祝 喆

（撫順縣疾病預防控制中心，遼寧 撫順 113007）

梅毒是一種臨床常見的性病，傳染性極強，致病原因為梅毒螺旋體感染，梅毒一般通過通過血液、胎盤垂直傳播、性行為等途徑進行傳播[1]，對患者身體的危害不亞于艾滋病，使臨床治療難度增大。梅毒臨床表現(xiàn)較復雜，主要是梅毒病原體通過血液與淋巴系統(tǒng)在人體中傳播，使患者的臟器組織遭到極大損害，近幾年來梅毒的發(fā)病率也呈現(xiàn)逐年增長趨勢，目前已經(jīng)被國家防治疾病管理歸類于乙類病種，會對患者的身心健康于生命安全造成嚴重的影響[2]。梅毒在臨床上常分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期，Ⅰ期患者以感染部位存在硬下疳和潰瘍?yōu)橹饕憩F(xiàn)，Ⅱ期患者易皮膚黏膜遭到嚴重損害為主要表現(xiàn)，Ⅲ期患者易組織器官受損嚴重為主要表現(xiàn)，并且致死率極高。但Ⅰ期與Ⅱ患者的臨床癥狀未具備明顯的特異性，臨床上診斷時易出現(xiàn)誤診、漏診現(xiàn)象，不能及時對患者的病情進行治療和控制，致使病情發(fā)展到Ⅲ期危害到患者生命安全才得到重視，會增加臨床后期治療的難度和風險，因此需要盡早給予梅毒患者準確有效的診斷，對保障患者的預后具有重要的意義。臨床不僅需要觀察患者體征與結(jié)合性交史外，還需要依據(jù)實驗室檢查對患者病情進行準確的判斷，目前臨床上檢測梅毒的主要診斷方法包括甲苯胺紅不佳熱血清試驗法（TRUST）、酶聯(lián)免疫吸附試驗法（ELISA）、梅毒螺旋體明膠凝集試驗（TPPA）以及膠體金法[3]。其中由于TPPA法具有較高的特異度與靈敏度，臨床上將TPPA法的檢測結(jié)果常作為診斷梅毒的“黃金標準”，但該檢測方法也存在費用高、操作繁雜等特點，致使大部分患者接受程度較低，使臨床試驗室檢測梅毒轉(zhuǎn)向TRUST、ELISA與膠體金法?；诖?，本次研究選擇了以120例TPPA陽性和120例TPPA陰性的血清樣品為研究對象，旨在明確ELISA法梅毒抗體檢測與TRUST試驗在梅毒診斷中的應用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2014年1月至2018年12月以我中心經(jīng)過梅毒螺旋體顆粒凝集試驗（TPPA）檢測陽性的120例和TPPA陰性的120例血清樣品為研究對象。其中男性77例，女性43例，年齡21～47歲，平均年齡為（35.35±3.28歲），所有血清樣品狀態(tài)均符合此次研究診斷標準。

1.2 方法：所有樣品均采用TPPA 法確證，再進行ELISA法和TRUST法進行檢測。首先選取試劑盒，分別是TPPA試劑盒（富士瑞必歐株式會社）、TRUST試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司）、ELISA試劑盒（英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司），抽取患者的空腹時的靜脈血，并且將血清分離。同時在本市疾控中心提取梅毒質(zhì)控血清試劑。以上所有試劑均處于有效期內(nèi)，并且在有效期內(nèi)使用。其次選擇儀器，分別是微量移液器（單道多道數(shù)字可調(diào)微量移液器，上海求精生化試劑儀器有限公司）、洗板器（ANTHOS FLUID024.200型洗板器12道，Anthos Labtec Instruments GmbH）、37 ℃電熱恒溫培養(yǎng)箱（DHP-9162型，上海一恒科技有限公司）、酶標儀（ANTHOS READER 2010型多功能酶標儀，奧地利Anthos儀器公司）、BHC-1300∥A/B型生物安全柜等，所有設備儀器都經(jīng)過檢驗，保證能夠正常運轉(zhuǎn)。TPPA法、ELISA法和TRUST法均按照試劑盒中的操作說明進行。檢測完畢后，讀取檢測結(jié)果。

1.3 觀察指標：對比分析兩種方法的檢驗特異度和檢驗靈敏度。梅毒現(xiàn)癥患者的檢測結(jié)果。靈敏度=真陽性人數(shù)/（真陽性人數(shù)+假陰性人數(shù)）×100%，特異度=真陰性人數(shù)/（真陰性人數(shù)+假陽性人數(shù)）×100%。

1.4 統(tǒng)計學方法：本次研究將通過SPSS.20.0統(tǒng)計軟件來比較分析所有數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以（%）表示，以χ2來進行組間檢驗，采用P＜0.05代表組間差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

ELISA法檢驗檢出陽性121例，陰性119例。其檢驗靈敏度為100.0%，檢驗特異度99.1%。采用TRUST法檢驗檢出陽性82例，陰性158例.其檢驗靈敏度為66.7%，檢驗特異度98.3%。數(shù)據(jù)顯示，ELISA法檢驗靈敏度明顯高于TRUST法（χ2=39.952，P=0.000），兩種方法的檢驗特異度差異不顯著（χ2=0.249，P=0.618）。80名梅毒現(xiàn)癥患者的血清樣品ELISA法與TRUST法檢測結(jié)果均為陽性。

3 討論

梅毒是一種傳染性極強的性疾病，危險性大，且病情難以控制且呈現(xiàn)多樣化，因此臨床在診斷時容易發(fā)生誤診、漏診等情況[4]。臨床治療梅毒難度較大，梅毒患者感染上艾滋病的概率是正常人的五倍以上，該病的發(fā)生主要是由于患者機體受到梅毒螺旋體的感染而致，若未在患者早期對病情進行治療與控制，使得患者病情蔓延，加重病情程度，會對患者機體組織器官造成嚴重損害，甚至出現(xiàn)衰竭、死亡等情況，危險性極高。近幾年來由于現(xiàn)代人的思想逐漸開放，多數(shù)患者存在過早接觸性生活和性生活不潔等現(xiàn)象，致使梅毒的發(fā)病率越來越高，臨床和社會群眾需要引起重視[5]。梅毒具備較高的傳染性且有一定潛伏期，Ⅱ期梅毒與隱性梅毒的主要臨床表現(xiàn)無明顯的癥狀，大多為皮膚表現(xiàn)，常被患者和臨床忽視。因此臨床輸血與術(shù)前應當加強對梅毒螺旋體額檢測，一般情況下人體感染梅毒2周后，其血清學反應比較明顯。臨床上梅毒的檢驗方法比較多，每種方法都具備自身的檢驗和應用價值，而選擇一種科學合理的方法對患者后續(xù)治療至關(guān)重要。據(jù)相關(guān)研究表明[6]，TP特異性抗體檢驗梅毒的價值比較好，能夠有效監(jiān)測到梅毒的療效，因此對梅毒進行特異性檢驗是有效的方法。

梅毒患者受到梅毒螺旋體感染之后，會出現(xiàn)一種類脂質(zhì)抗體，可分為特異性和非特異性，因此臨床診斷時多是對這兩種抗體進行檢測，以此來準確的判斷患者是否存在梅毒感染情況。ELISA法就是對TP特異性抗體進行融組，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法以及雙抗原夾心法來診斷梅毒，該方法簡單有效，在臨床上被廣泛應用，因為ELISA法檢驗的對象選擇的是IgM與IgG雙抗體[7]，其敏感度以及特異性非常高，在具體操作中可以在同一時間內(nèi)進行多份抗體檢驗，并將酶標儀作為標準，且使用的試劑比較便宜，一般來說臨床檢測結(jié)果都具備客觀性，在計算機中輸入原始數(shù)據(jù)，能夠達到長期保存的作用。但是該方法在臨床應用中也存在著一定的問題，即特異性抗體在非常短的時間內(nèi)就會顯現(xiàn)，而消失卻需要較長的時間[8]，對患者進行梅毒治療時依舊能夠準確發(fā)現(xiàn)特異性抗體，若是在特定情況之下，會呈現(xiàn)出終生檢出狀態(tài)，由此說明ELISA法陽性僅能夠表示患者正在被感染和曾經(jīng)感染過，無法當作臨床檢測梅毒的最終療效方法。

TRUST法是指在甲苯胺紅溶液中放入VDRL進行煉制，檢測血漿以及血清中的反應素，簡單方便，易于操作，并且檢出速度快，對于非梅毒螺旋體抗原血清試驗方法敏感性和特異性較好，適用于大量人群的篩查。經(jīng)充分治療后，反應素可以消失。未經(jīng)治療的患者，其血清內(nèi)的反應素可長期存在?？勺鳛榀熜в^察、判愈、復發(fā)或再感染的指征。梅毒的預后診斷中的作用十分明顯，先天性梅毒也比較適合用TRUST法進行檢測。但是TRUST法也存在一定的問題，非梅毒螺旋體血清試驗在普通人群中1%～2%的陽性率發(fā)生，通常陽性滴度小于1∶8，如急性發(fā)熱性傳染病，妊娠，吸毒，膠原性疾病（SLE，類風關(guān)結(jié)病）容易造成漏診、誤診的情況，進而耽誤患者的治療，造成醫(yī)療糾紛的風險比較大。據(jù)相關(guān)報道顯示，以潛伏期梅毒和Ⅰ期梅毒患者作為研究對象，TRUST法檢測的敏感性較低，尤其是在晚期梅毒患者治療之后，檢測結(jié)果易出現(xiàn)陰性的現(xiàn)象，因此在早期和晚期梅毒患者的輔助診斷中效果欠佳，不過TRUST法在操作時比較簡單，試劑較為廉價，在檢測時的時間也比較短，不需要使用特定的儀器設備就能夠測定患者的抗體滴度，可作為梅毒患者觀察治療效果的指標，若患者的治療效果為顯效時，TRUST法測定的抗體滴度則表現(xiàn)為下降趨勢或呈現(xiàn)陰性，因此TRUST法可用作臨床觀察梅毒療效與梅毒患者復查[9]。與ELISA法和TRUST法相比，TPPA抗原的抗體敏感性和特異性均高，作為非梅毒螺旋體抗原血清試驗（如RPR等）初篩陽性標本的確證試驗，能夠作為梅毒患者的確診試驗，并且可測定梅毒效價，并且TPPA法和ELISA法檢測有一致性，其主要檢查對象是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應仍持續(xù)存在陽性，不能用于觀察療效。TPPA等陽性不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應結(jié)合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結(jié)果進行診斷，但是該方法成本較高，試劑昂貴且操作時間比較長，操作也比較復雜，所以臨床上一般只會應用于小量檢測，不適合大量標本篩選[10]。因此臨床上對陽性測定的確診試驗常應用ELISA法與TRUST法。本次研究結(jié)果顯示，ELISA法檢驗靈敏度明顯高于TRUST法（P＜0.05）；兩種方法的檢驗特異度無差異（P＞0.05），說明兩種方法各具優(yōu)勢和劣勢，ELISA法與TRUST法具備相關(guān)性，但也會存在假陰性與陽性的情況，主要是由于梅毒螺旋體在人體感染后，抗體表面抗原會對機體造成刺激，使其產(chǎn)生梅毒螺旋體特異性抗體，對于一些患者的血清中有內(nèi)源性物質(zhì)，若應用ELISA法檢測會對結(jié)果造成一定影響，并且抗體效價下降與檢驗人員的操作能力也會影響到檢查結(jié)果，因此臨床檢測和判定時需要綜合考慮。

綜上所述，ELISA法梅毒抗體檢測與TRUST試驗在梅毒診斷中均有一定的診斷價值和不同的優(yōu)勢，具體檢測可以聯(lián)合兩種方法，簡單有效，既能及時診斷患者疾病，又方便了梅毒確診療效觀察，值得臨床應用推廣。