陳詩琦，毛日成，張繼明

復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院感染科，上海 200040

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)是一種小型DNA病毒。全世界約有2.4億慢性HBV感染者，每年因各種嚴(yán)重的肝病〔包括肝硬化、肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)和肝功能衰竭等〕導(dǎo)致的死亡數(shù)達(dá) 686 000 人[1-2]。目前僅有兩類藥物被批準(zhǔn)用于慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)的治療，即核苷(酸)類似物(NAs)和聚乙二醇干擾素-α(PEG-IFN-α)。前一類藥物通過抑制HBV聚合酶的活性，干擾前基因組RNA(pgRNA)到病毒DNA的反轉(zhuǎn)錄過程。NAs可以抑制HBV DNA的合成，但對于消除共價閉合環(huán)狀DNA (covalently closed circular DNA，cccDNA)和鈍化免疫反應(yīng)無效。后一類藥物PEG-IFN-α雖然影響病毒復(fù)制的多個步驟，但其療效適中[3]，且藥物耐受性較差。目前CHB功能性治愈的標(biāo)準(zhǔn)是：血清乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)和HBV DNA持續(xù)檢測不到，乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)轉(zhuǎn)陰，伴或者不伴HBsAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換，肝臟炎癥緩解和組織病理學(xué)改善[4]。然而長期NAs治療雖可以降低HBsAg水平，但HBsAg陰轉(zhuǎn)率僅為0～3%，PEG-IFNα 單藥治療的HBsAg陰轉(zhuǎn)率稍高，約為3%～7%。因此，需要新的治療方法來達(dá)到CHB的功能性治愈。

HBV核心蛋白是HBV核衣殼的組成部分，具有重要的生物學(xué)特性和功能，且在T細(xì)胞和B細(xì)胞水平上，HBV核心蛋白的抗原性較HBeAg的更為重要。因此HBV核心蛋白已逐漸成為抗HBV治療的新的干預(yù)目標(biāo)。本文針對HBV核心蛋白的結(jié)構(gòu)、功能，結(jié)合HBV核心蛋白變構(gòu)調(diào)節(jié)劑的類型和功能等方面，對近年來靶向HBV核心蛋白治療CHB的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述。

1 HBV核心蛋白的結(jié)構(gòu)

HBV核心蛋白由183個氨基酸殘基構(gòu)成，分子量約為 21 000。在HBV復(fù)制期間，mRNA從HBVC基因開始轉(zhuǎn)錄，該基因位于HBV的開放閱讀框上。翻譯從C基因的第2個密碼子AUG開始，起始149個氨基酸殘基形成富含α螺旋的裝配結(jié)構(gòu)域，也稱為球狀N末端結(jié)構(gòu)域(N-terminal domain，NTD)；而末端的34個氨基酸殘基形成精氨酸C末端結(jié)構(gòu)域[5](C-terminal domain，CTD)。HBV核心蛋白單體經(jīng)折疊和穩(wěn)定化后，形成具有四螺旋束的同型二聚體[3,6]，最終組裝為20面體的核衣殼。

2 HBV核心蛋白的功能

2.1 核衣殼的組裝

HBV核心蛋白最主要的功能是組裝HBV核衣殼。每個二聚體通過弱疏水作用與4個相鄰亞基結(jié)合[7]，最終組裝成的核衣殼為20面體。組裝成的核衣殼分為兩種類型：多數(shù)是由240個HBV核心蛋白(即120個同型二聚體)組裝而成；少數(shù)核衣殼的尺寸較小，含有180個HBV核心蛋白(即90個同型二聚體)。在乙型肝炎患者體內(nèi)，這兩種顆粒均存在，其中體積稍大的顆粒占多數(shù)。NTD對于同型二聚體之間的組裝連接是必需的，而即使從HBV核心蛋白中刪除CTD，核衣殼組裝也不會受到影響[8]。雖然核衣殼組裝不需要CTD，但后者仍然涉及許多其他功能。

2.2 pgRNA的包裝和逆轉(zhuǎn)錄

由超螺旋的cccDNA分子轉(zhuǎn)錄的pgRNA離開宿主細(xì)胞核并在細(xì)胞質(zhì)中結(jié)合反轉(zhuǎn)錄酶，最后包裝到核衣殼中，即衣殼化。核衣殼內(nèi)HBV核心蛋白的CTD對于pgRNA衣殼化是必需的。體外研究表明，缺乏CTD的HBV核心蛋白不會包裹pgRNA[9]。pgRNA反轉(zhuǎn)錄為rcDNA包含多個步驟：模板轉(zhuǎn)換、引物易位和DNA延伸。這些步驟均發(fā)生于衣殼內(nèi)。HBV核心蛋白上的CTD參與rcDNA的合成[10]，當(dāng)這種富含精氨酸的結(jié)構(gòu)域CTD發(fā)生突變時，rcDNA不能合成。

2.3 病毒顆粒的形成和分泌

成熟的核衣殼與定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)后、高爾基復(fù)合體前腔的HBsAg結(jié)合后，形成完整的病毒顆粒從核糖體釋放出來[11]。HBV核心蛋白負(fù)責(zé)選擇成熟的核衣殼，即含有rcDNA包膜的核衣殼。

2.4 cccDNA的擴(kuò)增和調(diào)節(jié)

rcDNA也可轉(zhuǎn)移回宿主細(xì)胞核進(jìn)行再循環(huán)，以補充cccDNA庫。從核衣殼釋放的rcDNA進(jìn)入宿主細(xì)胞核，在DNA聚合酶的作用下，轉(zhuǎn)化為cccDNA。除了幫助rcDNA向宿主細(xì)胞核的轉(zhuǎn)運外，核衣殼在調(diào)節(jié)cccDNA中起著額外的作用。HBV核心蛋白也是cccDNA微染色體的一個組成部分[12]，可通過表觀遺傳機(jī)制對cccDNA的活性進(jìn)行調(diào)節(jié)[13]。HBV核心蛋白可以改變cccDNA-組蛋白復(fù)合物的核小體間距，已有體內(nèi)和體外研究表明，這與核小體數(shù)量的變化相關(guān)[12,14]。另一種調(diào)節(jié)機(jī)制是HBV核心蛋白可誘導(dǎo)cccDNA中CpG島2的低甲基化，該區(qū)域甲基化如增強(qiáng)將導(dǎo)致cccDNA活性降低[15]。染色質(zhì)免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation assay, ChIP試驗)顯示，HBV核心蛋白優(yōu)先與該區(qū)域結(jié)合。當(dāng)HBV核心蛋白與cccDNA中的CpG島2結(jié)合時，它是低甲基化的，從而導(dǎo)致cccDNA的活性增強(qiáng)，轉(zhuǎn)錄增加[13]。

2.5 與宿主免疫反應(yīng)的相互作用

除了通過上述機(jī)制增強(qiáng)cccDNA轉(zhuǎn)錄外，HBV核心蛋白還參與IFN-α介導(dǎo)的cccDNA的破壞[16]。IFN-α可以激活一種核胞苷脫氨酶APOBEC3A，APOBEC3A與cccDNA結(jié)合的HBV核心蛋白直接相互作用，可使cccDNA易于被核酸酶降解。此外，HBV核心蛋白與干擾素刺激基因(interferon-stimulated genes，ISGs)之間的相互作用也參與其中。在一些細(xì)胞系研究中，已發(fā)現(xiàn)HBV核心蛋白抑制雙鏈DNA介導(dǎo)的IFN效應(yīng)[17]。這種抑制的先決條件是HBV核心蛋白的核定位可抑制ISGs的轉(zhuǎn)錄[18]。HBV核心蛋白還與腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)相互作用，其結(jié)果與HBV感染的肝細(xì)胞死亡有關(guān)。過表達(dá)的HBV核心蛋白還可降低TRAIL誘導(dǎo)的人肝癌細(xì)胞凋亡[19]。HBV核心蛋白同時也是B細(xì)胞、T輔助細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(cytotoxic lymphocyte，CTL)免疫介導(dǎo)的病毒消除的靶點[20]。CTL和T細(xì)胞表位在NTD和CTD上均可表達(dá)，而B細(xì)胞表位主要在NTD上表達(dá)。研究已顯示這些表位中的突變會影響宿主免疫應(yīng)答[21, 22]。CTD的CTL表位磷酸化位點的突變與肝纖維化相關(guān)[23]。HBV核心蛋白通過與宿主免疫因子相互作用對病毒活性和肝細(xì)胞破壞發(fā)揮復(fù)雜的調(diào)節(jié)作用。

3 核心蛋白變構(gòu)調(diào)節(jié)劑(CpAMs)

核心蛋白涉及HBV復(fù)制的多個步驟，是高度保守的病毒蛋白，由于它沒有同源物，因此是具有病毒特異性的良好治療靶標(biāo)。CpAMs是通過變構(gòu)機(jī)制干擾核衣殼組裝的小分子，可以有效地降低病毒載量和病毒抗原。從作用機(jī)制上進(jìn)行分類，CpAMs可以分為兩類：Ⅰ類CpAMs，包括氨磺酰苯甲酰胺(SBAs)、苯丙烯酰胺[24](PPAs)、吡唑基-噻唑(PT)、乙二酰胺-吡咯烷(GPA)和二苯并-硫氮雜-2-酮(DPT)等，可誘導(dǎo)形態(tài)完整空核衣殼的組裝；Ⅱ類CpAMs，包括雜芳基嘧啶[24](HAPs)，可引起異常核衣殼的形成。在迄今被篩選分類的CpAMs中，只有HAPs屬于Ⅱ類CpAMs。

3.1 甲磺酸莫非賽定(GLS4)

GLS4是由我國廣東東陽光藥業(yè)有限公司自主研發(fā)的新一代二氫嘧啶類藥物，其作用機(jī)制是干擾HBV核衣殼的組裝，可呈劑量依賴性地減少病毒核衣殼的正確組裝，加速異常核衣殼形成，使病毒核衣殼和核心蛋白二聚體的量均減少，從而抑制HBV的復(fù)制及成熟病毒顆粒的產(chǎn)生。

研究表明，GLS4不僅可以高效阻斷核衣殼的組裝過程，對于已組裝完成的核衣殼同樣具有破壞作用，且可對包含雙鏈DNA的成熟核衣殼特異性地進(jìn)行降解[25]。冷凍電鏡觀察提示，GLS4對核衣殼的降解無須宿主細(xì)胞蛋白降解系統(tǒng)的參與[25]。在基于HepG2-NTCP細(xì)胞的HBV感染模型中，GLS4預(yù)處理可高效阻斷HBV感染后cccDNA的從頭合成及后續(xù)的病毒抗原表達(dá)，而對照藥物恩替卡韋則無此活性。

GLS4的臨床前體內(nèi)、外實驗結(jié)果均表明，其抗病毒效果明顯優(yōu)于拉米夫定，且對阿德福韋酯耐藥株(rtA181T/V、rtN236T)、拉米夫定耐藥株(rtM204I、rtM204I+V173L)、替比夫定耐藥株(rtM204I、rtL180M+M204V)、恩替卡韋耐藥株(rtM204I+S202G、rtM204I+S202G+M250V)均有明顯抑制作用[26]。

GLS4目前已完成單劑量遞增、連續(xù)給藥劑量遞增、食物對藥代動力學(xué)的影響3項Ⅰ期臨床試驗。安全性和藥代動力學(xué)研究數(shù)據(jù)表明，GLS4在很大的給藥劑量范圍內(nèi)均有良好的安全性和耐受性，口服GLS4可達(dá)到有效藥物濃度。Ⅰ期臨床試驗觀察到的不良事件種類、發(fā)生率和嚴(yán)重程度在GLS4組和安慰劑組相似，且所有不良事件均為輕度，未經(jīng)處理后均恢復(fù)正?；蚋纳芠26]。沒有受試者因不良事件而提前終止試驗。

GLS4的Ⅱa期臨床試驗表明其對于HBeAg陽性和陰性患者的HBV DNA復(fù)制均有明顯的抑制作用，能顯著降低血清HBcAg和HBV RNA水平[27]。GLS4在CHB患者中耐受良好，大部分不良事件均較輕，且無劑量限制毒性。

3.2 ABI-H類藥物

ABI-H類藥物是美國Assembly公司在研的新型CpAMs，包括一代藥物ABI-H0731和二代藥物ABI-H2158。

2017年亞太肝臟研究學(xué)會(The Asian Pacific Association for the Study of the Liver, APASL)上首次公布了ABI-H0731的Ⅰa期臨床研究數(shù)據(jù)，Ⅰa期臨床研究主要評估了ABI-H0731在健康志愿者中的安全性、耐受性和藥代動力學(xué)[28]。隨后，2018年美國肝病學(xué)會(American Association for the Study of Liver Diseases, AASLD)的年會上報告了該藥Ⅰb期臨床試驗的最終結(jié)果，研究主要評估該藥在CHB患者中的安全性、藥代動力學(xué)和藥效學(xué)[29]?？傮w而言，ABI-H0731在健康志愿者和CHB患者中的耐受性良好，沒有嚴(yán)重的不良反應(yīng)，臨床沒有顯著的藥物相關(guān)依賴。因此，研究人員認(rèn)為，ABI-H0731是一種安全且耐受良好的CpAMs，具有劑量依賴性抗病毒作用，劑量范圍為每日 100～400 mg。

在2019年歐洲肝病學(xué)會(The European Association for the Study of the Liver, EASL)年會上，研究者報告了ABI-H0731的Ⅱa期臨床試驗結(jié)果[30]。在Ⅱa期臨床試驗中，將受試者分為2組進(jìn)行研究，201組研究招募了47例HBeAg陽性患者和26例陰性患者，已提前使用NAs治療；202組研究招募了25例HBeAg陽性初治患者，以恩替卡韋+ABI-H0731∶恩替卡韋+安慰劑=1∶1比例隨機(jī)分配。研究過程中，受試者耐受狀態(tài)良好，不良事件一般為輕度或中度。201組研究中，第12周時ABI-H0731+NAs組HBV RNA水平下降2.6log10IU/ml，安慰劑+NAs組HBV RNA水平下降0.2log10IU/ml。202組研究中，第12周時恩替卡韋+ ABI-H0731組HBV DNA/RNA水平降低了4.5/2.6log10IU/ml，恩替卡韋+安慰劑組HBV DNA/RNA水平降低3.2/0.4log10IU/ml。受試者血清HBeAg和HBsAg水平均有所下降，但在早期階段尚且不能得出有意義的結(jié)論，需后續(xù)延長用藥時間進(jìn)一步觀察。ABI-H0731+NAs治療耐受性良好，并在治療的早期即顯示出了抗病毒療效以及潛在的抗病毒益處，包括HBV RNA的減少——這是單獨使用NAs治療時未見到的。

ABI-H2158是Assembly公司在研的二代CpAMs。在2019年EASL上，研究者首次報道了ABI-H2158的Ⅰa期臨床試驗結(jié)果，證實其耐受性良好，治療期間出現(xiàn)的不良反應(yīng)均為輕度[31]。藥代動力學(xué)結(jié)果表明ABI-H2158口服給藥可被快速吸收，消除半衰期約為10～18小時。預(yù)計其將進(jìn)入 Ⅰb 期臨床研究。

3.3 AB類藥物

AB類藥物是加拿大Arbutus公司在研的CpAMs，包括一代藥物AB-423和二代藥物AB-506。

2016年的EASL上首次報告了針對AB-423的研究，該研究認(rèn)為AB-423是一種很有前途的藥物，在細(xì)胞層面上可以有效抑制HBV的復(fù)制。在HBV感染小鼠模型中聯(lián)合使用恩替卡韋具有有效抑制HBV復(fù)制的作用[32]。

2016年AASLD上報告[33, 34]了AB-423與其他抗病毒藥物的聯(lián)合抗病毒療效。研究者發(fā)現(xiàn)，在HepAD38細(xì)胞系中， AB-423和第2代siRNA藥物ARB-1740聯(lián)合使用具有協(xié)同抗rcDNA活性[35]。在高壓尾靜脈注射小鼠模型和慢性感染人源化肝細(xì)胞小鼠模型中，這種雙靶點作用的聯(lián)合用藥使得其抑制HBV復(fù)制的能力更強(qiáng)。

AB-506是Arbutus公司的在研的二代CpAMs。 2018年EASL上報告了AB-506與NAs或ARB-1467聯(lián)合應(yīng)用的體外雙重抗病毒效果[36]。在高壓尾靜脈注射小鼠模型中，AB-506+AB-452(HBV RNA去穩(wěn)定劑)，AB-506+TDF和AB-452+TDF的雙重組合表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抗病毒活性，其下調(diào)血清HBV DNA的平均值分別為1.4log10IU/ml、1.9log10IU/ml和2.2log10IU/ml。同時，3組藥物聯(lián)合使用，即AB-506+AB-452+TDF，降低血清HBV DNA的能力更強(qiáng)，血清HBV DNA下降約為2.8log10IU/ml。所有AB-506和AB-452治療組均顯示肝臟HBV DNA減少，TDF單藥組觀察到的肝臟HBV DNA減少程度相對較少。AB-506與NAs或ARB-1467的體外雙重聯(lián)合用藥在降低HBV rcDNA和HBsAg水平上也有累積至中度協(xié)同作用，但對細(xì)胞活力則沒有顯著影響。

以上臨床研究數(shù)據(jù)表明，這些藥物在聯(lián)合使用時具有協(xié)同的體外和體內(nèi)抗病毒活性，并且可能用于將來的聯(lián)合治療方案中。

3.4 RO7049389(RG7907)

RO7049389是一種Ⅱ類小分子CpAMs，它可通過誘導(dǎo)異常HBV核心聚集體的形成，導(dǎo)致有缺陷的衣殼組裝，從而抑制HBV復(fù)制。

在2018年EASL上，研究者報告了RO7049389的單遞增劑量(single ascending dose，SAD)組(5個劑量組，150～2 000 mg)和多遞增劑量(multiple ascending dose，MAD)組(5個劑量組， 200～800 mg，每日2次)在健康志愿者中的安全性和藥代動力學(xué)研究的結(jié)果[37]。在整個給藥劑量范圍內(nèi)，RO7049389可以被迅速吸收并從血漿清除，極少產(chǎn)生累積。健康志愿者對于RO7049389的耐受性良好，極少有不良事件發(fā)生。此外，對6名CHB患者給予藥物200 mg, 每日2次，口服28 d，可觀察到受試者HBV DNA從給藥前水平開始穩(wěn)定地持續(xù)下降，中位數(shù)(最大)下降為2.7(3.4)log10IU/ml，3/6例患者的HBV DNA水平低于檢測下限。在整個治療過程中，沒有觀察到病毒學(xué)反彈。

在2019年EASL上，研究者報告了RO7049389針對CHB患者在不同給藥劑量條件下的抗病毒效果[38]，3組隊列分別為：200 mg、400 mg和600 mg，每日給藥2次，給藥時間28 d。所有隊列均顯示出HBV DNA和HBV RNA顯著下降，給藥期間HBsAg或HBeAg水平?jīng)]有顯著變化，CHB患者對于RO7049389耐受性良好。預(yù)計下一步會將該藥與其他抗病毒藥物聯(lián)合使用，并進(jìn)一步評估聯(lián)合用藥的抗病毒效果。

3.5 JNJ類藥物

美國Janssen公司在研的CpAMs主要為JNJ-64530440(JNJ-0440)和JNJ-56136379(JNJ-6379)。

在2018年AASLD上，研究人員首次報道了JNJ-0440的體外抗病毒活性和作用方式[39,40]。JNJ-0440通過誘導(dǎo)形成空的但形態(tài)完整的病毒核衣殼來抑制HBV的復(fù)制。體外實驗證實JNJ-0440以劑量依賴性的方式阻斷PHHs中cccDNA的從頭合成，降低細(xì)胞培養(yǎng)上清液中HBeAg和HBsAg的水平。此外JNJ-0440的藥物安全性、耐受性和藥代動力學(xué)實驗均已在Ⅰ期臨床研究中完成評估(NCT03439488)，沒有因發(fā)生不良事件而終止研究。在2019年EASL上公布的Ⅰ期臨床研究數(shù)據(jù)顯示，JNJ-0440的耐受性和安全性良好。目前該藥正在CHB患者中進(jìn)行療效評估[41]。

JNJ-6379首項人體臨床研究(NCT02662712)的Ⅰa期研究結(jié)果提示該藥在健康受試者中安全性和耐受性良好。在2018年AASLD上，研究者公布了該項研究的Ⅰb期臨床研究數(shù)據(jù)，即多劑量JNJ-6379 用于CHB患者治療的安全性、藥代動力學(xué)和抗病毒活性研究[42]。研究納入了初治、無肝硬化的HBeAg陽性或陰性CHB患者，隨機(jī)分配至JNJ-6379治療組或安慰劑治療組28 d，隨訪8周。4種JNJ-6379治療組的用藥劑量分別為每日25 mg、75 mg、150 mg、250 mg。整個治療周期中，JNJ-6379安全性和耐受性良好，所有劑量組均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗HBV活性。

在2018年全球肝炎峰會(Global Hepatitis Summit 2018)上公布的部分Ⅱa期臨床研究結(jié)果顯示，使用JNJ-6379后的第29天，在所有治療組中均觀察到HBV DNA和HBV RNA從基線顯著下降，但沒有觀察到HBsAg的顯著變化，故需延長用藥時間來進(jìn)一步觀察。在2019年APASL上公布的結(jié)果提示JNJ-6379耐受性良好，在整個劑量范圍內(nèi)(25 mg、75 mg、150 mg、250 mg)產(chǎn)生相似的藥代動力學(xué)[43]。在所有劑量中，每周接受75mg劑量在亞洲和非亞洲的CHB患者中抗病毒效果相當(dāng)。這些數(shù)據(jù)將支持其在歐洲和亞洲的更大隊列中進(jìn)一步評估相同劑量的JNJ-6379±NAs的抗病毒效果(NCT03361956)。

3.6 其他CpAMs

除上述CpAMs外，還有包括中國齊魯藥業(yè)研發(fā)的QL-0A6a。細(xì)胞實驗的研究結(jié)果提示，低濃度的QL-0A6a可干擾HBV核衣殼的裝配[44]。QL-0A6a 對不同基因型的HBV均有抑制作用，與NAs聯(lián)合使用時，具有協(xié)同作用。QL-0A6a對NAs耐藥的突變株也具有抗病毒效果。QL-007也是齊魯藥業(yè)在研的CpAMs，該藥目前已進(jìn)入Ⅰ期臨床研究。

GLP-26是美國Emory University在研的CpAMs，2018年EASL上關(guān)于GLP-26的臨床前研究顯示其具有良好的抗病毒效果，與現(xiàn)有抗病毒藥物的聯(lián)合用藥具有協(xié)同作用。GLP-26目前仍處于臨床前研究階段[45]。

EP-027367是美國Enanta公司在研的CpAMs。2019年EASL公布的研究結(jié)果顯示，EP-027367 僅需亞微摩爾的劑量即可抑制cccDNA的從頭合成。該藥目前仍處于臨床前研究階段。

4 CpAMs的應(yīng)用和展望

目前臨床應(yīng)用的抗HBV藥物很少能達(dá)到功能性治愈。新的治療方案，應(yīng)該針對病毒生命周期的多個步驟、多個靶點，且應(yīng)該在無毒濃度下抑制HBV復(fù)制。核心蛋白變構(gòu)調(diào)節(jié)劑作為新型的抗病毒藥物，其抑制HBV作用顯著，耐受性好，安全性高，可作為新的乙型肝炎治療用藥。此外CpAMs可能使得預(yù)先形成的衣殼不穩(wěn)定，因此可用于血液制品以減少HBV傳播的風(fēng)險[46]。表1總結(jié)了目前正在研發(fā)的CpAMs關(guān)鍵信息。

盡管針對慢性HBV感染有各種可供選擇的治療手段，但沒有一種是完全令人滿意的。目前有5種被批準(zhǔn)用于治療慢性HBV感染的NAs：拉米夫定、替比夫定、恩替卡韋、阿德福韋和替諾福韋[47]。它們抑制HBV的反轉(zhuǎn)錄，可以將血液中病毒含量降低至不可檢測的水平。然而，NAs單一療法很少能夠根除病毒[48]；且由于頻發(fā)的耐藥性問題，NAs的臨床應(yīng)用也受到限制。而PEG-IFNα雖然具有無耐藥性、免疫刺激和直接抗病毒等特性，但僅在1/3的患者中有效[4]。由于CHB的難治愈性問題，近些年國內(nèi)外均對CHB的治愈概念進(jìn)行了不少探討以期逐步實現(xiàn)徹底治愈的目標(biāo)。在近些年的CHB臨床治愈的專家共識中，也對HBsAg的陰轉(zhuǎn)甚至出現(xiàn)抗-HBs陽轉(zhuǎn)提出了要求[4]，這是現(xiàn)有的臨床治療藥物所無法達(dá)到的標(biāo)準(zhǔn)。目前在研藥物的臨床試驗檢測過程中，多將HBsAg作為監(jiān)測效用的生物標(biāo)志物之一，代表藥物有RNAi、CpAMs等。

表1 臨床試驗階段中的CpAMs

CpAMs代表著一種新型的抗病毒藥物，與以往的抗病毒藥物形成鮮明的對比。如目前在對于CpAMs的研究中，暫時未發(fā)現(xiàn)藥物的毒性效應(yīng)；在藥物治療期間，也未出現(xiàn)病毒學(xué)反彈；對于NAs產(chǎn)生耐藥性的細(xì)胞株，CpAMs也能產(chǎn)生抗病毒效應(yīng)。

CpAMs作為一種新型抗病毒藥物，因其作用靶點不同于NAs和PEG-IFN-α，故聯(lián)合應(yīng)用時具有協(xié)同作用，抗病毒活性增強(qiáng)，抗-HBs陽轉(zhuǎn)，患者在隨訪期間亦未出現(xiàn)病毒學(xué)反彈，有望達(dá)到功能性治愈，這為CHB的治療提供了新的治療方向，有望造福更多的CHB患者。