吳曉玲,張貴鋒△,李力強(qiáng),曾統(tǒng)軍,祝曉忠
(1.肇慶醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校,廣東 肇慶 526020;2.南方醫(yī)科大學(xué)附屬順德醫(yī)院,廣東 佛山 528300;3.肇慶市中醫(yī)院,廣東 肇慶 526020)
產(chǎn)后抑郁癥(Postpartum depression,PPD)是臨床一種常見的繼發(fā)性抑郁癥,一般在孕婦產(chǎn)后2周左右開始出現(xiàn)癥狀,4~6周癥狀加重,可持續(xù)3~6個(gè)月。研究發(fā)現(xiàn)國內(nèi)產(chǎn)后抑郁癥發(fā)生率為13.1%~16.3%。本病不僅會(huì)嚴(yán)重危害到產(chǎn)婦的身心健康和家庭和諧,嚴(yán)重的甚至?xí)霈F(xiàn)自殺和殺嬰行為,而且對(duì)嬰兒生長發(fā)育、心理等有不良影響[1]。由于產(chǎn)后處于哺乳期,患者及其家屬往往會(huì)顧慮藥物對(duì)嬰兒的影響,治療依從性較差。臨床觀察和文獻(xiàn)分析表明,針灸治療產(chǎn)后抑郁癥安全有效[2]。筆者課題組觀察了運(yùn)用通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕治療產(chǎn)后抑郁癥的臨床治療效果,發(fā)現(xiàn)能顯著改善患者的臨床癥狀[3],但療效機(jī)制尚不完全明確。已有研究證實(shí)抑郁癥患者的下丘腦-垂體-性腺軸(Hypothalamic-pituitary-gonadal axis,HPGA)活性下降[4];產(chǎn)后抑郁癥屬于繼發(fā)性抑郁癥范疇,有研究認(rèn)為產(chǎn)后抑郁癥患者的性激素水平紊亂[5]。因此,筆者課題組認(rèn)為通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕干預(yù)產(chǎn)后抑郁癥的療效可能與調(diào)控HPGA活性有關(guān),通過觀察該療法對(duì)產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠HPGA相關(guān)激素水平的影響,探索其療效作用機(jī)制。
SPF級(jí)健康雌性SD大鼠(南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,生產(chǎn)許可證號(hào):SYXK<粵>2016-0041)120只,3月齡,體質(zhì)量(200±20)g。在實(shí)驗(yàn)過程中,大鼠自由攝食和飲水,術(shù)前禁食。飼養(yǎng)環(huán)境維持在20~22℃之間,相對(duì)濕度保持在60%~80%之間,12 h光照和12 h黑夜循環(huán)。
1.2.1 藥品 黃體酮注射液(批號(hào):160803,廣州白云山明興制藥有限公司),苯甲酸雌二醇注射液(批號(hào):160711,廣州白云山明興制藥有限公司);鹽酸氟西汀膠囊(批號(hào):4407A,禮來蘇州制藥有限公司),每次灌胃前溶于蒸餾水配置成濃度為0.25 mg/mL的藥液。黃芪20 g、皂角(煨)10 g、藿香15 g、石菖蒲15 g、干姜5 g、小茴香15 g、肉桂5 g、雄黃2 g、丁香10 g、蘇合香5 g(肇慶醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校附屬醫(yī)院中藥房采購),粗鹽100 g(網(wǎng)絡(luò)購物平臺(tái)采購),干燥以后粉碎,過80目篩,炒制成藥鹽備用。
1.2.2 試劑 黃體生成素(Luteinising Hormone,LH)、雌二醇(Estradiol,E2)、卵泡刺激素(Follicle-stimulating Hormone,F(xiàn)SH)、孕酮(Progesterone,P)RIA檢測(cè)試劑盒(上??道噬锟萍加邢薰?;促性腺激素釋放激素(Gonadotropin-releasing hormone,GnRH)ELISA檢測(cè)試劑盒(上海江萊生物科技有限公司)。
DFM-96型放射免疫γ計(jì)數(shù)器(合肥眾成機(jī)電技術(shù)開發(fā)有限責(zé)任公司);DNM-9602G酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(北京普朗新技術(shù)有限公司);針灸毫針(規(guī)格:0.30 mm×40 mm、0.30 mm×25 mm,蘇州醫(yī)療器械廠有限公司);艾絨(李時(shí)珍蘄艾,湖北蘄春艾之寶制品有限公司)。
全部大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周,根據(jù)曠場(chǎng)(Open-Field)實(shí)驗(yàn)評(píng)分結(jié)果,篩選出合格大鼠120只,采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組20只、假手術(shù)組20只、造模組80只。造模組大鼠在確認(rèn)造模成功后,再隨機(jī)分為模型組、藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組,每組20只。在干預(yù)后的第2周末、第4周末設(shè)兩個(gè)指標(biāo)檢測(cè)時(shí)間點(diǎn),各組大鼠在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)選取10只進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。
造模組80只大鼠參照Galea報(bào)道的方法[6-7]進(jìn)行造模。對(duì)大鼠行腹腔注射麻醉后左側(cè)位固定在手術(shù)臺(tái)上,在其脊柱旁開1橫指、肋緣后1橫指的部位進(jìn)行備皮和消毒。先從大鼠腰椎沿背部正中線向下縱向切開1 cm左右的口子,將雙側(cè)子宮角拉出體腔外,再在卵巢下方、子宮連接處兩個(gè)部位分別進(jìn)行結(jié)扎,然后摘除大鼠的雙側(cè)卵巢,完成手術(shù)后將子宮體送回腹腔內(nèi)縫合好,消毒切口部位并涂慶大霉素預(yù)防感染。假手術(shù)組大鼠的手術(shù)操作步驟同上,不同的是,不摘除大鼠的雙側(cè)卵巢,僅摘取卵巢周圍的少量脂肪組織,盡量保護(hù)好卵巢??瞻捉M不予任何干預(yù)處理。采用超快速改良巴氏染色法,對(duì)摘除卵巢后的大鼠做陰道細(xì)胞學(xué)涂片檢測(cè),每日檢測(cè)1次,連續(xù)7 d,對(duì)于激素水平在逐漸恢復(fù)的大鼠剔除不用。選擇陰道細(xì)胞學(xué)涂片檢測(cè)合格的大鼠,采用注射激素的方法模擬大鼠妊娠狀態(tài)下的激素分泌水平,每天定時(shí)皮下注射黃體酮4 mg、苯甲酸雌二醇0.1 mg,連續(xù)注射16 d;從第17天起,每天皮下注射苯甲酸雌二醇0.2 mg,連續(xù)注射7 d。在第24天停止注射雌激素。空白組、假手術(shù)組大鼠皮下注射植物油,每日1次,前16 d每次0.3 mL,后7 d每次0.1 mL。
2.3.1 藥物組 鹽酸氟西汀膠囊藥液以1 mL/100 g體質(zhì)量灌胃。
2.3.2 空白組、假手術(shù)組、模型組 與藥物組大鼠等容量的蒸餾水灌胃。
2.3.3 常規(guī)針刺組 局部常規(guī)消毒,用0.25 mm×13 mm針灸針針刺大鼠百會(huì)穴、太沖穴,刺至一定深度后均勻捻轉(zhuǎn)30 s,接電針儀(G6805-Ⅰ型),連續(xù)波,頻率15 Hz,強(qiáng)度1 mA,以大鼠安靜耐受為度,每次針刺20 min。
2.3.4 實(shí)驗(yàn)組 常規(guī)消毒后用0.25 mm×13 mm針灸針針刺大鼠百會(huì)穴、大椎穴、氣海穴、關(guān)元穴,刺至一定的深度后均勻捻轉(zhuǎn)30 s,接電針儀(G6805-Ⅰ型),連續(xù)波,頻率15 Hz,強(qiáng)度1 mA,以大鼠安靜耐受為度,每次20 min;實(shí)驗(yàn)組大鼠在完成電針治療后隨即進(jìn)行隔藥鹽灸,將大鼠神闕穴周圍毛剪干凈,將配置好的藥鹽用蒸餾水濕潤后均勻鋪在大鼠神闕穴的部位,然后再將小型艾炷放在藥鹽上施灸,灸3壯,大約20 min,每日治療1次[8]。大鼠取穴參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[9]。
各組大鼠在干預(yù)開始后的第2周末、第4周末兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行標(biāo)本采集,每次10只,先進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),然后再處死取材。在處死之前,各組大鼠對(duì)應(yīng)的干預(yù)措施均持續(xù)實(shí)施。
2.4.1 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 以雙后肢跨出方格為標(biāo)準(zhǔn),大鼠穿越方格數(shù)作為水平活動(dòng)評(píng)分;以雙前肢離地1 cm為1次記分標(biāo)準(zhǔn),直立次數(shù)作為垂直活動(dòng)評(píng)分。測(cè)試全程保持室內(nèi)安靜,每只大鼠測(cè)試1次,每次觀察5 min,記錄大鼠水平活動(dòng)與垂直活動(dòng)評(píng)分。每完成1只大鼠測(cè)試擦凈紙箱后再放入下一只大鼠。
2.4.2 HPGA相關(guān)血清生化指標(biāo)檢測(cè) 血清GnRH采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè),血清FSH、LH、E2、P采用放射免疫法(RIA)檢測(cè)。各項(xiàng)血清指標(biāo)檢測(cè)方法均嚴(yán)格按照試劑盒的說明書進(jìn)行操作。
3.1.1 各組水平活動(dòng)評(píng)分比較 在干預(yù)后的第2周、第4周,假手術(shù)組大鼠評(píng)分與空白組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),模型組、藥物組、常規(guī)針刺組大鼠評(píng)分低于空白組(P<0.05);實(shí)驗(yàn)組大鼠第2周評(píng)分顯著低于空白組(P<0.05),而第4周與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第2周、4周藥物組、實(shí)驗(yàn)組大鼠評(píng)分顯著高于模型組(P<0.05),第4周常規(guī)針刺組大鼠評(píng)分顯著高于模型組(P<0.05)。干預(yù)4周后,實(shí)驗(yàn)組大鼠評(píng)分顯著高于常規(guī)針刺組(P<0.05)。見表1。
表1 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)水平活動(dòng)評(píng)分比較
3.1.2 各組垂直活動(dòng)評(píng)分比較 在干預(yù)后的第2周、第4周,假手術(shù)組大鼠評(píng)分與空白組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。模型組大鼠評(píng)分顯著低于空白組(P<0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠評(píng)分顯著高于模型組(P<0.05)。見表2。
表2 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)垂直活動(dòng)評(píng)分比較
3.2.1 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清GnRH比較 在干預(yù)后第2周、第4周,空白組、假手術(shù)組大鼠血清GnRH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH水平顯著高于模型組(P<0.05);第2周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),且均顯著低于空白組(P<0.05);第4周,實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH水平與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但顯著高于藥物組、常規(guī)針刺組(P<0.05)。見表3。
表3 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周血清GnRH變化
3.2.2 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清LH比較 干預(yù)后第2周、第4周,空白組、假手術(shù)組大鼠血清LH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清LH水平顯著低于模型組(P<0.05);第2周,常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清LH水平顯著高于空白組(P<0.05),藥物組大鼠血清LH水平與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);第4周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組、空白組大鼠血清LH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表4。
表4 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周血清LH變化
3.2.3 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清FSH比較 干預(yù)后第2周、第4周,空白組、假手術(shù)組大鼠血清FSH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清FSH水平顯著低于模型組(P<0.05);第2周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清FSH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但均顯著高于空白組(P<0.05);第4周,實(shí)驗(yàn)組、藥物組大鼠血清FSH水平與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),但顯著低于常規(guī)針刺組(P<0.05)。見表5。
表5 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周血清FSH變化
3.2.4 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清E2比較 干預(yù)后第2周、第4周,空白組、假手術(shù)組大鼠血清E2水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清E2水平顯著高于模型組(P<0.05);第2周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清E2水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),顯著低于空白組(P<0.05);第4周,實(shí)驗(yàn)組大鼠血清E2水平與空白組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,顯著高于藥物組、常規(guī)針刺組(P<0.05)。見表6。
表6 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周血清E2變化
3.2.5 各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)血清P比較 干預(yù)后第2周、第4周,空白組、假手術(shù)組大鼠血清P水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清P水平顯著低于模型組(P<0.05);第2周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清P水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清P水平顯著高于空白組(P<0.05);第4周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組、空白組大鼠血清P水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表7。
表7 各組大鼠干預(yù)后第2周、第4周血清P變化
產(chǎn)后抑郁癥動(dòng)物模型的抑郁癥狀評(píng)價(jià)一般沿用抑郁癥動(dòng)物模型的相關(guān)方法,目前公認(rèn)的有曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、糖水消耗實(shí)驗(yàn)、強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)評(píng)價(jià)方法,研究表明正常大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)水平及垂直活動(dòng)均有較高評(píng)分[10]。在本研究中,與空白組比較,造模組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的水平評(píng)分、垂直活動(dòng)評(píng)分顯著降低,假手術(shù)組無顯著差異,提示造模成功。經(jīng)過2~4周的干預(yù)以后,與模型組比較,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的水平評(píng)分、垂直活動(dòng)評(píng)分顯著提高,表明3種干預(yù)方法均能有效改善產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠的抑郁癥狀。
HPGA軸分泌的激素包括下丘腦分泌的GnRH、LH、FSH以及性腺分泌的E2、P等等。已有研究表明,抑郁癥患者HPGA軸功能紊亂,主要表現(xiàn)為 HPGA 活性下降[11]。李麗麗等[12]發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方能夠改善圍絕經(jīng)期抑郁癥模型大鼠活動(dòng)度降低情況,同時(shí)抑制血清FSH、LH的過渡分泌,使E2保持接近正常生理水平,認(rèn)為中藥復(fù)方是通過調(diào)控HPGA軸產(chǎn)生抗產(chǎn)后抑郁癥作用。Ciechanowska M等發(fā)現(xiàn),急慢性心理應(yīng)激狀態(tài)下丘腦GnRH及GnRH受體mRNA水平顯著下降[13]。吳萍等[14]發(fā)現(xiàn),圍絕經(jīng)期抑郁癥女性FSH和LH顯著高于圍絕經(jīng)期無抑郁癥女性和正常育齡期女性,E2濃度顯著低于圍絕經(jīng)期無抑郁癥女性和正常育齡期女性。高鵬等[15]發(fā)現(xiàn)產(chǎn)后抑郁癥婦女血中P水平較無產(chǎn)后抑郁癥婦女高,認(rèn)為產(chǎn)后體內(nèi)激素水平的急劇變化可能是產(chǎn)后抑郁癥發(fā)生的生物學(xué)基礎(chǔ)。
在本研究中,模型組大鼠血清GnRH、E2水平顯著低于空白組,LH、FSH、P水平顯著高于空白組,這與相關(guān)研究結(jié)果一致[12-15],提示產(chǎn)后抑郁癥可能與HPGA軸相關(guān)激素血清GnRH、LH、FSH、E2、P的代謝紊亂關(guān)系密切。經(jīng)過2~4周的干預(yù)后,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH、E2水平顯著高于模型組,血清LH、FSH、P水平顯著低于模型組,表明鹽酸氟西汀、電針百會(huì)穴及太沖穴、通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕穴都可以調(diào)控產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠HPGA軸相關(guān)激素。干預(yù)后第2周,藥物組、常規(guī)針刺組、實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH、FSH、E2、P水平無顯著差異,與模型組、空白組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明經(jīng)過2周的干預(yù)治療,產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠激素水平趨向恢復(fù)正常,但尚不能恢復(fù)到正常水平,3種干預(yù)方法作用效果相當(dāng)。干預(yù)后第4周,實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH、LH、FSH、E2、P水平與空白組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕穴能將產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠紊亂的激素水平調(diào)控至正常水平范圍內(nèi);實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH、E2水平與藥物組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)組大鼠血清GnRH、FSH、E2水平與常規(guī)針刺組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕穴對(duì)產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠激素水平的調(diào)控效果要優(yōu)于鹽酸氟西汀、電針百會(huì)穴和太沖穴,但需要較長的治療時(shí)間。
產(chǎn)后抑郁癥屬于中醫(yī)“郁證”“臟躁”等范疇,《婦人大全良方》曰:“產(chǎn)后氣血大傷,心神易浮,不耐驚恐憂悲”,因此本病主要是產(chǎn)后精血虧虛、氣血失和、陰陽失調(diào)、五臟失于濡養(yǎng)乃至五志之火內(nèi)動(dòng)擾亂神明所致?!巴ㄔ樂ā笔菑V東省名中醫(yī)、全國老中醫(yī)藥專家學(xué)術(shù)經(jīng)驗(yàn)繼承工作指導(dǎo)老師賴新生教授創(chuàng)立的一種新型針刺方法,全稱為“通督養(yǎng)神、引氣歸元針法”,賴新生教授認(rèn)為,臟腑經(jīng)絡(luò)之氣陰陽相應(yīng)、腹背之氣交互貫通,針刺治療應(yīng)當(dāng)調(diào)氣,而調(diào)氣的關(guān)鍵在于引氣歸元?!瓣幉≈侮?、陽病治陰”,陰病當(dāng)取在陽之背俞穴,陽病當(dāng)取在陰之腹募穴,如果二者兼而取之,則達(dá)到陰陽二氣貫通歸元的作用,實(shí)現(xiàn)陰平陽秘[16]。臨床研究表明,通元針法治療產(chǎn)后抑郁癥、抑郁性神經(jīng)癥療效顯著[3,17]?!蹲C治匯補(bǔ)·郁證》曰:“郁病雖多,皆因氣不周流,法當(dāng)順氣為先?!比蚊}為陰脈之海,督脈為陽脈之海,是調(diào)節(jié)全身氣血陰陽的關(guān)鍵,筆者課題組選取督脈的百會(huì)、大椎兩穴通督養(yǎng)神,選擇任脈的氣海、關(guān)元兩穴引氣歸元,四穴共同發(fā)揮調(diào)和氣血、燮理陰陽的作用。神闕穴與任脈、督脈、沖脈關(guān)系密切,沖脈、任脈、督脈一源三岐、同出胞中,研究表明神闕穴隔鹽灸對(duì)婦科疾病有良好療效[18]。為了加強(qiáng)灸神闕的效果,在藥鹽中以藿香和石菖蒲芳香化濁、行氣疏肝,以干姜、肉桂、丁香和小茴香溫補(bǔ)脾腎、疏通經(jīng)絡(luò),以煨皂角和蘇合香通絡(luò)開竅、通閉醒腦,以雄黃和黃芪溫陽化氣。運(yùn)用藥鹽灸神闕穴,能夠同時(shí)發(fā)揮了灸療、藥療、臍療的多重作用,整體上達(dá)到溫陽補(bǔ)氣、培腎固本的作用。此外,婦人產(chǎn)后多瘀多虛,隔藥鹽灸神闕穴既能芳香行氣、活血通絡(luò),又能補(bǔ)脾益腎、補(bǔ)而不滯、調(diào)暢氣血,有助于產(chǎn)后諸癥的康復(fù)。
綜上所述,鹽酸氟西汀、常規(guī)針刺、通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕穴3種治療方法都能有效改善產(chǎn)后抑郁癥模型大鼠的抑郁癥狀,對(duì)大鼠血清GnRH、LH、FSH、E2、P有顯著調(diào)控作用,但是通元針法聯(lián)合隔藥鹽灸神闕穴的效果更明顯,推測(cè)本法治療產(chǎn)后抑郁癥可能與調(diào)控HPGA軸相關(guān)激素水平相關(guān)。由于產(chǎn)后抑郁癥患者血清激素水平變化并不完全一致,相關(guān)研究的指標(biāo)結(jié)果甚至相反,需要進(jìn)一步優(yōu)化檢測(cè)指標(biāo)。