagnostic threshold， sensitivity and specificity of patients with recurrent pulmonary tuberculosis were 1.88 ng/ml，?91.3% and 69.6% respectively. The serum MMP-8 concentration showed a certain degree of accuracy in the diagnosis of recurrent pulmonary tuberculosis [area under curve （AUC）=0.875， 95%CI=（0.811， 0.940）， P=0.000<0.05]. Conclusion ? MMP-8 is related to the recurrence of pulmonary tuberculosis and has certain clinical value.

【Key words】 Matrix metalloproteinase-8; Tuberculosis; Recurrence

流動(dòng)人口的增加以及耐藥結(jié)核尤其是耐多藥結(jié)核的出現(xiàn)等多種原因， 使得結(jié)核病仍然是全球性的嚴(yán)重健康問題。肺結(jié)核為結(jié)核病的主要常見發(fā)病形式， 對(duì)于肺結(jié)核致病機(jī)制及病理過程的深入研究有助于結(jié)核病的防控。基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases， MMPs）是一組有鋅鈣依賴性的催化激活的蛋白酶， 其主要作用是參與炎癥反應(yīng)、組織重塑、降解細(xì)胞外基質(zhì)等， 目前已發(fā)現(xiàn)有20多種。研究表明MMPs與結(jié)核病的發(fā)病機(jī)理有關(guān)， 是結(jié)核病組織損傷的效應(yīng)因子， 與結(jié)核病的發(fā)病程度及愈后有關(guān)[1-7]。MMP-8主要來源于中性粒細(xì)胞， 是MMPs中的一員， 在結(jié)核病的免疫病理學(xué)中起著重要作用[8-11]。本研究通過對(duì)初治活動(dòng)性肺結(jié)核患者、復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者及健康對(duì)照人群的血清MMP-8濃度分析， 探討MMP-8與肺結(jié)核復(fù)發(fā)的相關(guān)性及臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2017～2018年收治的初治活動(dòng)性肺結(jié)核患者86例（初治活動(dòng)性肺結(jié)核組）、復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者46例（復(fù)發(fā)肺結(jié)核組）、健康體檢者56例（健康對(duì)照組）。

1. 2 方法

1. 2. 1 儀器與試劑 酶標(biāo)儀：匯松科技發(fā)展有限公司， MMP-8 ELISA試劑盒：江萊生物。

1. 2. 2 檢測方法 采用ELISA法檢測三組的血清MMP-8濃度。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、標(biāo)本孔及空白對(duì)照孔， 標(biāo)準(zhǔn)品孔加入50 μl標(biāo)準(zhǔn)品， 標(biāo)本孔加入50 μl標(biāo)本， 若標(biāo)本濃度過高需樣品稀釋液稀釋后加入。每孔加100 μl酶標(biāo)試劑， 空白孔不加標(biāo)品及酶標(biāo)試劑， 封板膜封板， 37℃溫育60 min， 洗滌5次， 拍干， 先加50 μl顯色劑A， 再加50 μl顯色劑B， 37℃避光15 min， 加50 μl終止液， 450 nm波長測量吸光度（空白孔調(diào)零）， 計(jì)算樣品濃度。

1. 3 觀察指標(biāo) 比較三組血清MMP-8濃度， 分析復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的診斷臨界值、敏感度和特異度。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)， 數(shù)據(jù)呈非正態(tài)分布， 采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示， 數(shù)據(jù)比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。應(yīng)用ROC曲線確定診斷臨界值、敏感度和特異度， AUC比較采用Z檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組血清MMP-8濃度比較 初治活動(dòng)性肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-8.145， P=0.000<0.05）。復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-6.528， P=0.000<0.05）。初治活動(dòng)性肺結(jié)核組與復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.236， P=0.813>0.05）。見表1。

2. 2 復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的診斷臨界值、敏感度和特異度 根據(jù)復(fù)發(fā)肺結(jié)核組及健康對(duì)照組血清MMP-8 濃度繪制ROC曲線， 得出復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的診斷臨界值為1.88 ng/ml、敏感度為91.3%和特異度為69.6%。表明血清MMP-8 濃度在復(fù)發(fā)肺結(jié)核的診斷中有一定的準(zhǔn)確度[AUC=0.875， 95%CI=（0.811， 0.940）， P=0.000<0.05]。

3 討論

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染性高負(fù)擔(dān)性疾病。肺結(jié)核的病理過程主要包括炎性滲出、增生、干酪樣壞死等， 對(duì)于這些過程的研究有助于揭示結(jié)核病致病機(jī)制及篩選發(fā)現(xiàn)新的分子標(biāo)志物。

MMPs具有重要的免疫調(diào)節(jié)功能， 可以作用于促炎細(xì)胞因子、趨化因子和其他蛋白質(zhì)， 以調(diào)節(jié)炎癥和免疫的各個(gè)方面并在生理性組織重構(gòu)中起著重要作用， 是結(jié)核病發(fā)病的主要因素之一[10]。MMP-8是基質(zhì)金屬蛋白酶家族中的一類膠原酶， 具有降解細(xì)胞外基質(zhì)， 參與肉芽腫形成及炎性反應(yīng)等作用。本研究結(jié)果顯示， 初治活動(dòng)性肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-8.145， P=0.000<0.05）。這與國外的研究結(jié)果相似[11]， 表明MMP-8有可能成為肺結(jié)核診斷中的潛在分子標(biāo)志物。

肉芽腫、空洞和干酪樣壞死是結(jié)核病的重要特征， 其中空洞是感染傳播， 治療后復(fù)發(fā)和耐藥性出現(xiàn)的公認(rèn)風(fēng)險(xiǎn)因素， 與結(jié)核分枝桿菌菌量負(fù)荷有關(guān)， 聯(lián)系MMP-8的生物作用， MMP-8含量的高低或可具有預(yù)測結(jié)核病危險(xiǎn)程度的作用。Lee 等[12]的研究也證實(shí)了MMP-8具有預(yù)測結(jié)核病風(fēng)險(xiǎn)作用。Ong等[9]的研究顯示MMP-8是結(jié)核病潛在的定向治療靶標(biāo)。本研究通過分析不同時(shí)期治療的肺結(jié)核患者， 即初治活動(dòng)性肺結(jié)核和復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者的血清MMP-8濃度， 進(jìn)一完善了MMP-8與肺結(jié)核的關(guān)系， 研究顯示， 初治活動(dòng)性肺結(jié)核組與復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.236， P=0.813>0.05）。這對(duì)于MMP-8作為潛在治療方案時(shí)提供一定的臨床數(shù)據(jù)。

肺結(jié)核的復(fù)發(fā)不僅給肺結(jié)核患者帶來了巨大的負(fù)擔(dān)與痛苦， 同時(shí)也增加了結(jié)核病防治的難度， 如何能急時(shí)快捷的預(yù)測肺結(jié)核的復(fù)發(fā)， 對(duì)于防治肺結(jié)核具有重要意義。本研究結(jié)果顯示， 復(fù)發(fā)肺結(jié)核組的血清MMP-8濃度高于健康對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-6.528， P=0.000<0.05）。MMP-8在復(fù)發(fā)肺結(jié)核患者中的敏感度為91.3%和特異度為69.6%， 這表明MMP-8與肺結(jié)核復(fù)發(fā)有一定的相關(guān)性， MMP-8濃度的變化或可預(yù)示肺結(jié)核復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)程度。

綜上所述， MMP-8與肺結(jié)核復(fù)發(fā)有一定的相關(guān)性并具有一定的臨床價(jià)值， 但仍需進(jìn)一步的研究。

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[收稿日期：2019-01-07]