王坤 王春蕾

（鹽城市疾病預(yù)防控制中心 江蘇 鹽城 224000）

近年來(lái)，人們對(duì)食用菌需求不斷增加，食用菌不僅具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，同時(shí)也具有藥用價(jià)值，具有抗癌和提升免疫力的效果。食用菌產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，為農(nóng)民帶來(lái)了客觀的收益，對(duì)于推動(dòng)農(nóng)業(yè)發(fā)展、擴(kuò)大農(nóng)業(yè)效益具有重要意義[1]。但在食用菌的實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中，由于栽培技術(shù)落后，導(dǎo)致食用菌病蟲(chóng)害激增，為了保證產(chǎn)量，許多生產(chǎn)者盲目使用農(nóng)藥，導(dǎo)致食用菌中農(nóng)藥含量超標(biāo)[2]。為此，需要利用快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)技術(shù)，真實(shí)反映食用菌中的農(nóng)藥殘留量，控制食用菌的質(zhì)量，保障消費(fèi)者的生命健康。

1.超高效液相色譜檢測(cè)食用菌農(nóng)藥殘留的前期準(zhǔn)備

1.1 儀器與試劑準(zhǔn)備

1.1.1 儀器選擇，見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)儀器

1.1.2 對(duì)照試劑及試驗(yàn)試劑情況，見(jiàn)表2、表3。

表2 對(duì)照試劑

表3 試驗(yàn)試劑及配比

1.2 食用菌樣品前處理

1.2.1 樣品處理 本次檢測(cè)試驗(yàn)所選食用菌為平菇、金針菇和香菇，樣品處理流程如下：攪碎、加定量乙腈、高速勻漿5min、減壓抽濾、加入氯化鈉振搖5 分鐘、靜置分層、取上層溶液于40℃水浴、減壓濃縮、加入5%甲醇設(shè)95%二氯甲烷混合液溶解殘?jiān)?/p>

1.2.2 樣品凈化 樣品凈化流程如下：以入5%甲醇設(shè)95%二氯甲烷混合液預(yù)洗氨基柱、計(jì)入已處理的樣品溶液、收集洗脫液、以5%甲醇與95%二氧甲烷混合液過(guò)柱重復(fù)以上步驟、洗脫液40℃水浴、減壓濃縮、用甲醇溶解殘?jiān)?、加水定容、在旋渦混合器上混勻、濾膜過(guò)濾、裝入自動(dòng)進(jìn)樣瓶。

1.3 超高效液相分析

利用色譜柱對(duì)樣品農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)后確定甲基硫菌靈、多菌靈、環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺4 種農(nóng)藥的最大檢測(cè)波長(zhǎng)[3]。隨后對(duì)殘留農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)定。在檢測(cè)之前進(jìn)行梯度洗脫，該過(guò)程中應(yīng)用到的溶劑為乙酸銨+水+三氟乙酸和甲醇。確定4 種殘留農(nóng)藥最大檢測(cè)波長(zhǎng)分別為甲基硫菌靈264nm、多菌靈280nm、環(huán)丙氨嗪240nm、三聚氰胺237nm。保證外部條件最佳，對(duì)殘留農(nóng)藥進(jìn)行峰值、峰面積、工作曲線測(cè)定。

2.檢測(cè)結(jié)果

2.1 線性和檢出限

使用流動(dòng)相逐級(jí)稀釋適量?jī)?chǔ)備液配制含有7 個(gè)濃度點(diǎn)的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，工作曲線見(jiàn)表4。

表4 線性和檢出限

2.2 精密度試驗(yàn)

在空白樣品中加標(biāo)測(cè)定精確度，見(jiàn)表5。

表5 精確度

2.3 樣品分析

按照萃取條件、凈化條件與液相方法進(jìn)行處理，見(jiàn)表6。

表6 樣品分析

色譜檢測(cè)方法應(yīng)用于農(nóng)作物中農(nóng)藥多殘留的分析檢測(cè)，通過(guò)對(duì)比甲基硫菌靈、多菌靈、環(huán)丙氨嗪和三聚氰胺四種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液，測(cè)試中發(fā)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果與其他文獻(xiàn)參數(shù)相同，色譜條件一致[4]。同時(shí)，在對(duì)進(jìn)峰面積進(jìn)行測(cè)定時(shí)，得出四種農(nóng)藥的最佳濃度。此外，通過(guò)坐標(biāo)展示分析物濃度和峰面積的檢測(cè)線性時(shí)發(fā)現(xiàn)分析物的線性關(guān)系良好，因此檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確。在對(duì)檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)度進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)結(jié)果相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差較小，檢測(cè)方法重現(xiàn)性較強(qiáng)[5]。

綜合來(lái)看，超高效液相色譜檢測(cè)食用菌農(nóng)藥殘留具有靈敏度高、操作便捷、溶劑消耗低的特點(diǎn)，能夠用于食用菌農(nóng)藥殘留的常規(guī)檢測(cè)中[6-7]。

3.結(jié)論

隨著科技檢驗(yàn)技術(shù)的進(jìn)步，食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)的方式越來(lái)越多。超高效液相色譜是一種快捷、高效的檢測(cè)技術(shù)，在食用菌及其他農(nóng)作物的農(nóng)藥殘留檢測(cè)中具有廣泛的應(yīng)用前景[8]。超高效液相色譜法具有廣泛的應(yīng)用范圍，高分離效率，高檢測(cè)速度。流動(dòng)相可以用于各種高效液相色譜法，各種固定相，色層分析柱可以重復(fù)使用，非常方便。高效液相色譜法被廣泛用于分離和檢測(cè)揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性較差的大分子和離子化合物。從上述檢測(cè)過(guò)程中來(lái)看，超高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)能夠精準(zhǔn)測(cè)定常見(jiàn)食用菌中的農(nóng)藥殘留，而且過(guò)程簡(jiǎn)單，具有生態(tài)環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)，不會(huì)對(duì)外界造成二次污染，可進(jìn)一步提高食品檢驗(yàn)的工作效率及準(zhǔn)確度，因此可將其應(yīng)用于食品檢測(cè)工作中。