王長起，王運(yùn)啟，王欣科，李凱

（南陽油田總醫(yī)院普外科，河南 南陽 473132）

直腸癌是臨床上較為常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，其長期占據(jù)消化道腫瘤病死率的前三位[1]。臨床上在具有高蛋白飲食的人群中,直腸癌的發(fā)病風(fēng)險可明顯上升,其遠(yuǎn)期生存預(yù)后的惡化更為明顯[2]。通過對于直腸癌發(fā)病過程中相關(guān)生物學(xué)機(jī)制的研究,能夠為直腸癌的診斷及臨床預(yù)后的評估提供參考。腫瘤基因代謝調(diào)控因子的改變，能夠在直腸癌的病情進(jìn)展過程中發(fā)揮作用。脫嘌呤脫嘧啶核酸內(nèi)切酶（apurinic/apyrimidinicendonuelease1，APE1-AAbs）作為核酸代謝修飾因子，其能夠通過影響到癌基因的激活，增加腫瘤基因的突變風(fēng)險，最終促進(jìn)癌細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞異常增殖轉(zhuǎn)錄過程。APE1-AAbs 對于直腸腺體上皮細(xì)胞遺傳物質(zhì)的調(diào)控，能夠增加癌細(xì)胞內(nèi)信號通路的激活程度，最終促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生[3,4]。為了揭示APE1-AAbs 的表達(dá)與直腸癌患者的病情關(guān)系,從而為直腸癌的診斷及治療提供參考, 本次研究選取2015 年2 月-2018 年1 月我院確診的直腸癌患者80 例，探討了APE1-AAbs 的表達(dá)及其與直腸癌患者的病情關(guān)系。

1 對象與方法

1.1 對象 選取 2015 年 2 月-2018 年 1 月我院確診的直腸癌患者80 例為直腸癌組、40 例健康體檢對象為對照組。直腸癌組,男 48 例、女 32 例;年齡37~77 歲, 平均 54.4±10.0 歲；TNM 分期：Ⅰ期 20例、Ⅱ期 32 例、Ⅲ期 22 例、Ⅳ期 6 例；病理學(xué)分化程度：高分化20 例、中分化35 例、低分化 25 例；病灶直徑>5.0cm 38 例；發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移35 例。對照組，男 20 例、女 20 例；年齡 40~79 歲，平均55.0±8.6 歲。兩組研究對象的年齡、性別比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn) 診斷標(biāo)準(zhǔn)：直腸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴患者年齡范圍19～79 歲；⑵直腸癌患者均經(jīng)過腸鏡取活組織病理學(xué)檢查證實；⑶接受本研究相關(guān)檢查前，患者無放化療病史；⑷對照組為健康體檢正常人員；⑸本研究符合《赫爾辛基宣言》相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴伴有其他部位的惡性腫瘤；⑵未經(jīng)病理學(xué)檢查證實;⑶伴有免疫功能疾病、類風(fēng)濕性疾病。

1.3 APE1-AAbs 檢測方法 采用外周靜脈血3~5ml，室溫下放置5~10min，自然分層后抽取上層清亮液體待測。采用貝克曼庫爾特UniCel DxI 800 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行APE1-AAbs 的檢測，EasyBlot ECL 化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒購自賽默飛公司。

1.4 統(tǒng)計分析 本研究中所有數(shù)據(jù)的分析均采用SPSS21.0 版本，APE1-AAbs 檢測結(jié)果等計量指標(biāo)采用±s 表示，組間比較采用t 檢驗；性別組間比較采用χ2檢驗；P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較 直腸癌組患者的血清APE1-AAbs 水平顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）,見表1。

表1 兩組APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較（）

表1 兩組APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較（）

組別 n直腸癌組對照組P 值80 40 APE1-Aabs（μg/ml） t 值3.53±1.35 1.95±0.77 6.8560.000

2.2 血清APE1-AAbs 診斷直腸癌的價值 血清APE1-AAbs 水平鑒別診斷直腸癌的靈敏度為84.26%、特異度為71.54%、漏診率為15.74%、誤診率為28.46%、ROC 曲線下面積AUC 值0.771,見圖1。

圖1 血清APE1-AAbs 診斷直腸癌的ROC 曲線

2.2 不同臨床病理學(xué)特征的直腸癌患者血清APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較 TNM 分期（Ⅲ期+Ⅳ期）、低分化、發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的直腸癌組患者的血清APE1-AAbs 水平顯著高于TNM 分期（Ⅰ期+Ⅱ期）、高中分化、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；不同年齡、性別、病灶直徑的直腸癌患者血清APE1-AAbs 水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）,見表2。

3 討論

臨床上直腸癌的發(fā)病具有一定的年輕化趨勢，在長期飲食不規(guī)律、高熱量、高蛋白、低纖維素飲食的群體中,直腸腺體上皮細(xì)胞損傷修復(fù)過程異常，能夠顯著促進(jìn)直腸癌發(fā)生[6]。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，直腸癌患者的5 年生存率較低,其遠(yuǎn)期總體生存時間不超過32 個月[7,8]。通過對于直腸癌的早期診斷,能夠在直腸癌的早期手術(shù)治療或者新型輔助化療方面發(fā)揮作用, 從而改善直腸癌患者的整體臨床預(yù)后。現(xiàn)階段主要采用糖鏈蛋白199 或者癌胚抗原等指標(biāo)輔助診斷直腸癌,雖然糖鏈蛋白199 等指標(biāo)能夠在直腸癌的早期診斷過程中發(fā)揮作用[9]。但依靠糖鏈蛋白199 等指標(biāo)診斷直腸癌的靈敏度或者特異度仍然較低,其對于直腸癌患者臨床病理特征評估的一致性率不足40%[10,11]?；蛘{(diào)控障礙，能夠在癌細(xì)胞的早期發(fā)生過程中發(fā)揮作用，本次研究通過對直腸癌患者體內(nèi)基因調(diào)控因子APE1-AAbs 的分析, 能夠在揭示直腸癌病情進(jìn)展原理的同時，為臨床上直腸癌的治療提供參考。

表2 不同臨床病理學(xué)特征的直腸癌患者血清APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較（）

表2 不同臨床病理學(xué)特征的直腸癌患者血清APE1-AAbs 檢測結(jié)果比較（）

因素 n APE1-Aabs（光密度值） t 值P 值年齡（歲）≥50＜50性別-1.2300.222 44 36 3.34±1.32 3.70±1.28 0.6530.515男 女48 32 3.60±1.25 3.41±1.31 TNM 分期Ⅰ期+Ⅱ期Ⅲ期+Ⅳ期分化程度高+中低分化病灶直徑（cm）＞5.0≤5.0淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移-2.4580.016 52 28 3.17±1.26 3.90±1.28-2.1610.034 55 25 3.25±1.33 3.94±1.31 1.1000.275 38 42 3.70±1.28 3.39±1.24 3.1010.003是 否35 45 4.02±1.17 3.15±1.30

APE1-AAbs 是核酸限制性內(nèi)切酶, 其通過對于癌細(xì)胞內(nèi)癌基因P16 的內(nèi)切修飾作用,能夠提高癌細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄的活性, 加劇癌細(xì)胞過度增殖的風(fēng)險。分子生物學(xué)領(lǐng)域的機(jī)制研究認(rèn)為，APE1-AAbs還能夠提高癌細(xì)胞轉(zhuǎn)錄上游啟動子和增強(qiáng)子的激活程度, 最終增加腫瘤細(xì)胞的核轉(zhuǎn)錄障礙風(fēng)險[12]。部分研究者已經(jīng)探討了核酸內(nèi)切酶相關(guān)因子在消化道腫瘤患者中的表達(dá)情況,認(rèn)為在消化道腫瘤患者中, 核酸內(nèi)切酶相關(guān)因子的表達(dá)濃度明顯上升[13,14],但缺乏對于APE1-AAbs 的診斷學(xué)具體價值分析。

本次研究發(fā)現(xiàn), 在直腸癌患者體內(nèi)APE1-AA bs 的表達(dá)濃度明顯高于良性或者正常對照人群，統(tǒng)計學(xué)差異較為顯著，表明APE1-AAbs 在直腸癌患者中存在較為明顯的上升趨勢。之所以存在較高的APE1-AAbs 表達(dá)，主要由于癌基因代謝調(diào)控紊亂，誘導(dǎo)了核酸切除修復(fù)的障礙，導(dǎo)致核酸切除修復(fù)酶活性的異常，最終促進(jìn)了 APE1-AAbs 的反饋性上升。有其他研究者也認(rèn)為，在直腸癌患者病灶組織中，APE1-AAbs 的表達(dá)濃度可隨著直腸癌患者病情的進(jìn)展而上升,特別是在5 年生存率較低或者短期內(nèi)病情進(jìn)展風(fēng)險較高的患者中，APE1-AAbs 的表達(dá)濃度上升更為明顯[15]。診斷學(xué)價值分析可見，在直腸癌患者中，APE1-AAbs 的診斷靈敏度和特異度均較為理想, 其診斷的效能均可接近80%左右, 但仍然存在APE1-AAbs 漏診和誤診的風(fēng)險。臨床上對于高危直腸癌人群，必要時可以通過聯(lián)合APE1-AAbs 及其他腫瘤標(biāo)志物，從而提高直腸癌的篩查效能。在探討APE1-AAbs 的表達(dá)與直腸癌患者臨床病理特征的關(guān)系過程中,發(fā)現(xiàn)在臨床分期較高、淋巴結(jié)明顯轉(zhuǎn)移或者直腸癌細(xì)胞分化不良的患者中，血清APE1-AAbs 的表達(dá)濃度較高，提示了APE1-AAbs 的表達(dá)對于直腸癌患者臨床病理特征的影響。這主要由于APE1-AAbs 的上升，能夠提高癌細(xì)胞基因調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子的活性，增加了癌細(xì)胞的浸潤和粘附能力,促進(jìn)了直腸腺體病變細(xì)胞對于鄰近組織或者淋巴結(jié)的侵襲過程，最終影響到了相關(guān)臨床病理特征的進(jìn)展；而APE1-A Abs 對于癌細(xì)胞分化調(diào)控的影響，主要由于其能夠干預(yù)到癌細(xì)胞分化誘導(dǎo)因子cyc 的代謝，從而影響到癌細(xì)胞分化成熟過程[16,17]。

綜上所述，在直腸癌患者中，血清APE1-AAbs的表達(dá)濃度明顯上升，檢測血清APE1-AAbs 水平對于直腸癌的診斷及病理學(xué)特征評估均具有一定的臨床價值。