李艷杰

商水縣人民醫(yī)院，河南 商水 466100

進(jìn)展性腦卒中是指在疾病發(fā)生1周內(nèi)神經(jīng)功能缺損出現(xiàn)進(jìn)行性加重情況的腦卒中。該病病死率、致殘率較高，嚴(yán)重威脅患者的生命安全[1-2]。因此，在疾病早期階段，通過(guò)某種方式獲取準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)信息，為疾病治療提供可靠依據(jù)尤為重要。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)上的突破性進(jìn)展為疾病的早期預(yù)測(cè)提供了技術(shù)支持[3-5]。研究發(fā)現(xiàn)，溶血磷脂酸與D-二聚體水平對(duì)于早期診斷進(jìn)展性腦卒中有重要意義[6-9]。本次研究探討溶血磷脂酸與D-二聚體在預(yù)測(cè)進(jìn)展性腦卒中中的作用。

1 資料與方法

1．1臨床資料以商水縣人民醫(yī)院2016-11—2018-11收治的32例進(jìn)展性腦卒中患者為研究對(duì)象(實(shí)驗(yàn)組)，以32例體檢健康者為參照(對(duì)照組)。本組進(jìn)展性腦卒中患者均有短暫腦缺血以及神經(jīng)功能障礙等臨床表現(xiàn)，并經(jīng)多普勒、腦血管檢查以及頭顱CT檢查確定其符合進(jìn)展性腦卒中診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。排除合并嚴(yán)重肝、腎功能疾病者以及哺乳期患者。實(shí)驗(yàn)組患者年齡43～79(54.2±2.3)歲，男20例，女12例。對(duì)照組年齡42～78(55.2±2.6)歲，男19名，女13名。研究開(kāi)始前已征得所有患者及體檢人員同意，并簽署知情同意書(shū)。研究過(guò)程不違背醫(yī)學(xué)倫理標(biāo)準(zhǔn)，2組年齡、性別等對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1．2方法對(duì)照組人員在入院當(dāng)天空腹?fàn)顟B(tài)下收集靜脈血5 mL，嚴(yán)格依照對(duì)應(yīng)的試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，對(duì)溶血磷脂酸水平和D-二聚體水平進(jìn)行測(cè)定。

觀察組患者入院后次日空腹?fàn)顟B(tài)下收集靜脈血5 mL，緩慢置于抗凝管內(nèi)，充分搖勻后在3 500 r/min離心機(jī)下進(jìn)行15 min的離心處理，分離血漿后測(cè)定。將血漿加入反應(yīng)孔中，樣品中含有的D-二聚體分子會(huì)被D-二聚體單克隆抗體膜捕獲，然后加入單克隆抗體和膠體金綴合物溶液，發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，顏色深淺與D-二聚體含量具有正比例關(guān)系。采用免疫比濁法在405 nm波長(zhǎng)光下檢測(cè)透光強(qiáng)度變化，將檢測(cè)到的D-二聚體水平與75 μg/L作比較，高于該標(biāo)準(zhǔn)值為陽(yáng)性，低于該標(biāo)準(zhǔn)值為陰性。

溶血磷脂酸測(cè)定：以玻璃離心管裝取2 mL，加入6 mL甲醇-氯仿混合液，振搖15 s后保存在4 ℃條件下靜置20 min。以2 600 g離心10 min，轉(zhuǎn)移上清液。殘留液體中再次加入混合的甲醇-氯仿溶液，再次離心10 min，合并上清液。將一步提取法獲取的LPA提取液與標(biāo)準(zhǔn)品混合液同時(shí)置于薄層色譜板上，以展開(kāi)劑展開(kāi)，90 min后將LPA同其他磷脂成分分離，拿出薄層色譜板，并在室溫下晾干，噴涂8-苯胺基-1-萘磺酸，于紫外燈下照射，刮取樣品斑點(diǎn)至離心管中，加入甲醇-氯仿混合液，冰水浴中靜置后，以3 000 g離心10 min，取上清液。進(jìn)行LPA的消化處理，獲取試樣的分解液。轉(zhuǎn)移分解液到容量瓶中，加入5 mL的NaOH溶液，再加入1.5 mL的鉬酸銨溶液，搖勻靜置后，加入1 mL的2%抗環(huán)血酸，定容搖勻后至于室溫下45 min，使用試劑空白做參比，利用1 cm比色皿將其置于720 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，獲取溶血磷脂酸水平。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)組溶血磷脂酸水平及D-二聚體水平均高于對(duì)照組，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。對(duì)照組D-二聚體檢測(cè)結(jié)果<75μg/L，而實(shí)驗(yàn)組檢測(cè)結(jié)果>75μg/L，實(shí)驗(yàn)組進(jìn)展性腦卒中患者呈陽(yáng)性，而對(duì)照組健康體檢者呈陰性。

表1 2組溶血磷脂酸水平及D-二聚體水平檢測(cè)結(jié)果

3 討論

進(jìn)展性腦卒中屬于難治性腦血管疾病，該病的發(fā)病率是卒中的30%左右[10-11]，相比其他類型腦卒中，其致死率和致殘率更高[12-15]。進(jìn)展性腦卒中在臨床治療過(guò)程中也表現(xiàn)出進(jìn)行性特征，而且患者的健康血管供血區(qū)域出現(xiàn)新的損傷[16]。目前進(jìn)展性腦卒中的發(fā)病機(jī)制尚未明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其可能與以下機(jī)制有關(guān)：(1)進(jìn)展性腦卒中患者的原發(fā)血栓在治療中繼續(xù)擴(kuò)大，導(dǎo)致側(cè)支循環(huán)消失或血管閉塞[17-18]；(2)進(jìn)展性腦卒中患者的原發(fā)水腫狀況進(jìn)一步擴(kuò)散，壓迫周?chē)窠?jīng)組織，進(jìn)一步加重神經(jīng)缺損癥狀[19-20]；(3)血壓下降致低灌注區(qū)域的缺血狀況更加嚴(yán)重，擴(kuò)大梗死面積[21-23]。

對(duì)進(jìn)展性腦卒中的早期預(yù)測(cè)，有助于采取針對(duì)性措施加以治療，降低疾病帶來(lái)的損傷。因此，對(duì)進(jìn)展性腦卒中預(yù)測(cè)的研究發(fā)現(xiàn)，人體血液中存在的溶血磷脂酸水平、D-二聚體水平與該病存在密切聯(lián)系[24-25]。溶血磷脂酸水平、D-二聚體水平的變化可能會(huì)對(duì)進(jìn)展性腦卒中有預(yù)測(cè)作用。研究認(rèn)為，溶血磷脂酸水平、D-二聚體均與血栓形成存在密切聯(lián)系[26-28]，因此，通過(guò)檢測(cè)溶血磷脂酸水平、D-二聚體水平的變化情況來(lái)判斷疾病的進(jìn)展情況，進(jìn)而施以有效的治療，降低進(jìn)展性腦卒中的發(fā)生。

LPA是磷脂類型中分子體積最小的一種，隨著血栓的形成，LAP水平升高，對(duì)靶器官、細(xì)胞的影響加劇，尤其LAP全程參與動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程[29-30]。一般情況下LAP由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或酯酶水解而成，其也可在體內(nèi)由血小板直接形成。因此，LAP水平將血栓、斑塊形成和破裂的影響。研究證實(shí)，當(dāng)LAP水平>2.5 mmol/L時(shí)，血小板濃度提升并出現(xiàn)聚集現(xiàn)象[31-32]。血小板的聚集過(guò)程中LAP大量產(chǎn)生，其濃度高出正常水平，將加劇血小板的聚集。血小板的活化是血栓形成的必要前提，而栓子阻塞血管需要一個(gè)漫長(zhǎng)的過(guò)程，因此，通過(guò)檢測(cè)LAP指標(biāo)水平的變化，能夠反映血栓形成的狀況，指導(dǎo)臨床醫(yī)師在沒(méi)有典型生命體征與癥狀的前提下能夠預(yù)測(cè)是否發(fā)生血栓阻塞，從而為早期治療創(chuàng)造條件。

D-二聚體的本質(zhì)是特異性降解物，屬于纖溶標(biāo)記物，其由纖溶酶水解而成。D-二聚體水平的增高，提示機(jī)體凝血系統(tǒng)與纖溶系統(tǒng)發(fā)生雙重激活，因此，D-二聚體水平檢測(cè)結(jié)果可作為纖溶亢進(jìn)與體內(nèi)血液高凝狀態(tài)的特異性分子標(biāo)記物[8]。當(dāng)機(jī)體形成血栓時(shí)，通常會(huì)在30 min內(nèi)出現(xiàn)自溶現(xiàn)象，因此，D-二聚體水平顯著增高。D-二聚體在血管壁出現(xiàn)沉積，會(huì)對(duì)血管黏膜造成一定的損傷，促進(jìn)血小板黏附、聚集，導(dǎo)致血液出現(xiàn)高凝狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，將進(jìn)展性腦卒中患者與非進(jìn)展性腦卒中患者進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，發(fā)病24 h內(nèi)患者D-二聚體水平明顯升高，且疾病進(jìn)展越嚴(yán)重，血清D-二聚體水平升高越明顯，在進(jìn)展性腦卒中發(fā)病的第7天，血清D-二聚體水平達(dá)到峰值。根據(jù)這一研究結(jié)論推斷，進(jìn)展性腦卒中患者體內(nèi)可能存在血栓形成，并伴纖溶亢進(jìn)，因此患者血清D-二聚體水平明顯升高。由此可見(jiàn)，檢測(cè)D-二聚體水平有助于判斷進(jìn)展性腦卒中患者是否形成血栓和纖溶亢進(jìn)。當(dāng)檢測(cè)出D-二聚體水平呈現(xiàn)陽(yáng)性時(shí)，說(shuō)明患者需要立即給予適當(dāng)?shù)娜芩ㄖ委?，避免血栓形成?duì)患者造成進(jìn)一步損傷。

本研究中實(shí)驗(yàn)組患者D-二聚體指標(biāo)呈陽(yáng)性，而對(duì)照組呈陰性，說(shuō)明機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)纖溶亢進(jìn)以及高凝現(xiàn)象時(shí)，D-二聚體的活性上升十分顯著。機(jī)體高凝與D-二聚體指標(biāo)之間具有明確的相關(guān)性，該指標(biāo)能有效對(duì)進(jìn)展性腦卒中的潛在威脅以及發(fā)生、發(fā)展?fàn)顩r做出判斷。本次研究所采用的兩項(xiàng)指標(biāo)均與進(jìn)展性腦卒中相關(guān)，能夠作為進(jìn)展性腦卒中病情的預(yù)測(cè)參考指標(biāo)，為臨床治療提供一定參考。