劉 欣 楊莎莎 高宗銀

（廣州市第一人民醫(yī)院，廣東 廣州 510030）

糖尿病性干眼癥屬于難治性干眼癥，而國內(nèi)對于糖尿病性干眼癥的形態(tài)學(xué)改變及發(fā)病機(jī)制的研究還處于相對空白階段。盡管其病因與發(fā)病機(jī)制尚未明確，治療上也無有效的方法，我們希望通過不斷深入研究，采用中西醫(yī)結(jié)合治療，為這一常見病的防治提供一種新方法[1]。本研究通過建立糖尿病性干眼癥動物模型，明確糖尿病性干眼癥的活體形態(tài)學(xué)特征。進(jìn)一步動物分組及給予復(fù)明片藥物干預(yù)，通過觀察給藥前后的淚膜破裂時間、棉線濕潤的平均長度、角膜熒光染色評分、IL-6、IL-1β、TNF-α淚液炎性因子水平指標(biāo)，探討復(fù)明片治療糖尿病性干眼癥的藥理作用及作用機(jī)制，為指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)[2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取40只大鼠作為研究對象，所有的大鼠均來源于醫(yī)科大學(xué)的動物實(shí)驗(yàn)中心。

1.2 方法

1.2.1 動物模型建立：當(dāng)大鼠進(jìn)食的時間滿48 h后，對于糖尿病組的大鼠，應(yīng)按照55 mg/kg體質(zhì)量，給予大鼠2%的鏈脈佐菌素（STZ），采用一次性腹腔注射法，給予對照組大鼠等量0.1 mol/L檸檬酸一檸檬酸鈉緩沖液采用腹腔注射法[3]。在72 h后，在對大鼠進(jìn)行采血時，經(jīng)尾對大鼠進(jìn)行靜脈采血，在對全血血糖進(jìn)行測定時，應(yīng)使用血糖儀進(jìn)行測量，當(dāng)血糖高于16.7 rnmol/L，并且此血糖水平能夠維持1周時，則可判定患有糖尿病模型[4]。成模的糖尿病組大鼠使用苯扎氯銨溶液滴眼（濃度0.2%，每次5 μL，每天2次）持續(xù)22 d，誘導(dǎo)出具有干眼表現(xiàn)的糖尿病大鼠模型[5]。

1.2.2 動物分組及藥物干預(yù)：共40只大鼠，將其分成4組，每組10只，分別對每組中的大鼠進(jìn)行干預(yù)，連續(xù)用藥60 d。復(fù)明片在疾病治療中應(yīng)用，需要將其研磨成粉末狀，將其放入到溫開水中進(jìn)行攪拌，分別配制成濃度為10%和20%的混懸液[6]。正常對照組（A組）：在灌胃時使用溫開水，服用的劑量為5 mL/kg，每日1次。糖尿病干眼組（B組）：在灌胃時使用溫開水，服用的劑量為5 mL/kg，每日1次[7]。糖尿病干眼+復(fù)明片低劑量處理組（C組）：在灌胃時使用溫開水，10%復(fù)明片，服用的劑量為5 mL/kg，每日1次。糖尿病干眼+復(fù)明片高劑量處理組（D組）：在灌胃時使用溫開水，20%復(fù)明片，服用劑量為5 mL/kg，每日1次[8]。

1.3 觀察指標(biāo)：對四組大鼠給藥前后的淚膜破裂時間、棉線濕潤的平均長度進(jìn)行對比；對四組大鼠角膜熒光染色評分進(jìn)行比較；對四組大鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α水平進(jìn)行比較。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：研究得出數(shù)據(jù)通過SPSS22.0軟件統(tǒng)計(jì)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示計(jì)量資料，以t檢驗(yàn)，P＜0.05說明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組大鼠淚膜破裂時間、大鼠淚液分泌試驗(yàn)結(jié)果比較：C組和D組的淚膜破裂時間及棉線濕潤的平均長度均低于A組，但高于B組，D組的淚膜破裂時間及棉線濕潤的平均長度低于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。見表1。

表1 四組大鼠淚膜破裂時間、大鼠淚液分泌試驗(yàn)結(jié)果比較（）

表1 四組大鼠淚膜破裂時間、大鼠淚液分泌試驗(yàn)結(jié)果比較（）

2.2 四組大鼠角膜熒光染色評分比較：B組的角膜熒光染色評分高于A組、C組和D組，C組和D組高于A組，差異明顯（P＜0.05）。見表2。

2.3 四組大鼠淚液炎性因子水平比較：B組大鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α水平高于A組、C組、D組，C組和D組大鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α水平低于B組，差異明顯（P＜0.05）。

表2 四組大鼠角膜熒光染色評分比較（）

表2 四組大鼠角膜熒光染色評分比較（）

表3 四組大鼠淚液炎性因子水平比較（）

表3 四組大鼠淚液炎性因子水平比較（）

3 討論

隨著社會老齡化，生活條件提高，角膜接觸鏡的普及，視頻終端使用時間的延長，干眼癥的發(fā)病率越來越高，且發(fā)病人群明顯趨于年輕化。我國40歲以上人群干眼患病率高達(dá)21%～52.4%，55歲以上老年人淚膜破裂時間明顯縮短，基礎(chǔ)淚液分泌量明顯下降[9-10]。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，糖尿病性干眼癥是干眼癥的一種特殊類型，屬于難治性干眼癥，其治療難點(diǎn)可以歸納為四點(diǎn)：①對治療的應(yīng)答性差，起效慢；②病程呈持續(xù)性、漸進(jìn)性及不可消除性。③因糖尿病感覺神經(jīng)受損，眼部不適感輕，具有癥狀與體征分離的特點(diǎn)，易被醫(yī)患雙方疏忽，延誤治療。④由于同時伴有糖尿病的多種并發(fā)癥，往往顧此而失彼[11-12]。糖尿病眼表病變的發(fā)病機(jī)制至今仍不十分清楚，研究已經(jīng)證實(shí)擴(kuò)大的炎性反應(yīng)在糖尿病并發(fā)癥的發(fā)病機(jī)制中非常重要。血糖長期升高的糖尿病患者易形成糖基化終產(chǎn)物（AGES），AGEs與其特異性受體結(jié)合后，通過介導(dǎo)細(xì)胞活化、觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激促發(fā)炎性反應(yīng)，從而參與糖尿病性干眼癥的發(fā)生和發(fā)展[13-14]。

本文的研究而結(jié)果顯示，C組和D組的淚膜破裂時間及棉線濕潤的平均長度均低于A組，但高于B組，D組的淚膜破裂時間及棉線濕潤的平均長度低于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。B組的角膜熒光染色評分高于A組、C組和D組，C組和D組高于A組，差異明顯（P＜0.05）。B組大鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α水平高于A組、C組、D組，C組和D組大鼠的IL-6、IL-1β、TNF-α水平低于B組，差異明顯（P＜0.05）。說明IL-1β參與了干眼的發(fā)生發(fā)展，是影響眼球角膜熒光染色嚴(yán)重程度的主要因素，說明復(fù)明片在糖尿病性干眼癥治療中，改善了細(xì)胞因子的狀態(tài)，能夠有效修復(fù)炎癥，對眼病的發(fā)生發(fā)展起到了控制性作用，改善了眼部的病情[15-16]。

綜上所述，在糖尿病性干眼癥治療中應(yīng)用復(fù)明片治療方法，降低了淚液炎性因子水平，改善了干眼癥狀。