霍天武，李亞雄，孟艷莉

[1. 丹尼斯克生物科技(上海)有限公司，上海 200050；2. 上海漢聯(lián)生物科技有限公司，上海 200072]

本測試旨在測評格利特(Glutex GS2)消毒劑對SARS綜合征冠狀病毒的殺滅效力，病毒殺滅有效性試驗按照試驗承擔(dān)單位美國微生物檢測公司建議的方案和方法進(jìn)行。

1 材料與方法

⑴病毒：SARS綜合征冠狀病毒(美國ZeptoMetrix公司)。

⑵檢測材料：美國陶氏化學(xué)公司生產(chǎn)的格利特(Glutex GS2)消毒劑(批號：RD1455S4G1)。

⑶攻擊病毒：SARS綜合征冠狀病毒(美國ZeptoMetrix公司)。

⑷受體：E6非洲綠猴腎細(xì)胞(美國ZeptoMetrix公司)。

⑸檢測產(chǎn)品中的活性成分：20%戊二醛[格利特(Glutex GS2)]。

⑹中和劑：含有0.1%氨基乙酸的胎牛血清。

⑺稀釋劑和稀釋方法：1 200 μg/kg±2.9%美國官方分析化學(xué)家協(xié)會規(guī)定的合成硬水，參照該協(xié)會規(guī)定的方法稀釋。

⑻測試用消毒劑：格利特(Glutex GS2)消毒劑由測試提請方美國陶氏化學(xué)公司直接提供，接觸時間5 min，接觸溫度21 ℃ (室溫 )。

⑼受體接種：被檢測受體接種0.2 mL的病毒類族，并干燥40 min。

⑽有機(jī)荷載量：至少5%有機(jī)荷載量的病毒體。

⑾介質(zhì)和試劑：含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI 1640試劑，含有0.1%氨基乙酸的胎牛血清，美國官方分析化學(xué)家協(xié)會規(guī)定使用的硬水，分別為100 mg/kg(±2.9%) 和 1 200 mg/kg(±2.9%)。

本測試的試驗在位于美國弗吉尼亞州斯特林市卡蓬特大道105號的美國微生物測試公司內(nèi)進(jìn)行。研究完成日期為研究室主任所簽署的報告最終出爐日期。對協(xié)議的任何變更和修正都要由研究室主任簽字備案，注明日期并與原協(xié)議一并保存。

所有測試數(shù)據(jù)、協(xié)議及其擴(kuò)展文件、測試材料記錄、最終報告以及美國微生物測試公司與測試提請方美國陶氏化學(xué)公司的來往信件將一并保存在微生物測試公司內(nèi)，或者由第三方控制機(jī)構(gòu)保存。

2 測試結(jié)果

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表1、表2和表3中列出了測試結(jié)果。為確定病毒的滴定濃度對其進(jìn)行了滴定。利用Reed-Muench法(1938)計算每毫升有50%的細(xì)胞培養(yǎng)感染劑量(CCID50)。細(xì)胞存活率控制顯示E-6非洲綠猴腎細(xì)胞的存活率以及培養(yǎng)基處于無菌狀態(tài)。細(xì)胞存活率控制過程中沒有出現(xiàn)病毒。

3 結(jié)論

依據(jù)美國的法規(guī)條款，如果在所有的稀釋濃度下病毒完全失活，則該消毒劑被認(rèn)為是通過了該病毒試驗。當(dāng)細(xì)胞毒性存在時，則消毒劑必須顯示扣除細(xì)胞毒性水平之后至少降低三個數(shù)量級。

格利特(Glutex GS2)消毒劑，500 mg/kg戊二醛溶液和1 000 mg/kg戊二醛溶液在21 ℃接觸時間為5 min條件下，均通過了SARS綜合征冠狀病毒殺滅有效性試驗。以上結(jié)論是基于本次試驗觀察而得出的。

感謝以下技術(shù)人員參與了本次研究工作：Lauren A. Blaszak和Lisa M.Lundberg