王艷平 趙靜 紀元博

·臨床論著·

CEACAM6在甲狀腺癌中的表達及臨床意義

王艷平*1趙靜2紀元博3

（1. 漯河市第二人民醫(yī)院小兒外科，河南 漯河 462300；2. 漯河市第二人民醫(yī)院麻醉科，河南 漯河 462300；3. 漯河市第二人民醫(yī)院急診科，河南 漯河 462300）

觀察CEACAM6在甲狀腺癌中的表達及臨床意義。2010年1月至2014年1月收集98例甲狀腺癌患者的癌組織和癌旁組織標本，采用免疫組化SP法測定CEACAM6表達情況，分析其與臨床病理特征及預后之間的關(guān)系，并以多因素Cox回歸分析預測不良事件的指標。甲狀腺癌石蠟標本中CEACAM6陽性表達率明顯高于癌旁組織CEACAM6陽性表達率（84.7% vs 26.5%，P<0.05）。CEACAM6蛋白表達增高與肺癌的病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)（P<0.05），而與患者性別、年齡、腫瘤大小無關(guān)（P＞0.05）。CEACAM6蛋白高表達的患者與低表達的患者總生存率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分級、臨床分期和CEACAM6均是肺癌患者預后的獨立影響指標。CEACAM6與甲狀腺癌的浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，是判斷預后的重要指標。

CEACAM6；甲狀腺癌；臨床分期；生存率

甲狀腺癌發(fā)病率和病死率較高，嚴重影響人類的健康和生活質(zhì)量。臨床上目前對該病的治療主要采用手術(shù)治療結(jié)合化療和放療[1]，但臨床效果不太理想，術(shù)后復發(fā)對預后的影響較大，并嚴重影響著患者的身心健康。由于甲狀腺癌的早期癥狀不明顯，發(fā)現(xiàn)時往往已是腫瘤中、晚期[2]，因此，甲狀腺癌早期發(fā)現(xiàn)并手術(shù)切除非常重要。然而，目前大部分患者初診時均為晚期，缺乏理想的、非創(chuàng)傷性早起診斷甲狀腺癌的腫瘤標志物。CEACAM6屬于癌胚原家族的細胞表面的糖蛋白。與細胞極性和結(jié)構(gòu)的破壞存在一定的聯(lián)系，能抑制細胞成熟和細胞凋亡，與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[3]。已有研究顯示，CEACAM6在胃、乳腺、胰腺、結(jié)直腸中高表達[4]，但對于甲狀腺癌鮮有報道。本研究重點分析CEACAM6在甲狀腺癌中的表達及與預后的關(guān)系，為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年1月至2014年1月在漯河市第二人民醫(yī)院接受手術(shù)切除的98例甲狀腺癌患者癌組織和癌旁組織石蠟標本，均經(jīng)病理確診。術(shù)前均未接受化療和放療，其中男55例，女43例。年齡24~82歲，中位年齡59歲。研究前所有患者均告知并知情同意，并經(jīng)院倫理委員會批準。

1.2 免疫組化測定CEACAM6的表達

采用免疫組化SP法，蠟塊連續(xù)切片5 μm，然后脫蠟、水化、抗原修復，PBS沖洗3次。80%甲醛浸泡20 min，阻斷過氧化物酶活性，PBS沖洗3次，血清封閉15 min。滴加CEACAM6兔抗人一抗（1：250，Santa Cruz公司），過夜，PBS沖洗脫水、透明、鏡檢。以PBS代替一抗作為陰性對照。CEACAM6主要表達在細胞膜和細胞質(zhì)，棕黃色為陽性細胞。

1.3 結(jié)果判定

由兩位病理科醫(yī)師結(jié)合陽性細胞比例和染色強度做出判斷。陽性細胞比例評分：無染色細胞為0分，≤10%為1分，介于11%-50%為2分，介于51-75%為3分，≧75%為4分。染色強度記分：無染色細胞為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，兩者相乘≥3分為陽性。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結(jié)果

2.1 癌組織和癌旁組織CEACAM6陽性表達情況

本研究甲狀腺癌石蠟標本中CEACAM6陽性表達83例，陽性表達率84.7%。癌旁組織CEACAM6陽性表達26例，陽性表達率26.5%。甲狀腺癌組織的陽性表達率明顯高于癌旁組織（P<0.05），見圖1。

圖1 癌組織和癌旁組織中CEACAM6的表達（×200）

注：A：癌組織；B：癌旁組織

2.2 CEACAM6與甲狀腺癌病理、臨床特征的關(guān)系

CEACAM6蛋白表達增加與甲狀腺癌的病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)，而與患者性別、年齡、腫瘤大小無關(guān)，見表1。

表1 CEACAM6與甲狀腺癌病理、臨床特征的關(guān)系（例（%））

2.3 CEACAM6與甲狀腺癌生存的相關(guān)分析

甲狀腺癌患者CEACAM6蛋白陽性組總生存率明顯低于陰性組總生存率（37.3% vs 86.7%），差異有統(tǒng)計學意義（X2=11.378，P<0.05）。

圖2 生存曲線

2.4 多因素Cox回歸分析

采用Cox回歸模型對年齡、性別、腫瘤大小、組織學分級、臨床分期等因素急性分析，。結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分級、臨床分期和CEACAM6均是甲狀腺癌患者預后的獨立影響指標，見表2。

3 討論

甲狀腺癌是一種常見的內(nèi)分泌癌，而且近來發(fā)病率大幅增加，死亡率較高。手術(shù)切除是治療甲狀腺癌的治療方法，而化療是為那些無法手術(shù)或有手術(shù)的患者進行的治療方案，但結(jié)果并不是太理想[5]。

表2 多因素Cox回歸分析

人類癌胚抗原家族有7個屬于CEACAM亞組的基因，這些亞組的基因在癌組織中顯示復雜的表達模式，并在胃腸癌，呼吸和泌尿生殖系統(tǒng)疾病和乳腺癌等疾病中過度表達。CEACAM6是非特異性交叉反應(yīng)糖蛋白，具有更廣泛的特征，并在肺癌、胰腺癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌和肺癌、肝細胞癌中高度表達[6]。據(jù)報道，siRNA抑制CEACAM6表達，將提高癌細胞凋亡，增加caspase-3介導的細胞凋亡。而抗體定向靶向CEACAM6可能為RNA干擾沉默提供臨床可行的替代方案，以增強腫瘤對化療藥物的反應(yīng)[7]。本研究中，甲狀腺癌石蠟標本中CEACAM6陽性表達率明顯高于癌旁組織CEACAM6陽性表達率，與相關(guān)研究一致，同時也說明CEACAM6高表達與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切。另外，研究還發(fā)現(xiàn)CEACAM6蛋白表達增加與甲狀腺癌的病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)，而與患者性別、年齡、腫瘤大小無關(guān)。與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分級G1期、臨床分期Ⅰ+Ⅱ期比較，在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分級G2+G3期、臨床分期Ⅲ+Ⅳ期中CEACAM6表達明顯增高，這可能與CEACAM6促進了腫瘤細胞遷移和浸潤有關(guān)。

在甲狀腺癌方面，已有學者研究甲狀腺癌與臨床指標及預后的相關(guān)性。國內(nèi)王天陽等研究發(fā)現(xiàn)，膽管癌中CEACAM6蛋白表達水平明顯高于非腫瘤膽道上皮組織，與膽管癌的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和組織學分級明顯相關(guān)，而且CEACAM6低表達組生存時間明顯長于高表達組[8]。張科等研究發(fā)現(xiàn)，胰腺癌組織中CEACAM6表現(xiàn)出較高的表達水平，高表達CEACAM6患者的生存期較短，說明CEACAM6與胰腺癌的惡性程度密切相關(guān)[9]。Ru GQ等研究發(fā)現(xiàn)，CEACAM6在胃癌中過表達并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。與患者的五年存活率呈負相關(guān)。Cox多變量分析結(jié)果表明CEACAM6是患者預后獨立影響因素[10]。本研究通過Cox模型進行逐步回歸分析，結(jié)果顯示：淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學分級、臨床分期和CEACAM6均是甲狀腺癌患者預后的獨立影響指標，同時也都說明CEACAM6參與了甲狀腺癌的發(fā)生和進展，癌組織中CEACAM6的表達可作為判斷甲狀腺癌病理類型重要的參考指標。而且CEACAM6過度表達預測整體情況不佳，CEACAM6蛋白高表達的患者與低表達的患者相比，總體生存較差，提示CEACAM6可以反映甲狀腺癌患者預后，并可以作為甲狀腺癌治療的新的靶點。

總之，CEACAM6與甲狀腺癌的浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，判斷預后的重要指標，也可能成為甲狀腺癌治療的新靶點，值得臨床推廣。

1 薛云, 李道明, 張靜, 等. Stat5在甲狀腺癌中的表達及其與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的關(guān)系[J]. 實用醫(yī)學雜志, 2017, 33(6): 905-908.

2 周愛軍, 王洪勇, 李振, 等. 甲狀腺癌組織中BRMSl和Cx43的表達與患者臨床病理及預后的關(guān)系[J]. 中國普通外科雜志, 2017, 26(2): 259-264.

3 Son SM, Yun J, Lee SH, et al. Therapeutic Effect of HLIP-mediated CEACAM6 Gene Silencing in Lung Adenocarcinoma[J]. Sci Rep, 2019, 9(1): 1160.

4 李娟, 樸天華, 王睿, 等. 中老年翼狀胬肉患者癌胚抗原相關(guān)細胞黏附分子6和血管內(nèi)皮生長因子表達與微血管密度的關(guān)系[J]. 中國老年學雜志, 2017, 37(6): 1497-1499.

5 王興, 朱一鳴, 黃輝, 等. 甲狀腺癌術(shù)中甲狀旁腺誤切危險因素分析[J]. 中國實用外科雜志, 2017, 37(9): 1028-1031.

6 Jin C, Duan X, Liu Y, et al. T cell immunity induced by a bivalent Salmonella-based CEACAM6 and 4-1BBL vaccines in a rat colorectal cancer model[J]. Oncol Lett, 2017, 13(5): 3753-3759.

7 Bednarek K, Kostrzewska-Poczekaj M, Szaumkesse M, et al. Downregulation of CEACAM6 gene expression in laryngeal squamous cell carcinoma is an effect of DNA hypermethylation and correlates with disease progression[J]. Am J Cancer Res, 2018, 8(7): 1249-1261.

8 王天陽, 劉兵, 武海波, 等. CEACAM6在膽管癌組織中的表達及對預后的影響[J]. 中國老年學雜志, 2019, 39(01): 55-57

9 張科, 劉瑩瑩, 金春暉, 等. CEACAM6和FOXP3對胰腺癌腫瘤浸潤淋巴細胞及預后的影響[J]. 細胞與分子免疫學雜志, 2015, 31(08): 1103-1107.

10 Ru GQ, Han Y, Wang W, et al. CEACAM6 is a prognostic biomarker and potential therapeutic target for gastric carcinoma[J]. Oncotarget, 2017, 8(48): 83673-83683.

Expression and clinical significance of CEACAM6 in thyroid cancer

Wang Yan-ping*1, Zhao Jing2, Ji Yuan-bo3

(1. Department of Pediatric Surgery, The Second People's Hospital of Luohe, Luohe 462300, Henan; 2. Department of Anesthesiology, The Second People's Hospital of Luohe, Luohe 462300, Henan; 3. Department of Emergency, The Second People's Hospital of Luohe, Luohe 462300, Henan)

To investigate the expression and clinical significance of CEACAM6 in thyroid cancer.The specimens of cancer tissues and paracancerous tissues of 98 patients with thyroid cancer were collected from January 2010 to January 2014. The CEACAM6 expression was determined by immunohistochemical SP method. And its relationship with clinicopathological features and prognosis was analyzed. Multivariate Cox regression analysis was used to predict indicators of adverse events.The positive expression rate of CEACAM6 in thyroid cancer tissues was significantly higher than that in adjacent tissues (84.7% vs 26.5%). The increased expression of CEACAM6 protein was closely related to the pathological grade, lymph node metastasis and clinical stage of lung cancer, but not related to gender, age and tumor size. The difference in the overall survival rate between patients with high expression of CEACAM6 protein and those with low expression was statistically significant (P<0.05). Lymph node metastasis, histological grade, clinical stage and CEACAM6 were independent indicators of prognosis in patients with lung cancer.CEACAM6 is closely related to the invasion and metastasis of thyroid cancer, which is an important indicator of prognosis.

CEACAM6; Thyroid cancer; Clinical stage; Survival rate

王艷平，女，主治醫(yī)師，主要從事外科疾病研究，Email：lhua77@163. com。

（2019-8-28）