歐陽香，程虹毓，胡偉瓊，單佳鈴，王 陸，朱繼孝

( 江西中醫(yī)藥大學(xué) 1.中藥資源與民族藥研究中心，2.人文學(xué)院，江西 南昌 330004)

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)對人體的身心健康影響極為嚴重，早期常表現(xiàn)為脂肪肝(alcoholic fatty liver, AFL)，AFL可進一步加重為酒精性肝炎(alcohol hepatitis, AH)、酒精性肝纖維化(alcoholichepatic fibrosis, AHF)和酒精性肝硬化(alcoholic cirrhosis, AC)，嚴重酗酒者可誘發(fā)廣泛的肝細胞壞死甚至肝功能衰竭[1]。隨著人民生活水平日益提高，我國飲酒人群也在不斷擴大，20世紀80年代初到90年代初，北方的嗜酒人群在一般人群中的比例從0.21%升至14.30%，增長了近70倍。21世紀初，在南方及中西部省份流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果中顯示，中國飲酒人群占一般人群的比例增至30.9%～43.4%。針對酒精性肝病的治療存在多種方式，包括戒酒、營養(yǎng)支持、藥物治療、聯(lián)合治療、手術(shù)治療以及中醫(yī)治療等。藥物治療有西藥(如美他多辛)和中藥(包括復(fù)方、單味藥和中藥某些單體成分)，盡管對酒精性肝病都能起到一定的治療效果，但是目前為止針對酒精性肝病的治療并沒有明顯的特效藥[2]。

黃酮類化合物(flavonoids)，別名黃堿素，黃酮體，是一類重要的植物次生代謝產(chǎn)物，在天然植物的根莖葉及花果中普遍存在。在結(jié)構(gòu)上被定義為是以黃酮 (2-苯基色原酮) 為基本母核而衍生的一類黃色色素，主要分為二氫黃酮、黃酮、黃烷醇、二氫黃酮醇、黃酮醇、異黃酮、花青素、查耳酮以及其他酮類[3]。黃酮類化合物是一種毒副作用極小的天然抗氧化劑，具有抗氧化、抗菌、抗腫瘤等多種藥理活性，在臨床應(yīng)用方面有很大的價值。近幾年國內(nèi)外的研究發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物具有抗酒精性肝損的作用，本文通過整理國內(nèi)外文獻對酒精性肝損傷發(fā)病機制、參與酒精性肝損傷的多種發(fā)病因素和黃酮類化合物的抗酒精性肝損傷作用機制進行綜述，為抗酒精性肝損傷的藥物篩選提供一定的理論依據(jù)。

1 酒精性肝損傷的發(fā)病機制

長期大量飲酒易引發(fā)肝臟疾病，主要在于乙醇在機體內(nèi)進行氧化代謝產(chǎn)生一系列誘導(dǎo)肝損傷的級聯(lián)反應(yīng)。一方面，乙醇經(jīng)乙醇脫氫酶氧化系統(tǒng)(alcohol dehydrogenase, ADH)和乙醛脫氫酶(acetaldehyde dehydrogenase, ALDH)氧化代謝過程中會產(chǎn)生大量的活性氧自由基。另一方面，乙醇的氧化代謝反應(yīng)通過微粒體氧化代謝系統(tǒng)(microsomal ethanol oxidase system, MEOS)和過氧化物酶體中過氧化氫酶系統(tǒng)，產(chǎn)生包括超氧化陰離子在內(nèi)的活性氧自由基，導(dǎo)致活性氧自由基積累形成肝損傷?；钚匝踉谡T導(dǎo)肝損傷過程中起著關(guān)鍵性作用，因為其可對膜脂質(zhì)產(chǎn)生攻擊，進而導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，造成肝損傷；此外，乙醇的氧化代謝使得細胞內(nèi)還原型輔酶Ⅰ與氧化型輔酶Ⅰ的比例升高，這使得脂肪酸的氧化受到抑制和脂肪酸合成增加，肝臟脂肪酸積累誘導(dǎo)肝臟脂肪變性。另外，乙醇氧化代謝使腸道通透性增加，導(dǎo)致血漿內(nèi)毒素水平升高，從而激活肝臟巨噬細胞產(chǎn)生活性氧自由基、促炎細胞因子、黏附分子等，這些細胞因子可通過激活多種信號通路誘導(dǎo)酒精性肝損傷。綜上所述，酒精性肝損傷發(fā)病機制氧化應(yīng)激、脂肪酸積累、肝臟巨噬細胞的激活和多種細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等多種因素。

1.2 內(nèi)毒素和肝庫普弗細胞酒精代謝導(dǎo)致腸道通透性增加，血漿中脂多糖水平顯著升高，內(nèi)毒素LPS激活肝庫普弗細胞，釋放細胞因子介導(dǎo)肝損傷，大量臨床研究已經(jīng)證實，內(nèi)毒素介導(dǎo)肝臟庫普弗細胞活化已成為酒精性肝損傷發(fā)病機制的一種關(guān)鍵因素。正常生理狀態(tài)下只有少量的腸源性內(nèi)毒素透過腸道粘膜屏障進入門靜脈循環(huán)到肝臟，進入肝臟的少量內(nèi)毒素也可被肝臟巨噬細胞清除維持著正常的生理功能[5]。而有研究結(jié)果表明，酒精的作用改變了腸道微生物穩(wěn)態(tài)導(dǎo)致內(nèi)毒素血癥，主要表現(xiàn)在革蘭氏陰性菌在腸道過度繁殖，益生菌在數(shù)量上下降；而且酒精氧化代謝產(chǎn)物乙醛也破壞了腸粘膜屏障功能，使腸道通透性增加，腸道細菌或其產(chǎn)物與組分通過上皮細胞粘膜層到達肝臟，以此誘導(dǎo)肝臟損傷[6]。除此之外，內(nèi)毒素通過激活Kupffer細胞，產(chǎn)生受體CD14和介質(zhì)，如巨噬細胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein-2，MIP-2)或細胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1 ,ICAM-1)，其結(jié)合多形核中性粒細胞介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。并且?guī)炱崭ゼ毎€會產(chǎn)生其他介質(zhì)，如前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)或腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor-α，TNF-α)和α-羥乙基自由基引起肝細胞損傷[7]。內(nèi)毒素血癥在酒精性肝損傷的發(fā)病機制中可能起著關(guān)鍵性的作用，酒精誘導(dǎo)內(nèi)毒素血癥的一個原因是腸道失調(diào)，即腸道微生物群組成的改變。有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)腸中的粘膜相關(guān)微生物群組成在長期大量飲酒會發(fā)生改變，并且隨著乳酸桿菌、金屬鋅和益生菌(燕麥)的加入通過調(diào)節(jié)腸道微生物穩(wěn)態(tài)均可改善酒精性肝損傷，這進一步說明腸道失調(diào)對酒精性肝損傷的重要影響。此外，腸道通透性增加也有助于酒精性肝損傷的發(fā)展，作為酒精性肝損傷的發(fā)病機制的另外一種因素。

1.3 細胞凋亡與自噬細胞焦亡是近年來發(fā)現(xiàn)并證實的一種新的程序性細胞死亡方式，其特征為依賴于半胱天冬酶-1 (caspase-1)，并伴有大量促炎癥因子的釋放。caspase-1介導(dǎo)細胞凋亡的機制在于將IL-1β和IL-18從前體形式轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒祗w并分泌至細胞外，引起一系列炎癥反應(yīng)；此外，caspase-1可切割GSDMD(gasdermin D)，觸發(fā)細胞焦亡。隨著對酒精性肝損傷發(fā)病機制研究的深入，研究者發(fā)現(xiàn)細胞焦亡也是酒精性肝病發(fā)生、發(fā)展關(guān)鍵機制。因為酒精可通過增加硫氧還蛋白相互作用蛋白(thioredoxin-interactingprotein，TXNIP) 在肝臟中的表達來促進caspase-1介導(dǎo)的細胞焦亡通路，誘導(dǎo)肝臟炎癥反應(yīng)，進而導(dǎo)致肝臟的病理變化[8]。

自噬是一個吞噬自身細胞質(zhì)蛋白或細胞器并使其包被進入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程。乙醇暴露于肝臟中，經(jīng)過一系列的代謝反應(yīng)導(dǎo)致肝臟中脂質(zhì)和蛋白質(zhì)代謝發(fā)生變化。自噬受到肝臟乙醇代謝的顯著影響，乙醇代謝增強了肝細胞中自噬體的形成，卻抑制了溶酶體的功能。過高的自噬蛋白水平可增強飲酒者肝細胞中的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)的感染性，并且溶酶體功能的抑制使蛋白質(zhì)降解產(chǎn)生負面影響，增加了脂肪積累的可能性[9]。因此，HCV和酒精修飾的自噬顯然在HCV感染的消耗酒精的患者中增強病毒復(fù)制，細胞內(nèi)病毒積累和脂肪變性進展中起作用。

1.4 巨噬細胞表型變化和表觀遺傳改變飲酒可導(dǎo)致腸道通透性增加，并導(dǎo)致細菌衍生脂多糖從腸道轉(zhuǎn)移到肝臟，從而激活免疫反應(yīng)，在此過程中，巨噬細胞在酒精性肝病的發(fā)病機制中起著至關(guān)重要的作用。巨噬細胞在酒精的刺激下被激活和極化為M1和M2兩種不同的表型，被募集到損傷的肝臟組織中?；罨木奘杉毎粌H能在不同的條件下保持組織的完整性,而且可通過在不同的肝臟疾病中釋放豐富的促炎因子和趨化因子來破壞組織。如M1巨噬細胞可以分泌豐富的促炎細胞因子，如IL-6和 TNF-α，從而促進肝臟損傷；而M2巨噬細胞可合成IL-10和TGF-β等抗炎細胞因子，重塑組織損傷，加速修復(fù)過程；然而，持續(xù)的傷口愈合和未解決的肝損傷可能導(dǎo)致肝纖維化。并且有研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，慢性乙醇喂養(yǎng)可誘導(dǎo)兩個肝間質(zhì)巨噬細胞亞群的募集，在調(diào)節(jié)肝臟炎癥和組織修復(fù)中發(fā)揮不同甚至相反的作用，這也證明了酒精性肝病發(fā)生發(fā)展中巨噬細胞表型的變化起著重要的作用。因此，這就為緩解酒精性肝病提供了新的治療靶點[10]。

表觀遺傳是指DNA序列不發(fā)生變化，但基因表達卻發(fā)生了可遺傳的改變；這種改變是除了遺傳信息以外的其他可遺傳物質(zhì)發(fā)生的改變。表觀遺傳改變包括組蛋白修飾，如乙?；土姿峄淖兓NA的低甲基化和miRNAs的改變。而這些修飾可以由酒精誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激誘導(dǎo)，導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄機制的改變和基因表達異常。具體表現(xiàn)在肝臟在酒精的刺激下，組蛋白和DNA修飾發(fā)生變化，和包含組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶、組蛋白去乙?；负腿ヒ阴；冈趦?nèi)的組蛋白乙?；嚓P(guān)的酶，以及甲基化酶(如DNA甲基轉(zhuǎn)移酶)的改變[11]。迄今為止的研究表明，酒精暴露于肝臟組織中可能是通過氧化應(yīng)激，表現(xiàn)出調(diào)節(jié)乙酰化，磷酸化和甲基化的組蛋白，調(diào)節(jié)染色質(zhì)重塑和基因表達。而染色質(zhì)修飾和miRNA改變將會導(dǎo)致免疫細胞功能障礙和炎癥細胞因子的產(chǎn)生。酒精介導(dǎo)的表觀遺傳機制對于設(shè)計新的基于表觀遺傳的療法來改善ALD是至關(guān)重要的。

1.5 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑

1.5.1自然殺傷T細胞(NKT)介導(dǎo)酒精性肝損傷 自然殺傷T細胞(natural killer T cell，NKT)是重要調(diào)節(jié)因子和效應(yīng)子功能的介質(zhì)，其利用Fas和TNF-α誘導(dǎo)細胞凋亡[12]。有研究證實，過多的酒精攝入導(dǎo)致肝臟中自然殺傷T細胞增加，增強了肝細胞對細胞介導(dǎo)裂解的高度敏感性。在酒精代謝過程中，活化的自然殺傷T細胞通過涉及酒精應(yīng)激的肝細胞上Fas和TNF-α的伴隨信號的機制誘導(dǎo)嚴重的肝損傷。

1.5.2Ca2+信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 長期大量飲酒后，酒精在肝臟中的代謝產(chǎn)物乙醛除了對肝細胞直接產(chǎn)生毒性外，其還可誘導(dǎo)肝細胞內(nèi)游離Ca2+濃度發(fā)生變化。有研究發(fā)現(xiàn)酒精代謝中間產(chǎn)物乙醛處理后的肝細胞，胞內(nèi)游離Ca2+濃度隨乙醛濃度增加而升高，而線粒體跨膜電位隨乙醛濃度增加而降低，并且肝細胞發(fā)生嚴重的損傷。這也說明酒精中間代謝產(chǎn)物乙醛導(dǎo)致嚴重的肝細胞極性紊亂，誘導(dǎo)肝細胞損傷形成肝臟疾病[13]。

1.5.3IL-6/STAT3炎癥信號通路 IL-6/轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transducer and activator of transcription，STAT3)炎癥信號通路在酒精性肝病中被激活促進炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肝臟的不同程度的病理變化。有研究發(fā)現(xiàn)酒精攝入后，IL-6/STAT3信號通路得以被激活，促進炎癥反應(yīng)。其機制在于酒精的攝入后降低miR-29b的表達，miR-29b靶向作用于STAT3，通過負調(diào)控作用上調(diào)了STAT3的表達水平，激活了IL-6/STAT3炎癥信號通路，促進炎癥反應(yīng)從而加重酒精性肝損傷[14]。

1.5.4TLR4信號通路 Toll樣受體4(toll like receptor 4, TLR4) 及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑涉及到重要激酶白介素1受體相 關(guān)激酶(interleukin-1 receptor-associated kinase, IRAK)、絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和轉(zhuǎn)錄因子核因子-κB (nuclear factor kappa B, NF-κB)、TNF-α等細胞因子。而乙醇可導(dǎo)致Kupffer細胞對LPS的反應(yīng)增強，引起炎癥因子的大量產(chǎn)生;在TLR4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中, CD14表達增多，同時，IRAK以及MAPK家族成員ERK1/2和p38的活化程度及其相互間的作用增強，使重要的轉(zhuǎn)錄因子如NF-kB活化增強，最終使TNF-α等炎癥因子增多，從而造成肝臟的進一步損傷[15]。

1.5.5PERK/eIF2α通路 PERK/eIF2α信號通路參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)介導(dǎo)肝細胞凋亡過程，正常情況下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的轉(zhuǎn)錄因子PERK以無活性的狀態(tài)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶GPR78結(jié)合，ERS發(fā)生時大量未折疊蛋白或錯誤折疊蛋白質(zhì)發(fā)生堆積(即非折疊蛋白反應(yīng))，GRP78則從PERK上解離而改為與非折疊蛋白結(jié)合，引起 PERK反向自身磷酸化。磷酸化的PERK催化底物elF2α發(fā)生磷酸化，磷酸化elF2 α(pelF2α)能激活一種轉(zhuǎn)錄因子，誘導(dǎo)GRP78、GRP94等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶蛋白表達增加及caspase-12的活化,啟動細胞凋亡程序誘導(dǎo)肝細胞凋亡。有研究證實,長期攝入酒精使elF2α蛋白發(fā)生明顯磷酸化,同時PERK/elF2α通路的下游信號分子 GRP78/Bip、GRP94、caspase-12和caspase-3發(fā)生過度活化，導(dǎo)致肝細胞凋亡[16]。因此PERK/eIF2α通路在酒精性肝細胞凋亡機制中發(fā)揮著重要的作用，參與了酒精性肝病的發(fā)生發(fā)展，為后續(xù)預(yù)防治療酒精性肝病提供一定的理論依據(jù)。

2 黃酮類化合物抗酒精性肝損傷作用機制

黃酮類化合物因其具有很強的抗氧化活性，使得黃酮類化合物藥物治療酒精性肝病越來越顯現(xiàn)出它們的臨床價值。黃酮類化合物抗酒精性肝損傷的作用機制涉及抗氧化應(yīng)激、調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)的代謝、抑制肝臟炎癥反應(yīng)等方面。

在酒精誘導(dǎo)肝細胞損傷模型中，研究發(fā)現(xiàn)紫薯黃酮和黃酮類單體化合物黃芩素均可有效降低酒精等肝毒性物質(zhì)對肝細胞的毒性，其機制表現(xiàn)在不同濃度的紫薯黃酮干預(yù)后能有效增強總抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)及谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)等抗氧化酶的活性，降低氧化產(chǎn)物(H2O2)的含量，黃芩素通過誘導(dǎo)抗氧化核轉(zhuǎn)錄因子(nuclear factor erythroid-2 related factor 2, Nrf2)的轉(zhuǎn)錄激活機制起到抗氧化的作用[17]。黃酮類單體化合物三羥異黃酮也能通過抗氧化應(yīng)激對酒精性肝損傷具有預(yù)防和治療的作用，三羥異黃酮干預(yù)治療后發(fā)現(xiàn)能明顯升高GSH、SOD、ADH和ALDH等酶的活性，且能降低CYP2E1 酶的活性[18]。另外，以酒精誘導(dǎo)小鼠肝損傷模型，大量研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)槲皮素在治療酒精性肝損傷模型方面有很好的治療效果。其機制主要與誘導(dǎo)I型血紅素氧化酶(heme oxygenase-1，HO-1)間接抑制乙醇誘導(dǎo)CYP2E1的表達和活性，激活MAPK/Nrf2信號通路上調(diào)HO-1的表達；減輕溶酶體損傷、上調(diào)自噬體與溶酶體融合關(guān)鍵蛋白LAMP2A的表達來減輕酒精誘導(dǎo)的自噬抑制等方面有關(guān)[19]。并且有研究基于酒精性肝損傷模型，用木犀草素干預(yù)治療發(fā)現(xiàn)也具有顯著的治療效果，其作用機制主要表現(xiàn)在降低自由基生成，減輕脂質(zhì)過氧化，提高SOD酶活性。因此,大量研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃酮類化合物對酒精性肝損傷有著很好的治療作用，并且通過多種不同的作用機制發(fā)揮著作用。

2.2 抑制肝臟炎癥反應(yīng)肝臟炎癥反應(yīng)作為酒精性肝損傷一種常見的肝臟病理變化，它的發(fā)生通過兩種途徑誘導(dǎo)產(chǎn)生：一是由脂肪肝階段進一步發(fā)生脂質(zhì)過氧化加重為酒精性肝炎，二是通過內(nèi)毒素和氧化應(yīng)激介導(dǎo)酒精性肝炎。在肝臟炎癥反應(yīng)中，細胞因子起著關(guān)鍵性的作用，由于抗炎細胞因子和促炎細胞因子在酒精的作用下使原本二者的平衡受到破壞，偏向于促炎細胞因子的釋放。致炎細胞因子TNF-α、IL-6、IL-8等，抗炎細胞因子包括IL-10、脂連素和TGF-β等。酒精在氧化代謝過程中誘導(dǎo)產(chǎn)生的氧化應(yīng)激和內(nèi)毒素都可激活NF-κB，使促炎細胞因子(如：TNF-α)釋放介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。涉及到的機制是內(nèi)毒素誘導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以CD14介導(dǎo)的TLR4激活和隨后激活NF-κB結(jié)合活性和來自庫普弗細胞中還原的NADPH的自由基也可激活NF-κB結(jié)合活性使炎性細胞因子TNF-α含量增加和環(huán)加氧酶-2(cyclooxygenase,COX-2)活性升高。

研究發(fā)現(xiàn)，在乙醇誘導(dǎo)大鼠肝損傷模型中，柚皮素治療后能明顯降低血清天冬氨酸和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶的活性，鐵的水平，以及鐵蛋白、TNF-α、IL-6、NF-κB、COX-2、MIP(細胞間粘附因子)等蛋白的表達，明顯改善了酒精性肝炎癥狀[20]。其作用機制通過對TNF-α、IL-6、NF-κB、COX-2、MIP-2、iNOS和CD14等與炎癥相關(guān)分子和蛋白的抑制發(fā)揮其抗酒精性肝炎活性[21]。芒果苷給藥治療發(fā)現(xiàn)也有很好的抗炎作用效果，它能夠促進肝細胞修復(fù)、調(diào)節(jié)肝細胞炎癥因子TNF-α、IL-6水平和NF-kB的mRNA表達，以此起到抗炎的作用。也有研究表明兒茶素通過抑制信號通路關(guān)鍵組分NF-kB的激活，從而發(fā)揮其抗酒精性肝病的治療效果。鄭今花等[22]基于酒精性脂肪肝小鼠模型，二氫槲皮素干預(yù)后其作用機制與降低了組織中TG含量和NLRP3等炎癥相關(guān)蛋白表達，抑制了肝臟組織脂肪積累及伴有的炎癥反應(yīng)有關(guān)。另外，有研究發(fā)現(xiàn)，類黃酮類單體化合物花青素和黃酮木脂素類化合物水飛薊素均能有很好的抗炎效果，其作用機制分別與抑制促炎信號通路減輕酒精誘導(dǎo)的肝損傷和抗氧化應(yīng)激，抑制TNF-α等細胞因子和炎癥介質(zhì)的大量產(chǎn)生有關(guān)。毛橘紅總黃酮提取物干預(yù)治療可有效降低炎性細胞因子TNF-α、TGF-β1和IL-6的含量，對慢性酒精性肝損傷具有一定的保護作用。崔團等[23]基于大鼠慢性酒精性肝損傷模型，對小鼠以葛根總黃酮灌胃給藥處理，發(fā)現(xiàn)葛根總黃酮處理之后能顯著降低CD68、TNF-α、TLR2及TLR4的蛋白表達水平，因為葛根總黃酮抑制了內(nèi)毒素受體TLR4、TLR2進而抑制庫普弗細胞活化，從而發(fā)揮抗酒精性肝損傷的作用。NF-κB介導(dǎo)多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)誘導(dǎo)酒精性肝損傷，即NF-κB的激活，進一步向下游信號級聯(lián)，包括TNF-α、NO和ROS。

2.3 調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)的代謝正常生理情況下肝臟中脂肪酸的合成與代謝處于一種穩(wěn)態(tài)平衡，長期大量飲酒的情況下，乙醇代謝通過多種機制使肝臟脂肪酸大量積累形成脂肪肝。脂肪肝的特征表現(xiàn)為脂滴、甘油三酯和膽固醇的在肝臟中大量積累，其發(fā)病機制涉及到CYP2E1、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(sterol-regulatory element binding proteins，SREBPs)、過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferators-activated receptors，PPARs)和MAPK等多種相關(guān)因子。乙醇誘導(dǎo)CYP2E1表達和活性水平的增加，在底物的作用下其衍生出的ROS抑制了肝細胞的自噬作用，導(dǎo)致脂質(zhì)積累。SREBPs作為脂質(zhì)合成酶乙酰CoA羧化酶(acetyl CoA carboxylase，ACC)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase，F(xiàn)AS)表達的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控著肝臟脂質(zhì)和膽固醇的合成。 PPARs是核受體超家族成員，包括 PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三種亞型，其作用廣泛，包括調(diào)節(jié)脂質(zhì)的代謝等。其中PPARα在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝發(fā)揮著重要的作用，主要表現(xiàn)在調(diào)節(jié)脂肪酸轉(zhuǎn)運和氧化以及膽固醇的代謝。因為酒精誘導(dǎo)肝臟脂肪酸過多積累激活了PPARα，其對肝臟脂肪酸結(jié)合蛋白，過氧化物酶體脂肪酰輔酶A氧化酶等促進脂肪酸氧化的酶的表達有一定的調(diào)控作用。另外，MAPK在調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝中也起重要作用，主要表現(xiàn)在抑制脂肪酸和膽固醇合成，從而促進脂肪在肝臟中的積累。

胡成穆等[24]利用酒精性脂肪肝大鼠模型，施加豹皮樟總黃酮以探究其對AFL大鼠肝細胞脂肪變性的影響。結(jié)果顯示，豹皮樟總黃酮能明顯增加脂肪肝細胞存活率，顯著降低ALT、AST、TG以及脂肪分化相關(guān)蛋白、PPARγ mRNA和蛋白表達量。其作用機制可能是通過改善肝細胞活性、減少肝細胞內(nèi)TG生成、抑制ADRP表達及調(diào)控肝細胞PPARγ的表達,從而改善AFL大鼠肝細胞的脂肪變性。此外，王峰等[25]通過連續(xù)給藥芹菜素治療酒精性肝損傷小鼠，利用蛋白免疫印記法檢測，結(jié)果顯示可顯著上調(diào)肝組織中的PPARα/γ和肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶-1蛋白表達，下調(diào)SREBP-1c、FAS、二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶、CYP2E1和NF-κB的蛋白表達，從而能夠減輕肝臟組織的脂肪變性，其作用機制是通過改善PPAR-α介導(dǎo)的脂質(zhì)代謝通路，對酒精引起的肝臟損傷起著保護作用。儲金秀等[18]研究發(fā)現(xiàn)黃酮苷類單體化合物蘆丁能明顯降低酒精性肝損傷模型小鼠肝重指數(shù)和AST、MDA水平，增強SOD活性，其作用機制在于抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)而起到抗肝損傷的作用。

3 總結(jié)與展望

ALD嚴重影響著人類身心健康，但目前治療酒精性肝病并沒有所謂的特效藥，主要由于酒精性肝病發(fā)病機制的復(fù)雜性，大量研究結(jié)果顯示大多涉及到單個致病因素或者多個因素協(xié)同作用。參與酒精性肝損傷發(fā)生和發(fā)展的作用機制涉及到炎癥信號通路、肝細胞凋亡通路以及氧化應(yīng)激反應(yīng)等在內(nèi)的多種因素。而中藥中黃酮類化合物成分作為一種天然產(chǎn)物能有效緩解酒精性肝損傷，能通過多種機制調(diào)控酒精性肝損傷的發(fā)生和發(fā)展，起到緩解酒精性肝病的效果。來源于不同中藥的總黃酮或不同的黃酮類單體化合物其作用機制也各不相同，主要通過抗氧化應(yīng)激、抑制肝臟炎癥反應(yīng)、調(diào)控肝臟脂質(zhì)代謝等多種途徑緩解酒精性肝損傷。

雖然目前已在體內(nèi)外證實多種黃酮類化合物可以有效治療酒精性肝損傷，但大多為實驗室研究，對其毒理學(xué)研究尚未大量展開，目前也仍無有效藥物上市。因此，需加強在其安全性方面的研究，同時加快臨床前和臨床要求，爭取早日有安全有效、作用機制明確的黃酮類藥物上市。