黃四爽，熊 勤

(湖北省漢川市人民醫(yī)院：1.檢驗(yàn)科；2.輸血科，湖北孝感 431600)

腎細(xì)胞癌(RCC)是臨床泌尿系統(tǒng)腫瘤最常見(jiàn)的一類腫瘤，它源于腎小管上皮細(xì)胞[1]，成人發(fā)病率僅次于膀胱癌，位居第2位，且逐年上升[2]。腎細(xì)胞癌的發(fā)病機(jī)制尚不明確，相關(guān)病理機(jī)制較為復(fù)雜。胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)作為絡(luò)氨酸激酶跨膜的直接受體，參與到了細(xì)胞有絲分裂、細(xì)胞轉(zhuǎn)化等過(guò)程[3-4]，同時(shí)和腫瘤發(fā)生和發(fā)展有一定關(guān)聯(lián)。microRNA-99a(miR-99a)位于21q21，與一些疾病密切相關(guān)，在多種常見(jiàn)腫瘤中均呈現(xiàn)出異常表達(dá)[5]。還有學(xué)者提出，miR-99a在子宮內(nèi)膜癌、口腔癌、RCC、肝細(xì)胞癌和食管鱗狀細(xì)胞癌中表達(dá)下調(diào)[6-7]。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院泌尿科2014年9月至2016年12月收治的腎細(xì)胞癌患者80例，患者年齡41～68歲，平均(53.68±4.51)歲；男性49例，女性31例。根據(jù)患者病理學(xué)分類，將患者分為腎透明細(xì)胞癌(59例)，乳頭狀腎細(xì)胞癌(15例)，嫌色細(xì)胞性腎細(xì)胞癌(6例)。診斷標(biāo)準(zhǔn)：腎細(xì)胞癌診斷治療指南(2018版本)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)首發(fā)原發(fā)性腎癌，無(wú)腫瘤轉(zhuǎn)移；(2)術(shù)前均未接受規(guī)范的放療(或化療)。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)長(zhǎng)期使用皮質(zhì)激素或其他免疫抑制劑的患者；(2)合并其他原發(fā)和轉(zhuǎn)移腫瘤及嚴(yán)重感染性疾病者；(3)對(duì)依維莫司過(guò)敏者；患有重度疾病，如心力衰竭、心肌梗死、心律失常、糖尿病等控制不佳的疾病者。所有入組患者均簽署研究同意書(shū)，本研究獲得醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(編號(hào)20140706)。

1.2方法

1.2.1IGF-1R水平檢測(cè) 染色棕紅色顆粒則認(rèn)定IGF-1R蛋白陽(yáng)性，根據(jù)染色強(qiáng)度進(jìn)行具體分級(jí)和記分[8]對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞的分級(jí)則參照Volm雙評(píng)分法，在染色成功的腫瘤區(qū)域挑選5個(gè)高倍視野：然后對(duì)陽(yáng)性細(xì)胞百分率進(jìn)行評(píng)分，其中<25%為1分，25%～50%為2分，>50%則為3分；并且對(duì)染色強(qiáng)度也進(jìn)行評(píng)價(jià)，分為0分(無(wú)色)、1分(淺棕色)、2分(棕黃色)、3分(棕紅色)。將陽(yáng)性細(xì)胞百分率綜合染色強(qiáng)度進(jìn)行分級(jí)，具體為陰性(-)：1～2分，弱陽(yáng)性(+)：3～4分，強(qiáng)陽(yáng)性(++)：5～6分。同時(shí)由2名病理醫(yī)師進(jìn)行結(jié)果判斷。

1.2.2miR-99a水平檢測(cè) 使用免疫組化對(duì)miR-99a進(jìn)行檢測(cè)，miRNA cDNA 試劑盒(購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司)，而后采用ABI 7900HT序列檢測(cè)系統(tǒng)(購(gòu)自美國(guó)Applied Biosystems公司)進(jìn)行測(cè)序。完成循環(huán)后通過(guò)儀器讀取檢測(cè)數(shù)值，同時(shí)由2名病理醫(yī)師進(jìn)行結(jié)果判斷。

1.2.3腎功能相關(guān)生化指標(biāo)檢測(cè) 取患者空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min，離心5 min，取其上清液使用自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)水平；使用 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)、腦鈉肽(BNP)水平；使用循環(huán)液相法檢測(cè)同型半胱氨酸(Hcy)水平；使用免疫比濁法測(cè)定尿清蛋白排泄率(UAER)水平。

1.2.4療效評(píng)價(jià) 按照標(biāo)準(zhǔn)(RECIST11.0)[9]將療效分為：完全緩解(CR，病灶全部消失)、部分緩解(PR，病灶縮小30%或以上)、病情穩(wěn)定(SD，病灶無(wú)明顯改變)、疾病進(jìn)展(PD，病灶增加明顯)。

2 結(jié) 果

2.1不同情況RCC患者癌組織中IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平比較 RCC患者性別、年齡、組織學(xué)類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對(duì)患者癌組織中IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率及IGF-1R表達(dá)水平的比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；RCC患者腹膜轉(zhuǎn)移、FIGO分期、病理分化對(duì)患者癌組織中IIGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的影響均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 不同情況RCC患者癌組織中IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較

續(xù)表1 不同情況RCC患者癌組織中IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較

2.2RCC患者不同組織IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較 RCC患者不同組織進(jìn)行IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較，癌組織、癌旁組織、健側(cè)腎組織中IGF陽(yáng)性表達(dá)率的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，miR-99a水平的比較差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 RCC患者不同組織IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較

2.3RCC患者治療后臨床結(jié)局與IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較 不同臨床結(jié)局RCC患者比較，IGF-1R陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 RCC患者治療后臨床結(jié)局與IGF陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a水平的比較

2.4患者IGF-1R表達(dá)情況對(duì)腎功能相關(guān)生化指標(biāo)表達(dá)水平的影響 RCC患者治療后陰性患者和陽(yáng)性患者RBP、SFPRP5、Hcy、BNP、UAER水平的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 患者IGF-1R表達(dá)情況對(duì)腎功能相關(guān)生化指標(biāo)表達(dá)水平的影響

3 討 論

RCC的比例占全球惡性腫瘤的2%～3%，雖然比例較小，但卻呈逐年增長(zhǎng)的趨勢(shì)[10]，目前對(duì)于RCC的主要治療方法為根治性手術(shù)，但是根據(jù)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，有將近33%的RCC患者在初診時(shí)已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移或在根治術(shù)后出現(xiàn)局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[11]，而轉(zhuǎn)移性RCC對(duì)放化療都不敏感，療效和預(yù)后效果較差[12]，所以盡早診斷RCC成為影響預(yù)后的關(guān)鍵因素之一，同時(shí)也提醒筆者需要對(duì)RCC的治療和預(yù)后效果進(jìn)行更精確的分析與判斷。

本研究的結(jié)果顯示，RCC患者腹膜轉(zhuǎn)移、FIGO分期、病理分化對(duì)患者癌組織中IGF陽(yáng)性表達(dá)率及IGF-IR表達(dá)水平的指標(biāo)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在肝癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌及前列腺癌等其癌細(xì)胞中均有IGF-1R表達(dá)增高；而IGF-IR不僅對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用，而且對(duì)腫瘤惡性程度及轉(zhuǎn)移性也有增加作用，本研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)FIGO分期為Ⅲ/Ⅳ期的患者和病理分化為G3的患者，其IGF-IR表達(dá)水平明顯上調(diào)，表明IGF-IR的水平也與RCC的病理組織學(xué)分型等具有一定關(guān)系。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，CR、PR、SD、PD患者IGF陽(yáng)性表達(dá)率及IGF-IR表達(dá)水平的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。IGF是一種常見(jiàn)、對(duì)人體諸多生理過(guò)程均有重要作用的生長(zhǎng)因子，主要通過(guò)兩套分泌機(jī)制(自分泌與旁分泌)對(duì)局部細(xì)胞產(chǎn)生不同程度的調(diào)節(jié)作用[13]。還有學(xué)者提出，IGF-IR與酪氨酸激酶結(jié)合后悔激活細(xì)胞通路，使酪蛋白磷酸化過(guò)程加速，最終激活磷脂酰肌醇3激酶、絲氨酸蘇氨酸蛋白激酶，最終影響到腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[14-16]。miRNA是非編碼的小分子RNA，該基因表達(dá)失調(diào)參與許多生物過(guò)程，包括細(xì)胞增殖、分化、凋亡，并且參與癌癥的進(jìn)展[17-19]。而miR-99a的異常表達(dá)表明該因子可能參與腎細(xì)胞癌的增殖生長(zhǎng)。RCC患者治療后陰性患者和陽(yáng)性患者RBP、SFPRP5、Hcy、BNP、UAER指標(biāo)的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，進(jìn)一步表明血清IGF-IR與腎功能的下降有密切的關(guān)系?？紤]可能機(jī)制是由于IGF-IR可促進(jìn)血管細(xì)胞增生從而增加血管通透性，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷加快，對(duì)腎功能造成損傷，并引起微清蛋白尿發(fā)生[20-21]。

綜上所述，RCC患者不同來(lái)源的組織中其 IGF-IR陽(yáng)性表達(dá)率和miR-99a表達(dá)水平均有明顯差別，IGF-IR陽(yáng)性表達(dá)率越高，miR-99a表達(dá)水平也越高，而患者腎功能相對(duì)越差。IGF-IR和miR-99a定量檢測(cè)有助于對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸情況進(jìn)行判定。