周亮 葛勝旺 劉宗泰 安會波

1河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省兒童醫(yī)院呼吸科,石家莊050000；2河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省兒童醫(yī)院病理科,石家莊050000；3重慶醫(yī)科大學(xué)401100

兒童呼吸道感染是兒科的常見病、多發(fā)病。肺炎是世界范圍內(nèi)兒童死亡的第一位原因[1]。有報(bào)道指出,80%以上的急性呼吸道感染由病毒引起[2]。近年來,隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展,呼吸道感染造成兒童死亡的病例逐年減少。但廣譜抗菌藥物的廣泛應(yīng)用,使細(xì)菌耐藥成為了醫(yī)藥界廣泛關(guān)注的問題,呼吸道感染病原體變遷和耐藥率逐漸上升,病原學(xué)診斷尤為重要。筆者選取河北醫(yī)科大學(xué)附屬河北省兒童醫(yī)院848例呼吸道感染患兒標(biāo)本,采用基因檢測的方法,對其呼吸道病原菌的病原譜進(jìn)行分析,從中得出病原體感染的流行病學(xué)特點(diǎn),以便更好地指導(dǎo)臨床合理用藥,減少細(xì)菌耐藥的產(chǎn)生。

1 對象與方法

1.1 研究對象 本研究選取河北省兒童醫(yī)院2019年呼吸道感染患兒848例,標(biāo)本為鼻拭子、痰液、支氣管肺泡灌洗液。其中男484例 (57.1%),女364例 (42.9%)。年齡范圍為0～14 歲。將848例患兒按年齡分為嬰幼兒組 (0～3歲)、學(xué)齡期組(4～14歲)。本研究符合《赫爾辛基宣言》的原則。

1.2 樣本采集 鼻拭子的采集按照標(biāo)準(zhǔn)采集流程進(jìn)行,采樣液總量不少于1 ml。支氣管肺泡灌洗液的總量不少于1 ml。痰液采集要求白細(xì)胞總數(shù)＞25/低倍視野且上皮細(xì)胞＜10/低倍視野。樣本的短途運(yùn)輸采用泡沫箱加冰。

1.3 方法 采用成都博奧晶芯生物科技有限公司生產(chǎn)的呼吸道病原菌核酸檢測試劑盒(恒溫?cái)U(kuò)增芯片法)。規(guī)格12人份/盒。在恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的基礎(chǔ)上,在微流控碟式芯片上進(jìn)行反應(yīng),將熒光染料摻入反應(yīng),實(shí)時(shí)熒光分析。一步完成靶基因的擴(kuò)增和檢測。在河北省兒童醫(yī)院病理科運(yùn)用RTisochipTMA 恒溫?cái)U(kuò)增微流控芯片核酸分析儀和配套軟件完成該項(xiàng)檢驗(yàn)。檢測11種病原體,包括鮑曼不動(dòng)桿菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群、銅綠假單胞菌、肺炎支原體、嗜麥芽窄食單胞菌。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)以頻數(shù) (%)表示,采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行比較。P ＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 分離病原菌的種類和構(gòu)成比 在被研究的848例患者中,陰性結(jié)果426 例,檢測陽性率為49.8%。其中肺炎支原體檢出率最高,占15.0%;其次為多重感染,占10.3%。細(xì)菌感染檢出率肺炎鏈球菌最高,占9.4%;其次為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(6.4%)、流感嗜血桿菌(5.3%)。結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群和嗜麥芽窄食單胞菌未檢出,所以未納入統(tǒng)計(jì)范疇。見表1。

表1 848例呼吸道感染患兒病原學(xué)檢測結(jié)果

2.2 不同標(biāo)本來源呼吸道病原體檢測結(jié)果 將所有菌分為革蘭陽性菌、革蘭陰性菌和肺炎支原體。革蘭陽性菌包括鮑曼不動(dòng)桿菌、大腸埃希菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌;革蘭陰性菌包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。其中排除所有陰性結(jié)果及多重感染病例。

醫(yī)院感染患者分離菌株標(biāo)本來源的分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (χ2=195.666,P ＜0.001)。肺炎支原體在支氣管肺泡灌洗液中檢出率最高,而革蘭陽性菌、革蘭陰性菌均在鼻拭子中的檢出率最高。見表2。

2.3 2 組年齡段感染各類病原菌類型構(gòu)成比差異 結(jié)果顯示,嬰幼兒期、學(xué)齡期患兒感染鮑曼不動(dòng)桿菌的陽性率分別為2.1%、2.6%,2個(gè)年齡段患兒感染鮑曼不動(dòng)桿菌的情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表3。

表2 不同標(biāo)本中兒童呼吸道病原革蘭陽性菌、革蘭陰性菌和肺炎支原體的檢測結(jié)果 [株 (%)]

表3 年齡因素與感染鮑曼不動(dòng)桿菌的相關(guān)性分析 (例)

嬰幼兒期、學(xué)齡期患兒感染肺炎鏈球菌的陽性率分別為15.2%、12.8%,2個(gè)年齡段患兒感染肺炎鏈球菌的情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表4。

表4 年齡因素與感染肺炎鏈球菌的相關(guān)性分析 (例)

嬰幼兒期、學(xué)齡期患兒感染金黃色葡萄球菌的陽性率分別為2.9%、2.5%,2個(gè)年齡段患兒感染金黃色葡萄球菌的情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表5。

表5 年齡因素與感染金黃色葡萄球菌的相關(guān)性分析 (例)

嬰幼兒期、學(xué)齡期患兒感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的陽性率分別為8.3%、14.9%,2 個(gè)年齡段患兒感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表6。

嬰幼兒期、學(xué)齡期患兒感染流感嗜血桿菌的陽性率分別為8.1%、10.1%,2 個(gè)年齡段患兒感染流感嗜血桿菌的情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表7。

學(xué)齡期組患兒感染支原體的陽性率明顯高于嬰幼兒組 (37.1% 比10.8%,χ2=65.759,P ＜0.05)。見表8。

表6 年齡因素與感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的相關(guān)性分析 (例)

表7 年齡因素與感染流感嗜血桿菌的相關(guān)性分析 (例)

表8 年齡因素與支原體感染的相關(guān)性分析 (例)

2.4 季節(jié)因素對病原菌檢出率的影響 按照春季(3、4、5月)、夏季(6、7、8月)、秋季(9、10、11月)、冬季 (12、1、2 月)整理數(shù)據(jù)。結(jié)果顯示,各季節(jié)分離菌株的感染性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.049,P =0.004),病原菌的檢出率在秋季最高。見表9。

表9 季節(jié)因素與病原菌檢出率的相關(guān)性分析 [例 (%)]

3 討論

呼吸道感染是臨床常見病,是造成兒童死亡的關(guān)鍵因素。所以,對呼吸道感染的病原學(xué)檢測非常必要,可以提高呼吸道感染的治愈率。感染類型不同,其臨床表現(xiàn)也存在差異性。以下因素對細(xì)菌的病原學(xué)檢測結(jié)果構(gòu)成影響： (1)患者的不規(guī)范用藥。在呼吸道感染的治療過程中,如果患兒在系統(tǒng)治療之前已經(jīng)自行用藥,這會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。 (2)實(shí)驗(yàn)室誤差,假陰性及假陽性結(jié)果的存在。2019年,河北省兒童醫(yī)院呼吸道病原學(xué)的總檢出率為49.8%,排名前三位的病原體是肺炎支原體、肺炎鏈球菌和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌,這一結(jié)果與國內(nèi)其他醫(yī)院的報(bào)道相類似[3]。

馬慧等[4]報(bào)道,北京兒童醫(yī)院1998-2002年分離的致病菌株中,多重耐藥的葡萄球菌和腸球菌檢出率已經(jīng)超過革蘭陰性腸桿菌科細(xì)菌的檢出率。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶最早由克雷伯菌屬腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生,對產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌使用青霉素、頭孢菌素及氨曲南治療均可能無效,臨床在經(jīng)驗(yàn)用藥時(shí)應(yīng)注意。

據(jù)報(bào)道,個(gè)別醫(yī)院金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥率為100%[5],肺炎鏈球菌對頭孢呋新的耐藥率達(dá)98%,革蘭陰性菌對亞胺培南無耐藥。1998-2002年,北京兒童醫(yī)院臨床分離菌種類分布和耐藥監(jiān)測,革蘭陽性菌呈上升趨勢,耐藥的葡萄球菌和腸球菌檢出率已經(jīng)超過革蘭陰性腸桿菌[6]。

隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用,耐藥菌株的產(chǎn)生給臨床抗感染提出了新的挑戰(zhàn)[7]?？咕幬锏牟缓侠硎褂貌粌H造成細(xì)菌耐藥性的增加及變遷,給臨床治療帶來困惑,同時(shí)也增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),更為嚴(yán)重的是延誤患者的治療時(shí)機(jī),甚至危及生命。所以,應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)對抗生素的管理[8],在臨床應(yīng)用抗生素時(shí),應(yīng)及時(shí)掌握細(xì)菌的耐藥機(jī)制與變遷,應(yīng)緊密結(jié)合當(dāng)?shù)亓餍胁W(xué)資料和細(xì)菌培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)做出合理選擇[9],促進(jìn)患兒早日康復(fù)。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突