陳菁瑛 張武君 黃穎楨 劉保財(cái) 趙云青 鄒福賢 陳瑩 吳婷婷

摘 要：【目的】探討不同貯藏方法對(duì)金花茶花品質(zhì)的影響，為金花茶花產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)?！痉椒ā恳岳鋬龈稍锏慕鸹ú杌椴牧涎芯康蜏乇芄?、室溫曝光和室溫避光3種貯藏方法對(duì)金花茶花品質(zhì)的影響。每間隔3個(gè)月測(cè)定其總黃酮、總多糖、總皂苷和茶多酚4種生理活性成分及氨基酸、蛋白質(zhì)和粗脂肪3種營(yíng)養(yǎng)成分的動(dòng)態(tài)變化，并進(jìn)行主成分分析和多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)?！窘Y(jié)果】生理活性成分和營(yíng)養(yǎng)成分含量及其表面色澤的變化與貯藏方法及時(shí)間有關(guān)。相同貯藏條件下各貯藏方法的金花茶花總皂苷、茶多酚、蛋白質(zhì)含量均下降，粗脂肪和總多糖含量升高;低溫避光貯藏的總黃酮、總皂苷含量均較其他兩種貯藏法的高，粗脂肪則較之低，花色保持不變;室溫曝光下總黃酮和總皂苷較貯藏前降低，粗脂肪較貯藏前升高，花朵表面色澤加深變暗?！窘Y(jié)論】總黃酮、總皂苷、總多糖、氨基酸總量可作為綜合評(píng)價(jià)金花茶花品質(zhì)的可選指標(biāo)。低溫和避光利于金花茶花貯藏。從金花茶花品質(zhì)穩(wěn)定、外觀色澤變化及提高金花茶花等級(jí)和售價(jià)等方面綜合考慮，金花茶花以室溫避光貯藏不超過(guò)6個(gè)月、低溫（5℃）避光貯藏不超過(guò)12 個(gè)月為宜。

關(guān)鍵詞： 金花茶花;貯藏;質(zhì)量評(píng)價(jià);主成分分析

中圖分類(lèi)號(hào)：R 931.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1008-0384（2019）04-479-09

Abstract： 【Objective】Effects of method and duration of storage on the quality of Camellia nitidissima flowers were studied to provide reference for the pgoduct development of Camellia nitidissima flowers. 【Method】Freeze-dried camellias were stored in the dark at low temperature （DLT）， under light exposure at room temperature （LRT）， or in the dark at room temperature （DRT）. The changes on 4 functional ingredients （i.e.， flavonoids， polysaccharides， saponins， and polyphenols）， 3 nutrients （i.e.， amino acids， protein， and crude fat）， and exterior color of the flowers were determined every 3 months for a principal component analysis.【Result】 Under same storage conditions， the contents of saponin， tea polyphenol， and protein of the flowers decreased with time， but those of fat and polysaccharide increased. In a same sampling period， flavonoids and saponins were higher in the flowers under DLT than the other two treatments， but less on fat， and no significant changes on color. Under LRT， flavonoids and saponins in the stored flowers were lower than prior to the storage， whereas， fats higher， and the color intensified and darkened. 【Conclusion】The principal component analysis showed that total flavonoids， saponins， polysaccharides， and amino acids could be used as indicators for comprehensive quality evaluation on C. nitidissima flowers. Storage under DRT within 6 months or DLT at 5℃ for less than a year was considered adequate insofar as the stability， exterior color， flower grading， and market value of the freeze-dried camellias are concerned.

Key words： Camellia nitidissima flower; storage; quantitative analysis; principal component analysis

0 引言

【研究意義】金花茶是山茶科Theaceae山茶屬Camellia金花茶組植物Camellia nitidissima Chi，是茶花家族中唯一花瓣金黃色的珍稀物種，其花金黃色，蠟質(zhì)光澤，享有“茶族皇后”、“植物界大熊貓”的美譽(yù)，其花量少難求，被視為尊貴珍品，具有極高的觀賞、食用及藥用價(jià)值[1-3]。金花茶為廣西傳統(tǒng)壯藥，收載于《廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》[1]，用于咽喉炎、腎炎、痢疾、高血壓、預(yù)防腫瘤和月經(jīng)不調(diào)等癥[4-5]。現(xiàn)代研究表明，金花茶含有黃酮、皂苷、多糖、植物多酚等多種生理活性成分和氨基酸、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分[5-6]，2010年被批準(zhǔn)為國(guó)家新資源食品[7]，目前福建、廣東、云南等地引種并規(guī)?；N植?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】迄今，國(guó)內(nèi)外學(xué)者開(kāi)展了金花茶種質(zhì)資源、栽培技術(shù)、化學(xué)成分、指紋圖譜和開(kāi)發(fā)利用等方面[8-12]的研究。【本研究切入點(diǎn)】如何有效貯藏金花茶花、最大程度保障金花茶花的品質(zhì)穩(wěn)定的技術(shù)，尚未見(jiàn)深入的研究報(bào)道。因此，研究貯藏時(shí)間和儲(chǔ)藏條件對(duì)金花茶花的品質(zhì)變化的影響，可為金花茶花的貯藏提供科學(xué)指導(dǎo)?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】比較3種不同貯藏條件（低溫避光、室溫避光、室溫曝光）金花茶花中總黃酮、粗多糖、總皂苷、茶多酚、氨基酸、蛋白質(zhì)和粗脂肪含量的變化趨勢(shì)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試的冷凍干燥金花茶花由福建世紀(jì)金花茶科技有限公司提供，經(jīng)黃連冬高級(jí)工程師鑒定為山茶科防城金花茶Camellia chrysantha var. phaeopubisperma S.Y.Liang et Z.H.Tang。

1.2 儀器與試劑

KQ-400DE超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）;UV1600紫外可見(jiàn)分光系統(tǒng)（天津市拓普儀器有限公司）;R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，B-491水浴鍋（瑞士BUCHI公司）;予華SHZ-D循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器廠）;BP210十萬(wàn)分之一天平（Sartorius公司）;JSP-200高速多功能粉碎機(jī)（浙江省永康市金穗機(jī)械制造廠）;種子低溫低濕儲(chǔ)藏柜（浙江托普儀器有限公司）;離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開(kāi)發(fā)有限公司）;渦旋機(jī)（IKA）。

蘆?。ㄖ袊?guó)食品藥品檢定研究所，純度：92.4%，批號(hào)100080-201409）;人參皂苷Rg1（中國(guó)食品藥品檢定研究所，純度：93.6%，批號(hào)110703-201530）;沒(méi)食子酸（中國(guó)食品藥品檢定研究所，純度：90.8%，批號(hào)110831-201605）;葡萄糖、乙醇、甲醇、正丁醇、福林酚、苯酚、冰醋酸、香草醛、無(wú)水碳酸鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、濃硫酸、高氯酸均為國(guó)藥分析純;試驗(yàn)用水均為蒸餾水。

1.3 貯藏方法

將冷凍干燥的金花茶花分成3組，分別置于低溫避光（4～6℃避光）、室溫曝光、室溫避光貯藏9個(gè)月，每隔3個(gè)月隨機(jī)取樣用于檢測(cè)，樣品檢測(cè)前經(jīng)干燥后粉碎，過(guò)40目篩，備用。

1.4 茶多酚、總黃酮、總多糖、總皂苷含量測(cè)定

1.4.1 茶多酚 參照茶葉中茶多酚和兒茶素類(lèi)含量的檢測(cè)方法GBT 8313-2008 [13]，得到茶多酚待測(cè)液（Ⅰ），按福林酚氧化法測(cè)定。

1.4.2 總黃酮 參考黃興賢等[14]、韋秀芝等[15] 的方法，并稍作修改得提取流程：稱(chēng)取0.5 g 樣品粉末于50 mL錐形瓶中，加75%乙醇40 mL，20℃下超聲提取0.5 h，過(guò)濾，用75%乙醇洗滌殘?jiān)?，合并濾液定容于50 mL容量瓶中，得總黃酮待測(cè)液（Ⅱ），按亞硝酸鈉-硝酸鋁-氫氧化鈉顯色法[15]測(cè)定。

1.4.3 總多糖 參考韋璐等[16]的方法，稍作修改，在總多糖的提取基礎(chǔ)上，將提取總多糖后的殘?jiān)?5 mL水于75℃超聲提取1 h，過(guò)濾，用水洗滌濾渣，合并濾液定容于50 mL容量瓶中，得多糖待測(cè)液（Ⅲ），按苯酚-硫酸法[17]測(cè)定。

1.4.4 總皂苷 參考高麗萍等[18] 的方法，并優(yōu)化提取方法，稱(chēng)取樣品粉末0.5 g 于錐形瓶中，加入50 mL 75%乙醇，20℃下超聲0.5 h，過(guò)濾，濾液旋蒸至無(wú)醇味，轉(zhuǎn)移至分液漏斗，加入適量水飽和正丁醇萃取兩次，合并正丁醇層，旋蒸至干，加入甲醇復(fù)溶并定容至10 mL容量瓶中，搖勻，作為皂苷待測(cè)液（Ⅳ）。按唐昭領(lǐng)等[19]優(yōu)化的香草醛-冰醋酸-高氯酸法測(cè)定。

1.5 氨基酸、蛋白質(zhì)、脂肪含量測(cè)定

分別采用食品國(guó)家安全標(biāo)準(zhǔn)GB5009.124-2016氨基酸測(cè)定法、GB 5009.5-2016蛋白質(zhì)測(cè)定法、GB 5009.6-2016脂肪測(cè)定法，測(cè)定不同貯藏方法處理金花茶花在不同貯藏期的氨基酸、蛋白質(zhì)、粗脂肪含量。

1.6 數(shù)據(jù)分析

每組樣品平行測(cè)定3次，數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件和 DPS 14.50數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 貯藏方法與貯藏時(shí)間對(duì)金花茶花主要生理活性成分的影響

金花茶花在低溫避光、室溫曝光、室溫避光3種貯藏條件下的主要生理活性成分含量變化（表1、圖1）表明，貯藏方法及貯藏時(shí)間不同，生理活性成分含量的變化幅度及樣品的色澤不同。低溫避光貯藏的總黃酮含量變化為先降后升的趨勢(shì)，3個(gè)月時(shí)降至最低值后逐漸升高并保持較高的水平，可能原因是金花茶花總黃酮包括黃酮及其苷類(lèi)化合物[20]，而黃酮苷類(lèi)化合物隨著貯藏期的延長(zhǎng)可能發(fā)生水解轉(zhuǎn)化為更穩(wěn)定的黃酮化合物并保持一定水平，使總黃酮含量呈現(xiàn)降低后升高的趨勢(shì);室溫下曝光和避光貯藏的總黃酮含量變化趨勢(shì)相同，均表現(xiàn)為降、升再緩降的趨勢(shì)，9個(gè)月時(shí)總黃酮含量均低于貯藏前和低溫避光貯藏的樣品。3種貯藏條件下的總皂苷、總多糖和茶多酚含量的變化趨勢(shì)分別相同，總皂苷表現(xiàn)為先升后降，以低溫避光的降幅最小，表明低溫利于總皂苷保存，已有對(duì)西洋參的貯藏期皂苷含量變化研究表明，其酸性皂苷在貯藏過(guò)程中先升高后降低[21]，與金花茶花總皂苷含量變化結(jié)果相似，而西洋參堿性皂苷含量不斷下降，說(shuō)明總皂苷貯藏期間酸性和堿性皂苷可能發(fā)生轉(zhuǎn)化[21];總多糖與茶多酚含量的變化均表現(xiàn)為降、升、降的趨勢(shì)，低溫避光、室溫曝光和室溫避光3種貯藏法的總多糖含量均較藏前分別增加了21.0%、27.9%、29.3%，可能與金花茶花自由水的減少有關(guān)，與甜高粱莖稈貯存期內(nèi)糖分隨著樣品水分和汁液含量的降低而逐漸升高的研究結(jié)果一致[22];茶多酚含量均較藏前略有下降，可能與茶多酚發(fā)生氧化有關(guān)。由表1和圖1可知，低溫避光貯藏下的總黃酮、總皂苷含量在貯藏過(guò)程中均較其他兩種貯藏方法的高，且花色保持亮黃色不變;室溫曝光下總黃酮和總皂苷較貯藏前分別下降11.43%和6.04%，花朵表面顏色加深變暗為棕色，室溫避光貯藏的總黃酮和總皂苷分別下降10.29%和6.67%，花朵表面顏色加深變?yōu)辄S棕色，光照強(qiáng)度可能影響花朵的抗氧化能力[23]，避光保存有助于金花茶花維持原有的色澤。此外，溫度和光照對(duì)金花茶總黃酮和總皂苷含量影響較大，低溫和避光利于金花茶貯藏。

2.2 貯藏方法與貯藏時(shí)間對(duì)金花茶花營(yíng)養(yǎng)成分的影響

貯藏方法與貯藏時(shí)間不同金花茶花各營(yíng)養(yǎng)成分變化趨勢(shì)不同。本研究共檢測(cè)了金花茶花中17種氨基酸（表2），其中包括7種人體必需氨基酸和9種藥效氨基酸（天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、精氨酸），藥效氨基酸中天門(mén)冬氨酸、谷氨酸含量較高，均在0.4%以上;必需氨基酸含量大小為亮氨酸>賴氨酸>纈氨酸≈苯丙氨酸>蘇氨酸≈異亮氨酸>蛋氨酸，金花茶花中必需氨基酸占氨基酸總量的37%～40%。氨基酸總量與藥效氨基酸含量的變化趨勢(shì)一致（圖2-A、B），均表現(xiàn)為先緩升后下降再匯聚的趨勢(shì)，貯藏9個(gè)月時(shí)3種貯藏法的總氨基酸與藥效氨基酸含量變化均呈匯聚趨勢(shì)，含量分別相近。3種貯藏法的蛋白質(zhì)和粗脂肪含量變化趨勢(shì)分別一致，蛋白質(zhì)含量在貯藏前6個(gè)月變化不明顯，6個(gè)月后迅速下降，至9個(gè)月時(shí)3種貯藏法的含量接近，下降幅度達(dá)30%以上，說(shuō)明貯藏時(shí)間對(duì)蛋白質(zhì)含量影響大，蛋白質(zhì)在貯藏期發(fā)生降解，與貯藏時(shí)間呈正相關(guān)。粗脂肪含量的變化均表現(xiàn)為前6個(gè)月快速下降，后升高，貯藏至9個(gè)月時(shí)室溫下曝光和避光兩種貯藏法的含量接近，分別高于低溫避光貯藏的15.7%和21.1%，其可能原因是粗脂肪中不飽和脂肪酸發(fā)生氧化，使粗脂肪含量在貯藏6個(gè)月前緩慢下降，而低溫條件下，粗脂肪含量下降較室溫少，可能與低溫抑制脂肪酶活性有關(guān);隨著貯藏期的延長(zhǎng)，不飽和脂肪酸逐漸轉(zhuǎn)化為更穩(wěn)定的飽和脂肪酸[24]，并在貯藏9個(gè)月達(dá)到高值。此外，貯藏期間花朵表面顏色均加深變暗，可能與金花茶花脂肪酸等化合物的氧化酸敗有關(guān)。

2.3 貯藏期金花茶花生理活性成分和營(yíng)養(yǎng)成分含量的主成分分析

3 討論與結(jié)論

金花茶以其花色金黃、具蠟質(zhì)光澤著稱(chēng)，可見(jiàn)花朵表面顏色是評(píng)價(jià)金花茶商品品相好壞的重要指標(biāo)之一[26]?，F(xiàn)代研究表明，金花茶花含有黃酮、皂苷、多糖、茶多酚等多種生理活性成分和氨基酸、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分[6-7]，故本試驗(yàn)選擇黃酮、皂苷、多糖、茶多酚、氨基酸、蛋白質(zhì)和脂肪含量以及花朵表面顏色為指標(biāo)，用于評(píng)價(jià)貯藏方法對(duì)金花茶品質(zhì)的影響。

研究結(jié)果表明，貯藏方法及貯藏時(shí)間不同，生理活性成分和營(yíng)養(yǎng)成分含量的變化幅度及金花茶花朵表面的色澤不同。低溫避光貯藏的黃酮和皂苷含量在貯藏過(guò)程中均高于其他兩種貯藏法，且花色保持不變;室溫曝光下黃酮和皂苷較藏前分別下降11.43%和6.04%，脂肪含量則升高明顯，漲幅15.7%，花朵表面顏色加深變暗，室溫避光貯藏的黃酮和皂苷分別下降10.29%和6.67%，脂肪含量升高21.1%，花朵表面顏色變?yōu)樽厣?。可?jiàn)，金花茶花的變色程度與光線、溫度及黃酮、脂肪等成分變化有關(guān)，避光組溫度越低，成分變化幅度小顏色變化小，這與馬鵬等[27]、唐梅等[28]的研究結(jié)果相似;相同溫度下光線越強(qiáng)成分變化幅度越大變色現(xiàn)象越嚴(yán)重，與周燕等[29]報(bào)道“金銀花貯久色漸深”的現(xiàn)象類(lèi)似。金銀花、白菊[27，29-30]等花類(lèi)中藥材貯藏過(guò)程出現(xiàn)的變色現(xiàn)象均探討其與化學(xué)成分變化的關(guān)系，未見(jiàn)分析脂肪含量的變化報(bào)道，本試驗(yàn)中脂肪含量升高與金花茶花色變深是否存在相關(guān)性有待進(jìn)一步研究。

主成分分析表明不同貯藏期金花茶花生理與營(yíng)養(yǎng)成分指標(biāo)綜合質(zhì)量存在差異，同一貯藏期內(nèi)不同貯藏法貯藏的金花茶樣品間綜合質(zhì)量存在差異;總黃酮、皂苷、多糖、氨基酸總量等成分含量能全面反應(yīng)金花茶花的品質(zhì)，可作為金花茶花品質(zhì)的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)。貯藏法與貯藏時(shí)間對(duì)金花茶花的內(nèi)在質(zhì)量（生理活性和營(yíng)養(yǎng)成分含量） 和外觀色澤（變黃、變暗、生霉、生蟲(chóng)等） 均有顯著影響。從金花茶活性成分穩(wěn)定性、外觀色澤變化、節(jié)約貯藏成本及提高質(zhì)量等級(jí)和售價(jià)等方面綜合考慮，金花茶花以室溫避光密封貯藏不超過(guò)6個(gè)月、低溫避光密封貯藏不超過(guò)12個(gè)月為宜。

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（責(zé)任編輯：林海清）