高靜靜， 汪 濤， 蔣元燁， 曹 勤

上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院 消化內(nèi)科， 上海 200062

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指在很少或沒有飲酒的情況下，超過5%的肝細(xì)胞存在脂肪變性[1]。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查[2]，全球NAFLD發(fā)病率為25.24%，影響了1/4的成年人群[3]。不同地區(qū)、不同種族的NAFLD發(fā)病率存在差異性，西方地區(qū)發(fā)病率為30%[4]，亞洲地區(qū)發(fā)病率為27.4%[5]，我國發(fā)達(dá)城市發(fā)病率約20%[6]。目前，NAFLD的發(fā)病機(jī)制尚不明確，且無特效藥物，如何診治NAFLD已成為臨床重要課題。代謝組學(xué)作為新興技術(shù)，其研究方法與中醫(yī)整體觀念一致，而中醫(yī)藥診治NAFLD具有一定的優(yōu)勢，代謝組學(xué)為中醫(yī)證候的研究提供了新的思路與方法[7]。本文主要回顧了近年來代謝組學(xué)與中醫(yī)證候在NAFLD中的應(yīng)用進(jìn)展，旨在為進(jìn)一步探索NAFLD提供新的思路與方法。

1 NAFLD代謝組學(xué)研究進(jìn)展

1.1 血清、尿液、組織代謝組學(xué)

代謝組學(xué)是對生物樣品中小分子代謝物進(jìn)行定性和定量研究的一門學(xué)科[8-9]。目前，代謝組學(xué)的研究技術(shù)主要是核磁共振譜和質(zhì)譜[10]。現(xiàn)如今，大多數(shù)可用的臨床化學(xué)測試對包括NAFLD在內(nèi)的疾病，既不敏感也不具特異性，并且傳統(tǒng)標(biāo)志物僅在重大疾病損害生物體后才會(huì)顯著增加[11]。而代謝組學(xué)可以對生物標(biāo)志物進(jìn)行全面且非侵入性的分析[12]，以發(fā)現(xiàn)疾病相關(guān)臨床生物標(biāo)志物，具有傳統(tǒng)診斷方法所不具備的潛在優(yōu)勢[7]。代謝組學(xué)的樣品類型包含尿液、血液和組織活檢樣品等[11]。尿液和血液因收集相對簡單，是代謝組學(xué)研究中常用的研究樣品[13]。

1.1.1 血清代謝組學(xué) 血清代謝組學(xué)在NAFLD臨床研究中應(yīng)用最為廣泛。Khusial等[14]研究證實(shí)，代謝組學(xué)不僅具有篩查青年人群NAFLD的潛力，還可以探索運(yùn)動(dòng)對NAFLD的影響。甘油磷脂和鞘脂的改變可能是運(yùn)動(dòng)對NAFLD患者產(chǎn)生影響的潛在機(jī)制[15]。Kalhan等[16]研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者膽汁鹽和與谷胱甘肽有關(guān)的生化物質(zhì)發(fā)生了顯著變化，確定了一組生物標(biāo)志物，可以有效區(qū)分非酒精性脂肪性肝炎(NASH)與肝硬化或者NASH與脂肪變性。這些生物標(biāo)志物也可潛在地用于追蹤對治療干預(yù)的反應(yīng)。

1.1.2 尿液代謝組學(xué) 尿液代謝組學(xué)也是在NAFLD研究中常用的方法之一，可用于探索NAFLD的疾病發(fā)展，有利于NAFLD的早期診治。Dong等[17]研究發(fā)現(xiàn)，與NAFLD患者相比，NASH患者的肝功能異常且血脂水平較高，可用于鑒別NAFLD患者是否處于NASH的病變階段，并有助于確定患者從脂肪性病變發(fā)展到NASH的分子機(jī)制。Miccheli等[18]研究發(fā)現(xiàn)，與安慰劑組相比，VSL#3治療NAFLD患兒的尿液代謝型主要特征是酪氨酸、纈氨酸、β-氨基異丁酸、假尿苷、甲基胍、2-羥基異丁酸脂水平降低，因此VSL#3治療NAFLD患兒的尿液代謝型可被視為評估治療反應(yīng)的非侵入性有效生物標(biāo)志物。

1.1.3 組織代謝組學(xué) Vinaixa等[19]研究發(fā)現(xiàn)，飲食中的膽固醇會(huì)增加肝臟中膽固醇、甘油三酸酯和油酸濃度，但也會(huì)降低多不飽和脂肪酸與單不飽和脂肪酸的比例以及肝臟中長鏈多不飽和脂肪酸的相對含量，而飲食中的膽固醇是肝脂肪變性和肝炎發(fā)展的原因。李自輝等[20]研究發(fā)現(xiàn)，茵陳蒿湯通過干預(yù)肝組織相關(guān)代謝物與腸道菌群的途徑實(shí)現(xiàn)對NAFLD的治療。

1.2 靶向代謝組學(xué)與非靶向代謝組學(xué)

根據(jù)研究目的可以將代謝組學(xué)分為靶向代謝組學(xué)和非靶向代謝組學(xué)。非靶向代謝組學(xué)是對樣品中的代謝物做一個(gè)全面的分析，分析之前不需要了解代謝組；而靶向代謝組學(xué)是分析樣品中特定的代謝物，具有偏向性。相比之下，靶向代謝組學(xué)比非靶向代謝組學(xué)具有更高的靈敏度和選擇性，但是靶向代謝組學(xué)只能對有限的幾個(gè)代謝物或者幾種代謝物進(jìn)行分析，不具有全面性的特點(diǎn)[21-22]。

1.2.1 靶向代謝組學(xué) Feldman等[23]研究發(fā)現(xiàn)，與NAFLD肥胖者相比，非NAFLD肥胖者具有完整的葡萄糖穩(wěn)態(tài)、較低的促炎細(xì)胞因子水平以及更高的脂聯(lián)素和瘦素濃度。Papandreou等[24]研究表明，脂質(zhì)生物合成和血清轉(zhuǎn)運(yùn)的重排可能預(yù)示著NAFLD的易感性。

1.2.2 非靶向代謝組學(xué) Xu等[25]在30 d高脂蔗糖飲食誘導(dǎo)的NAFLD大鼠中發(fā)現(xiàn)，槲皮素通過調(diào)節(jié)脂肪酸相關(guān)代謝物(腎上腺酸等)、炎癥相關(guān)代謝物(花生四烯酸等)和氧化應(yīng)激相關(guān)代謝物發(fā)揮護(hù)肝作用。Zhu等[26]研究發(fā)現(xiàn)，菊苣多糖在NAFLD的發(fā)生中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。

1.3 脂質(zhì)代謝組學(xué) 脂質(zhì)代謝組學(xué)作為代謝組學(xué)的一個(gè)重要分支，是近年來的研究熱點(diǎn)，其旨在全面分析生物系統(tǒng)中的脂質(zhì)[27]。最近研究[28]發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者與健康人群的脂質(zhì)代謝特征存在顯著差異，并且對NAFLD的血清脂質(zhì)組學(xué)分析有助于進(jìn)一步闡明NAFLD患者的脂質(zhì)代謝特征。Feng等[29]研究顯示，植物甾醇可以有效預(yù)防西方高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD。脂滴在作為脂毒性二酰基甘油和神經(jīng)酰胺的儲(chǔ)存庫方面發(fā)揮了重要作用[30]，從而證明脂質(zhì)代謝組學(xué)是分析脂毒素亞細(xì)胞動(dòng)力學(xué)的有價(jià)值的工具。

2 NAFLD中醫(yī)證候研究進(jìn)展

證候是疾病在某個(gè)階段病理變化的抽象概括，以更深入、更全面的方式揭示疾病的實(shí)質(zhì)[31]。顧立梅等[32]研究發(fā)現(xiàn)，249例NAFLD患者的中醫(yī)證型主要分為濕熱蘊(yùn)結(jié)型、肝郁脾虛型、濕濁內(nèi)停型、脾腎兩虛型、痰瘀互結(jié)型五大類，其中濕濁內(nèi)停型占比最高，該型NAFLD患者也最容易出現(xiàn)甘油三酯水平升高的情況，而脾腎兩虛型占比最低。李志國等[33]通過整理NAFLD相關(guān)的國內(nèi)外中醫(yī)藥文獻(xiàn)，總結(jié)了出現(xiàn)頻次最高的5個(gè)證型，依次為痰結(jié)互瘀證、濕熱內(nèi)蘊(yùn)證、肝郁脾虛證、痰濕內(nèi)阻證、肝腎不足證。

3 NAFLD代謝組學(xué)與中醫(yī)證候研究進(jìn)展

3.1 臨床研究 代謝組學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展有利于臨床上NAFLD中醫(yī)證候的區(qū)分。馬欣等[34]運(yùn)用中醫(yī)證候代謝組學(xué)方法進(jìn)行的一項(xiàng)研究顯示，肝郁脾虛證和濕熱內(nèi)蘊(yùn)證NAFLD患者存在氨基酸類、脂類、糖類等11種代謝物的差異，表明不同證候的物質(zhì)基礎(chǔ)具有差異性。Dai等[35]發(fā)現(xiàn)，慢性乙型肝炎和NAFLD患者的尿液及血清代謝譜均顯示濕熱證與非濕熱證之間存在明顯差異，但在慢性乙型肝炎和NAFLD濕熱證患者中的代謝譜存在共性。

3.2 基礎(chǔ)研究 代謝組學(xué)技術(shù)的出現(xiàn)為探索NAFLD中醫(yī)證候的本質(zhì)提供了新方法。關(guān)偉等[36]探討了逍遙丸對NAFLD肝郁脾虛證大鼠的治療作用機(jī)制，發(fā)現(xiàn)逍遙丸是通過調(diào)節(jié)糖類、氨基酸和脂質(zhì)發(fā)揮作用。李若瑜等[37]在肝郁脾虛證型NAFLD大鼠的尿液中發(fā)現(xiàn)了26種代謝產(chǎn)物，其中肝郁脾虛證型組與對非肝郁脾虛證型組的肌酐、乙酸等12種代謝產(chǎn)物具有差異性。

4 小結(jié)

中醫(yī)學(xué)在分析疾病時(shí)，通過司外揣內(nèi)的方法，即觀察患者舌象、脈象、官竅等外在病理變化來推測人體五臟六腑的病理變化，也就是外界邪氣所導(dǎo)致的人體局部病理變化會(huì)引起人體的整體病理變化。代謝組學(xué)是對生物體全面且非侵入的分析，可以整體反映外界環(huán)境變化引起的生物體內(nèi)代謝物變化。綜上所述，代謝組學(xué)整體分析的特點(diǎn)與中醫(yī)整體觀念具有相似性。因此，運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)探索臨床中NAFLD不同中醫(yī)證候的標(biāo)志物，可以彌補(bǔ)現(xiàn)代科技理論與技術(shù)支持上的中醫(yī)認(rèn)識(shí)，推動(dòng)中醫(yī)學(xué)發(fā)展。

作者貢獻(xiàn)聲明：高靜靜負(fù)責(zé)撰寫論文、修改論文；蔣元燁、汪濤指導(dǎo)撰寫文章；曹勤、蔣元燁負(fù)責(zé)擬定寫作思路并最后定稿。