肖蘇萍，尚興樸，郭凱，王浩，王繼永，高永堅(jiān)

1.中國(guó)中藥有限公司，北京 100195；2.中國(guó)中藥控股有限公司，廣東 佛山 528303

玉屏風(fēng)為中藥名方，主要成分為黃芪、白術(shù)、防風(fēng)，具有益氣、固表、止汗功效[1]，是氣虛體質(zhì)的補(bǔ)氣良方。玉屏風(fēng)作為古代經(jīng)典名方，以其獨(dú)特療效占具市場(chǎng)份額，僅國(guó)產(chǎn)藥品注冊(cè)上市的口服液、丸劑和顆粒劑等不同劑型產(chǎn)品就有108個(gè)，玉屏風(fēng)顆粒經(jīng)現(xiàn)代化制造設(shè)備提取、濃縮、制粒而成，現(xiàn)為國(guó)藥集團(tuán)廣東環(huán)球制藥有限公司獨(dú)家和國(guó)家基本藥物劑型品種，年銷售額達(dá)3億元。近年來(lái)，有大量文獻(xiàn)報(bào)道玉屏風(fēng)制劑的現(xiàn)代藥理研究和臨床應(yīng)用，尤其是玉屏風(fēng)對(duì)兒科反復(fù)呼吸道感染、感染后咳嗽、哮喘、肺炎支原體肺炎等疾病治療效果多有報(bào)道[2]。2017年，玉屏風(fēng)顆粒用于慢性阻塞性肺疾病的隨機(jī)、雙盲、多中心臨床研究結(jié)果表明，玉屏風(fēng)顆?？捎行е委熉璺?。2018年，玉屏風(fēng)顆粒治療小兒反復(fù)呼吸道感染隨機(jī)、雙盲、多中心臨床試驗(yàn)結(jié)果表明臨床療效較好，未出現(xiàn)不良反應(yīng)、臨床安全性高。面對(duì)經(jīng)典名方玉屏風(fēng)制劑臨床療效的不斷挖掘和發(fā)現(xiàn)，市場(chǎng)用量的逐步擴(kuò)大，為保障藥品安全和質(zhì)量，控制其處方藥材、飲片來(lái)源的農(nóng)藥殘留和重金屬及有害元素含量非常有必要。本研究采取原子吸收分光光度法和氣相色譜法對(duì)玉屏風(fēng)處方黃芪、白術(shù)、防風(fēng)3種不同產(chǎn)地藥材和飲片的重金屬及有害元素和農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)分析，以期對(duì)制劑生產(chǎn)的原料選擇提供一定參考依據(jù)。

1 材料

1.1 樣品

2017年分別從黃芪、白術(shù)、防風(fēng)各主產(chǎn)地收集藥材和飲片樣品39份，其中黃芪樣品14份，白術(shù)樣品14份，防風(fēng)樣品11份。經(jīng)中國(guó)中藥有限公司王繼永研究員鑒定，確認(rèn)為黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao、白術(shù)AtractylodesmacrocephalaKoidz.和防風(fēng)Saposhnikoviadivaricata(Turcz.) Schischk.藥材和飲片。樣品信息見表1。

表1 樣品信息

1.2 儀器和試藥

Clarus 580氣相色譜儀(美國(guó)珀金埃爾默公司)；DB-1701毛細(xì)管柱(30 cm×0.25 mm，美國(guó)安捷倫公司)；63Ni -ECD 電子捕獲檢測(cè)器；日本島津 AA6880 原子吸收分光光度計(jì)，ASC6880 自動(dòng)進(jìn)樣器，WR-1 型微波樣品處理系統(tǒng)(北京美誠(chéng)科貿(mào)集團(tuán))。六六六(BHC：α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC)，滴滴涕(DDT：pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT)及五氫硝基苯(PCNB)對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度均為 100 μg·mL-1)均購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；砷、鎘、汞、鉛、銅標(biāo)準(zhǔn)溶液均購(gòu)自中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院；丙酮、石油醚(沸程 60～90 ℃)、二氯甲烷均為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

2 測(cè)定方法和結(jié)果

農(nóng)藥殘留測(cè)定的色譜條件、對(duì)照品、供試品溶液制備以及測(cè)定方法參照《中華人民共和國(guó)藥典》通則2341農(nóng)藥殘留量測(cè)定法中的第一法9種有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定[1，3]，測(cè)定結(jié)果見圖1、表2。重金屬及有害元素砷、鎘、汞、鉛、銅的測(cè)定條件，標(biāo)準(zhǔn)品貯備液和供試品溶液的制備，標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備以及測(cè)定方法參照《中華人民共和國(guó)藥典》通則2321鉛、鎘、砷、汞、銅中的原子吸收分光光度法進(jìn)行測(cè)定[1，3]，樣品重金屬及有害元素殘留量測(cè)定結(jié)果見表3。

注：由上至下分別為：對(duì)照品圖譜，白術(shù)藥材圖譜，黃芪藥材圖譜，防風(fēng)藥材圖譜；1～9分別為α-六六六，五氯硝基苯，γ-六六六，β-六六六，δ-六六六，pp′-DDE，op′-DDT，pp′-DDD，pp′-DDT。圖1 對(duì)照品和藥材農(nóng)藥殘留圖譜

表2 黃芪、防風(fēng)、白術(shù)有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定mg·kg-1

注：—表示未檢出，總六六六檢出限為0.007 mg·kg-1，總滴滴涕檢出限為0.025 mg·kg-1，五氯硝基苯檢出限為0.002 mg·kg-1。

表3 不同產(chǎn)地黃芪、防風(fēng)、白術(shù)5種重金屬及有害元素測(cè)定 mg·kg-1

注：—表示未檢出，其中鉛的檢出限為0.002 4mg·kg-1，鎘的檢出限為0.000 1mg·kg-1，砷的檢出限為0.000 48mg·kg-1，汞的檢出限為0.000 51mg·kg-1，*表示超出標(biāo)準(zhǔn)。

3 結(jié)果分析與討論

3.1 農(nóng)藥殘留和重金屬含量情況分析

目前，《中華人民共和國(guó)藥典》僅對(duì)這3種藥材中黃芪藥材和飲片的農(nóng)藥殘留和重金屬及有害元素進(jìn)行限量要求，未對(duì)所有中藥材及飲片的重金屬及有害元素進(jìn)行限度規(guī)定；除另有規(guī)定外，每1 kg中藥材或飲片農(nóng)藥殘留限量有統(tǒng)一規(guī)定(表4)。除另有規(guī)定外，中藥注射劑按各品種項(xiàng)下每日最大使用量計(jì)算，鎘不得超過3 μg，鉛不得超過12 μg，汞不得超過2 μg，砷不得超過6 μg，銅不得超過150 μg[4]，未對(duì)其他中成藥劑型進(jìn)行重金屬及有害元素限量規(guī)定。

表4 農(nóng)藥殘留和重金屬及有害元素在不同標(biāo)準(zhǔn)中的限值 mg·kg-1

注：《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中六六六為α，β，δ等異構(gòu)體之和，五氯硝基苯為五氯硝基苯、五氯苯胺與甲基五氯苯硫醚之和。

由表2可知，黃芪、防風(fēng)、白術(shù)3種藥材和飲片農(nóng)藥殘留量均符合《中華人民共和國(guó)藥典》[1]《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和《中華人民共和國(guó)藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)定，說(shuō)明這3種藥材樣品在人工種植過程中，農(nóng)藥使用控制較好，殘留率低。

由表3可知，產(chǎn)自黑龍江佳木斯的防風(fēng)藥材中的鎘，產(chǎn)自湖南、浙江磐安白術(shù)藥材中的鎘以及產(chǎn)自四川、浙江磐安、河北定州的白術(shù)藥材中的銅略超出標(biāo)準(zhǔn)外，其他均符合《中華人民共和國(guó)藥典》《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》和《中華人民共和國(guó)藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》。相對(duì)《德國(guó)藥典》對(duì)汞(≤0.1 mg·kg-1)和鎘(≤0.2 mg·kg-1)限量要求，防風(fēng)的4個(gè)產(chǎn)地有3個(gè)產(chǎn)地的汞都超標(biāo)，產(chǎn)自山西應(yīng)縣的黃芪的鎘也超標(biāo)。白術(shù)和防風(fēng)藥材是否對(duì)重金屬有蓄積作用，目前對(duì)這2種藥重金屬研究的報(bào)道較少，需進(jìn)一步用實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)驗(yàn)證。

3.2 不同檢測(cè)方法對(duì)重金屬及有害元素含量差異分析

課題組曾利用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法對(duì)同產(chǎn)地同批黃芪藥材中的鉛、鎘、銅等3種重金屬元素進(jìn)行測(cè)定分析，測(cè)定結(jié)果與本文中利用原子吸收分光光度法測(cè)定分析結(jié)果略有差異，這可能與兩種方法檢出限、檢測(cè)原理和干擾因素有關(guān)?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》規(guī)定重金屬及有害元素檢測(cè)項(xiàng)的中藥材品種檢測(cè)方法照“通則2321原子吸收分光光度法或電感耦合等離子體質(zhì)譜法”測(cè)定，“通則0411電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法”也可用于多元素的測(cè)定，方法基本同電感耦合等離子體質(zhì)譜法，但鑒于本課題組對(duì)黃芪各重金屬及有害元素檢測(cè)結(jié)果比較，建議選擇原子吸收分光光度法和電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行中藥材及飲片重金屬及有害元素檢測(cè)。

3.3 玉屏風(fēng)制劑質(zhì)量控制預(yù)測(cè)分析

血液中汞含量達(dá)到200 μg·L-1時(shí)能導(dǎo)致腎障礙、震顫乃至麻痹；鎘被國(guó)際癌癥研究中心于1992年確認(rèn)為IA級(jí)致癌物，被美國(guó)毒物管委會(huì)列為第6位危害人體健康的有毒物質(zhì)，鎘是已知的最易在體內(nèi)長(zhǎng)期蓄積的毒物[5]。重金屬元素半衰期長(zhǎng)、不易分解，易在人體內(nèi)蓄積，當(dāng)蓄積到一定含量時(shí)，可導(dǎo)致各種疾病發(fā)生[6]。從基于玉屏風(fēng)處方來(lái)源的3種藥材和飲片39個(gè)產(chǎn)地農(nóng)藥殘留和重金屬測(cè)定結(jié)果來(lái)看，超出標(biāo)準(zhǔn)的總體比例很小，玉屏風(fēng)藥品質(zhì)量和安全有所保障。但要走上國(guó)際市場(chǎng)，還需要加強(qiáng)3種藥材種植生產(chǎn)中土壤、農(nóng)藥、化肥和除草劑等選擇和使用，達(dá)到以環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)的綠色認(rèn)證制度要求。

對(duì)于兒童用藥，《美國(guó)藥典》對(duì)膳食補(bǔ)充劑中的鉛和汞要求不超過0.02 mg·kg-1，鎘不超過0.006 mg·kg-1，砷不超過0.01 mg·kg-1。由原國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā)布的《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 保健食品》(GB 16740—2014)規(guī)定嬰幼兒保健食品總砷不超過0.3 mg·kg-1，總汞不超過0.02 mg·kg-1，固態(tài)或半固態(tài)保健食品的鉛不超過0.3 mg·kg-1，液態(tài)的鉛不超過0.02 mg·kg-1。根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)情況以及國(guó)內(nèi)中藥材種植栽培現(xiàn)狀，建議玉屏風(fēng)顆粒兒童用藥提升藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包含重金屬和農(nóng)藥殘留限量要求，嚴(yán)控藥品質(zhì)量和安全，以促進(jìn)玉屏風(fēng)顆粒更大使用率，造福于廣大疾病患者。