李燕 劉聰 王麗軍 胡昌江 李文兵 許潤春

中圖分類號 R283.6 文獻標(biāo)志碼 A 文章編號 1001-0408（2019）05-0671-06

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.05.19

摘 要 目的：制備炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑，并進行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。方法：依照標(biāo)準(zhǔn)湯劑的制備要求，制備17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑，計算出膏率。采用高效液相色譜（HPLC）法對炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑中迷迭香酸進行定量分析[色譜柱為Agilent 5 TC-C18（2），流動相為甲醇-0.1%甲酸溶液（40 ∶ 60，V/V），檢測波長為330 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫為30 ℃，進樣量為5 μL]，并計算其轉(zhuǎn)移率。建立17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的HPLC 指紋圖譜，利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)（2012版）軟件對指紋圖譜進行分析，并通過對比共有峰的保留時間對色譜峰進行指認。結(jié)果：17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率為5.55%～9.75%；迷迭香酸的含量為0.44%～1.58%，平均含量為1.08%；迷迭香酸的轉(zhuǎn)移率為18.31%～34.32%，平均轉(zhuǎn)移率為25.42%。在17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑HPLC指紋圖譜中，共確定了11個共有峰，相似度均高于0.95；并指認出了其中5個共有色譜峰，分別為咖啡酸（峰3）、木犀草苷（峰5）、迷迭香酸（峰8）、木犀草素（峰9）和芹菜素（峰10）。結(jié)論：建立了炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量控制方法，可為炒紫蘇子配方顆粒及相關(guān)制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供參考。

關(guān)鍵詞 炒紫蘇子；標(biāo)準(zhǔn)湯劑；高效液相色譜法；指紋圖譜；迷迭香酸；轉(zhuǎn)移率；出膏率

Study on Quality Standard of Fried Perilla frutescens Seed Standard Decoction

LI Yan1，LIU Cong2，WANG Lijun2，HU Changjiang2，LI Wenbing2，XU Runchun1（1.College of Pharmacy， Chengdu University of TCM， Chengdu 611137， China；2.Sichuan New Green Pharmaceutical Technology Development Co.， Ltd ， Chengdu 611900， China）

ABSTRACT OBJECTIVE： To prepare standard decoction of fried Perilla frutescens seed and study the quality standard. METHODS： According to the preparation requirements of standard decoction， 17 batches of standard decoction of fried P. frutescens seed were prepared， and the yield of paste was calculated. HPLC method was used for quantitative analysis of rosmarinic acid in standard decoction of fried P. frutescens seed. The determination was performed on Agilent 5 TC-C18（2） column with mobile phase consisted of methanol-0.1% formic acid solution （40 ∶ 60， V/V） at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 330 nm， and column temperature was 30 ℃. The sample size was 5 μL. The transfer rate was calculated. HPLC fingerprint was established for 17 batches of standard decoction of fried P. frutescens seed， and analyzed by using TCM Chromatogram Fingerprint Similarity Evaluation System （2012 edition）. The chromatogram peaks were identified by comparing retention time of common peak. RESULTS： The yield of paste were 5.55%-9.75% in 17 batches of standard decoction of fried P. frutescens seed. The contents of rosmarinic acid were 0.44%-1.58%， and average content was 1.08%. The transfer rates of rosmarinic acid were 18.31%-34.32%， and average transfer rate was 25.42%. In HPLC fingerprints for 17 batches of standard decoction of P. frutescens seed， a total of 11 common peaks were identified， and the similarity was higher than 0.95. Five common peaks were identified， namely caffeic acid （peak 3），luteolin （peak 5）， rosmarinic acid （peak 8） ， luteolin （peak 9）， apigenin （peak 10）. CONCLUSIONS： The quality control method of standard decoction of fried P. frutescens seed is established， which can provide reference for the formulation of the quality standard of fried P. frutescens seed granules and related preparations.

KEYWORDS Fried Perilla frutescens seed； Standard decoction； HPLC； Fingerprint； Rosmarinic acid； Transfer rate； Yield of paste

紫蘇子為唇形科植物紫蘇[Perilla frutescens （L.）Britt.]的干燥成熟果實，始載于《名醫(yī)別錄》[1]。紫蘇子主產(chǎn)于河北、四川、甘肅、江蘇等地，其味辛，性溫，歸肺經(jīng)，具有降氣化痰、止咳平喘、潤腸通便的功效，用于痰壅氣逆、咳嗽氣喘、腸燥便秘等[2]。臨床上多用其炮制品炒紫蘇子，因炒制后可降低其油脂含量[3]，增強其止咳平喘的功效[4-5]。湯劑作為炒紫蘇子的傳統(tǒng)應(yīng)用形式，存在服用、儲存、攜帶不便等問題[6]。中藥配方顆粒和傳統(tǒng)湯劑相比具有質(zhì)量穩(wěn)定、療效可靠、便于攜帶、服用方便、便于保管等優(yōu)勢[7]，但中藥配方顆粒也存在對其療效認識不足、缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)、研究基礎(chǔ)薄弱等問題[8]。因此，2016年8月國家藥典委員會發(fā)布了《中藥配方顆粒質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)制定技術(shù)要求（征求意見稿）》，將標(biāo)準(zhǔn)湯劑作為衡量中藥配方顆粒是否與臨床湯劑基本一致的標(biāo)準(zhǔn)參照物[9-10]，以保障臨床用藥的準(zhǔn)確性和劑量的一致性。

標(biāo)準(zhǔn)湯劑系由不少于15批原料分別制得，計算其指標(biāo)成分含量、指標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率和出膏率的平均值，并規(guī)定其變化可接受的范圍。中藥配方顆粒的所有藥學(xué)研究均須與標(biāo)準(zhǔn)湯劑進行對比，以保證與標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量的一致性，因此亟需進行標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，從而為配方顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究提供準(zhǔn)確可靠的可視化標(biāo)尺。本研究遵循該文件中標(biāo)準(zhǔn)湯劑的制備方法，選用3個主產(chǎn)區(qū)的17批炒紫蘇子飲片制備標(biāo)準(zhǔn)湯劑，參考2015年版《中國藥典》（一部）炒紫蘇子項下含量測定方法[2]，以主要有效成分迷迭香酸為指標(biāo)成分，測定其含量，計算轉(zhuǎn)移率和出膏率范圍，并進行指紋圖譜研究[11]，以期建立炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量評價方法，進而為炒紫蘇子配方顆粒的質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

Waters e 2695型高效液相色譜（HPLC）儀（美國Waters科技有限公司）；Agilent 1260型HPLC儀（美國Agilent科技有限公司）；CT-C-3型熱風(fēng)循環(huán)烘箱（杭州金竺機械有限公司）；MS205DU 型電子分析天平、ME204E/02型電子分析天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；Molcell 1820A型超純水機（重慶摩爾水處理設(shè)備有限公司）；KQ5200DB型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；LGJ-100F型真空冷凍干燥機（北京松源華興科技發(fā)展有限公司）。

1.2 藥品與試劑

17批炒紫蘇子飲片經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院胡昌江教授鑒定，均由唇形科植物紫蘇[Perilla frutescem （L.）Britt.]的干燥成熟果實炮制加工而成，經(jīng)檢測均合格；17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉均由四川新綠色藥業(yè)科技發(fā)展有限公司制備；迷迭香酸對照品（批號：111871- 201706，純度：90.5%，供含量測定用）、木犀草苷對照品（批號：111720-201609，純度：94.9%）、芹菜素對照品（批號：111901-201102，純度：99.6%）、木犀草素對照品（批號：111520-201605，純度：99.6%）、咖啡酸對照品（批號：110885-201703，純度：99.7%）均來源于中國食品藥品檢定研究院；甲醇、乙腈、甲酸為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。17批炒紫蘇子飲片及標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉的信息見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的制備

2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉的制備 取炒紫蘇子飲片150 g，搗碎，加水煎煮2次，第1次加8倍水，浸泡30 min，煮沸，保持微沸煎煮30 min，200目篩網(wǎng)過濾；第2次加6倍水，煮沸，保持微沸煎煮20 min，200目篩網(wǎng)過濾。合并2次水煎液，冷卻至室溫，冷凍、干燥，即得炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉。

2.1.2 對照品溶液的制備 （1）迷迭香酸對照品溶液：取迷迭香酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制備成質(zhì)量濃度為80.00 μg/mL的對照品溶液，即得。（2）混合對照品溶液：精密稱取咖啡酸、迷迭香酸、木犀草苷、木犀草素和芹菜素對照品適量，加甲醇制備成含咖啡酸為60.10 μg/mL、迷迭香酸為80.70 μg/mL、木犀草苷為60.72 μg/mL、木犀草素為100.61 μg/mL、芹菜素為100.20 μg/mL的混合對照品溶液，即得。

2.1.3 供試品溶液的制備 取炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉約0.5 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加80%甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量；然后超聲（功率：600 W、頻率：40 kHz）處理20 min，放冷，再次稱定質(zhì)量，用80%甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2 炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑中迷迭香酸的含量測定

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 采用Water e 2695型HPLC儀進行分析。色譜柱：Agilent 5 TC-C18（2）（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.1%甲酸溶液（40 ∶ 60，V/V）；檢測波長：330 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；進樣量：5 μL。取“2.1”項下對照品溶液和供試品溶液（凍干粉批號：CZSZBT180605）按此條件進樣測定。結(jié)果，在此色譜條件下，供試品溶液中待測指標(biāo)成分迷迭香酸與相鄰峰的分離度均>1.5，理論板數(shù)按迷迭香酸計應(yīng)不低于3 000，色譜圖見圖1。

2.2.2 線性關(guān)系考察 取迷迭香酸對照品適量，精密稱定，加甲醇制備成質(zhì)量濃度為453.3 μg/mL的對照品母液。然后取母液分別稀釋得到質(zhì)量濃度為111.3、56.7、22.7、11.3 μg/mL的系列對照品溶液。分別取上述對照品溶液和對照品母液5 μL注入液相色譜儀，按“2.2.1”項下條件分析，記錄峰面積。以迷迭香酸質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x，μg/mL）、峰面積為縱坐標(biāo)（y）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性回歸方程：y=13.44x+177.4（R2=0.999 2），提示迷迭香酸檢測質(zhì)量濃度線性范圍為11.3～453.3 μg/mL。

2.2.3 精密度試驗 取同一對照品溶液按“2.2.1”項下條件連續(xù)進樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，迷迭香酸峰面積的RSD為0.83%（n=6），表明該儀器的精密度良好。

2.2.4 重復(fù)性試驗 取同一批標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）0.5 g，精密稱定6份，由同一操作人員按照“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，然后按“2.2.1”項下條件進樣測定，記錄峰面積。結(jié)果，迷迭香酸含量的RSD為1.70%（n=6），表明該方法的重復(fù)性良好。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗 取同一批標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）0.5 g，由同一操作人員按照“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，分別在室溫條件下放置0、2、4、8、12、24 h后，按“2.2.1”項下條件進樣測定，記錄峰面積。結(jié)果，迷迭香酸含量的RSD為0.38%（n=6），表明供試品溶液在室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.6 加樣回收率試驗 取已知含量的標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）約0.25 g，共6份，精密稱定，分別精密加入一定量的迷迭香酸對照品，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，然后按“2.2.1”項下條件進樣測定，記錄峰面積。結(jié)果，迷迭香酸的回收率在96.8%～99.5%之間，平均值為97.9%，RSD為1.0%（n=6），表明該方法準(zhǔn)確度良好。

2.2.7 迷迭香酸含量測定 根據(jù)已建立的含量測定方法，對17批炒紫蘇子飲片及其標(biāo)準(zhǔn)湯劑進行迷迭香酸含量測定，并計算其轉(zhuǎn)移率{轉(zhuǎn)移率（%）=[標(biāo)準(zhǔn)湯劑中迷迭香酸含量×標(biāo)準(zhǔn)湯劑收料量×（1-標(biāo)準(zhǔn)湯劑中水分含量）]/[飲片中迷迭香酸含量×飲片投料量×（1-飲片中水分含量）]×100%}和出膏率[出膏率（%）=標(biāo)準(zhǔn)湯劑收粉量/飲片投入量×100%]，結(jié)果見表3。

結(jié)果顯示，17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的出膏率為5.55%～9.75%，平均出膏率為7.80%；其中迷迭香酸的含量為0.44%～1.58%，平均含量為1.09%；迷迭香酸的轉(zhuǎn)移率為18.31%～34.32%，平均轉(zhuǎn)移率為 25.42%。

2.3 HPLC指紋圖譜分析

2.3.1 色譜條件 采用Agilent 1260型HPLC儀進行分析。色譜柱：Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：以乙腈為流動相A、0.1%甲酸為流動相B，梯度洗脫（0～10 min，3%→17%A；10～35 min，17%→22%A；35～60 min，22%→60%A）；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：330 nm；進樣量：10 μL。

2.3.2 精密度試驗 精密稱取炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）1份，按“2.1.3”項下方法制備供試品溶液，按“2.3.1”項下條件連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖。以峰8為參照峰（S），對各共有色譜峰相對保留時間及相對峰面積進行統(tǒng)計。結(jié)果，各共有峰相對保留時間的RSD為0.05%～0.35%（n=6），相對峰面積的RSD為0.24%～0.92%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.3.3 重復(fù)性試驗 取同一批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）0.5 g，精密稱定6份，由同一操作人員按“2.1.3”項下方法制成供試品溶液，再按“2.3.1”項下條件進樣測定，記錄色譜圖。以峰8為參照峰（S），對各共有色譜峰相對保留時間及相對峰面積進行統(tǒng)計。結(jié)果，各共有峰相對保留時間的RSD為0.03%～0.69%（n=6），相對峰面積的RSD為0.13%～2.03%（n=6），表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.4 穩(wěn)定性試驗 取同一批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉（批號：CZSZBT180605）0.5 g，由同一操作人員按照“2.1.3”項下方法制成供試品溶液，在室溫條件下放置0、2、4、8、12、24 h后，再按“2.3.1”項下條件進樣測定，記錄色譜圖。以峰8為參照峰（S），對各共有色譜峰相對保留時間及相對峰面積進行統(tǒng)計。結(jié)果，各共有峰相對保留時間的RSD為0.06%～0.40%（n=6），相對峰面積的RSD為0.16%～1.95%（n=6），表明樣品在室溫條件下24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.5 指紋圖譜的建立與分析 分別取 17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑凍干粉，按“2.1.3”項下方法制得標(biāo)準(zhǔn)湯劑供試品溶液（S1～S17），并按“2.3.1”項下條件進樣測定，記錄色譜圖。將所得色譜圖導(dǎo)入中藥指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)軟件（2012版）中進行匹配，以樣品S1的圖譜為參照圖譜R，建立HPLC指紋圖譜，并計算各批次樣品指紋圖譜的相似度。結(jié)果，根據(jù)匹配結(jié)果確定了11個共有峰，各批次樣品的指紋圖譜相似度均大于0.95。17批樣品的指紋圖譜及其對照指紋圖譜R見圖2、圖3，17批炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑中11個共有峰的相對保留時間見表4、共有峰的相對峰面積見表5、相似度評價結(jié)果見表6。

2.3.6 色譜峰的指認 分別取混合對照品溶液、炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑供試品溶液（凍干粉批號：CZSZBT180601），按“2.3.1”項下條件進樣測定，記錄色譜圖。通過與各對照品色譜峰進行比對分析，指認了其中5個色譜峰，分別為咖啡酸（峰3）、木犀草苷（峰5）、迷迭香酸（峰8）、木犀草素（峰9）和芹菜素（峰10），色譜圖見圖4。

3 討論

中藥標(biāo)準(zhǔn)湯劑作為經(jīng)典名方制劑的質(zhì)量基準(zhǔn)和衡量中藥配方顆粒的標(biāo)準(zhǔn)參照物，已成為當(dāng)前中醫(yī)藥界的研究熱點之一。標(biāo)準(zhǔn)湯劑的制備首先要求所用飲片來源具有道地性和代表性[12]。本研究收集了3個主產(chǎn)區(qū)或規(guī)范化種植產(chǎn)區(qū)的紫蘇子藥材共17批次，具有代表性；其次，整個制備過程完全遵循標(biāo)準(zhǔn)化操作[12]，質(zhì)量控制采用指紋圖譜和指標(biāo)成分迷迭香酸含量測定相結(jié)合，從整體定性和指標(biāo)成分定量的角度為炒紫蘇子相關(guān)制劑的制備和質(zhì)量控制提供了參考。

在指紋圖譜研究中，筆者前期對提取溶劑（乙醇、80%甲醇、水、甲醇）、提取方法（回流提取和超聲提取）、提取時間（20、30、40 min）等進行了考察。結(jié)果表明，在相同的色譜條件下，80%甲醇作為提取溶劑得到的色譜峰較多、峰面積較大，且分離度良好；回流和超聲提取效果一致，因此采用操作簡便的超聲提??；提取時間對其提取效率無顯著影響，故選擇提取時間為20 min。采用二極管陣列檢測器（DAD）進行全波長掃描，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在波長為330 nm 時，色譜峰個數(shù)最多、且各峰峰形較好，故確定檢測波長為330 nm；以流動相乙腈-0.1%甲酸水溶液進行梯度洗脫，將檢測時間延長至120 min，結(jié)果表明，60 min后沒有明顯的色譜峰，故梯度洗脫時間和記錄色譜圖的時間定為60 min。

綜上所述，本研究初步建立了炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的質(zhì)量評價方法，可用于解決因原料差異、生產(chǎn)工藝差異造成的配方顆粒質(zhì)量差異問題，保障炒紫蘇子配方顆粒質(zhì)量的穩(wěn)定可控。本研究立足于現(xiàn)代標(biāo)準(zhǔn)湯劑，提供了指紋圖譜及其指標(biāo)成分含量共同控制中藥標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量的一種新思路，能有效體現(xiàn)炒紫蘇子標(biāo)準(zhǔn)湯劑的化學(xué)成分信息，為炒紫蘇子配方顆粒及炒紫蘇子相關(guān)經(jīng)典名方的質(zhì)量控制提供了參考。但是，仍需對標(biāo)準(zhǔn)湯劑與傳統(tǒng)湯劑臨床療效的一致性等關(guān)鍵問題進行深入研究。

參考文獻

[ 1 ] 唐雪陽，安琪，孫道涵，等.基于藥物體系的紫蘇子特征圖譜質(zhì)量表征關(guān)聯(lián)分析研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)報，2015，38（4）：241-246，290.

[ 2 ] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[S]. 2015年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：338-339.

[ 3 ] 王遠，郭萍，李暉，等. RP-HPLC法同時測定紫蘇子中α-亞麻酸和亞油酸的含量[J].藥物分析雜志，2012，32（2）：252-254.

[ 4 ] 馬屏南.紫蘇子鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘作用的藥理研究[J].中南藥學(xué)，2015，10（10）：135-138.

[ 5 ] 董敏，呂麗，陸繼輝，等.炒紫蘇子醇提物對血小板聚集活性的影響[J].中國誤診學(xué)雜志，2007，7（26）：6218-6219.

[ 6 ] 殷佳，潘曄，蔡雪朦，等.中藥傳統(tǒng)湯劑、浸膏劑和配方顆粒劑的比較[J].中草藥，2017，48（18）：3871-3875.

[ 7 ] 楊喜樂，黃世敬.中藥配方顆粒劑的發(fā)展及現(xiàn)狀[J].遼寧中醫(yī)雜志，2018，45（8）：1771-1773.

[ 8 ] 嚴丹，陶興寶，張超，等.采用SWOT分析法探討中藥配方顆粒的發(fā)展趨勢[J].中國藥房，2017，28（1）：1-5.

[ 9 ] 陳玲，李曉，魏悅，等.黃芩飲片、標(biāo)準(zhǔn)湯劑、中間體、配方顆粒的HPLC指紋圖譜相關(guān)性研究[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2018，30（1）：56-60，154.

[10] 郝亞冬，李東輝，王建農(nóng).杭白菊標(biāo)準(zhǔn)湯劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究及應(yīng)用[J].中國中藥雜志，2018，43（13）：2720-2725.

[11] 何育佩，郝二偉，謝金玲，等.紫蘇藥理作用及其化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)研究進展[J].中草藥，2018，49（16）：3957-3968.

[12] 張慧，陳燕，汪佳楠，等.指紋圖譜技術(shù)在中藥配方顆粒質(zhì)量評價及過程控制中的應(yīng)用[J].中國中藥雜志，2018，43（19）：3822-3827.

[13] 陳士林，劉安，李琦，等.中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)湯劑研究策略[J].中國中藥雜志，2016，41（8）：1367-1375.

（收稿日期：2018-12-16 修回日期：2019-01-05）

（編輯：林 靜）