楊黎娜 姚雪靜

Trop-2是一種以TACSTD2基因編碼表達的細胞表面糖蛋白，為單次跨膜蛋白。Trop-2的一級結構是由323個氨基酸組成的36 KD肽，由一個細胞質尾部、胞外結構域、疏水性前導肽和一個跨膜結構組成[1]。Trop-2主要在上皮細胞中表達，正常情況下的表達量很低。Trop-2在胚胎器官的發(fā)育過程中起著重要的作用，但同時，它也是一種與惡性腫瘤的發(fā)生、侵襲和轉移有關的癌基因，在乳腺癌、結腸癌、甲狀腺乳頭狀癌、結腸癌、食管鱗狀細胞癌等多種惡性腫瘤中過度表達。目前，研制以Trop-2為靶點的分子靶向藥物已經(jīng)成為腫瘤臨床研究的熱點。

1 Trop-2介導的腫瘤細胞增殖和轉移

目前，Trop-2介導的信號轉導機制還沒有被完全弄清楚，但是Trop-2可以通過調節(jié)細胞周期蛋白表達、鈣離子相關信號途徑和減少纖維粘連蛋白的黏附，支持腫瘤細胞的生長、轉移和增殖。Trop-2細胞質結構域含有一個與蛋白激酶C磷酸化位點重疊的序列，磷脂酰肌苷4，5-二磷酸（PIP2）可以調節(jié)Trop-2鈣信號轉導的磷酸化，因此，Trop-2參與了一些與腫瘤發(fā)生有關的分子途徑，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用[2]。

Trop-2的過度表達增加了腫瘤細胞的侵襲性，當敲除Trop-2基因后，則降低了腫瘤細胞的侵襲性；Trop-2還可以通過ERK途徑進行過度表達從而引起癌細胞侵襲，并且其在某些腫瘤中可以誘導金屬基質蛋白酶（matrix metalloproteinase 2，MMP-2）。Zhao等[3]的試驗顯示，TNF-α 通過ERK1/2途徑上調Trop-2，來增強結腸癌細胞的侵襲，這一數(shù)據(jù)也支持了Trop-2通過ERK途徑下調MMP-2在癌細胞侵襲中發(fā)揮作用的觀點。Trerotola等[4]的研究指出，Trop-2和α5β1整合素通過它們的細胞外結構域締合，從而調節(jié)α5β1相關的分子黏附；此外，Trop-2還可以調節(jié)Rac1 GTP酶活性并誘導PAK4活化，從而促進前列腺癌細胞遷移。

2 Trop-2在不同腫瘤中的表達與功能

2.1 宮頸癌

通過免疫沉淀方法和蛋白質親和力測定方法，研究者檢測了Trop-2與胰島素樣生長因子-1受體（insulin1ike growth factors-1 receptor，IGF-1R）及漸變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）配體之間的蛋白質相互作用，結果表明，Trop-2的過表達顯著抑制宮頸癌細胞的致癌性，而敲除Trop-2則顯示相反的效果。由此說明Trop-2通過雙重抑制IGF-1R和ALK信號傳導，在宮頸癌中表現(xiàn)出腫瘤抑制功能[5-6]。

2.2 乳腺癌

相當數(shù)量的Trop-2以廣泛異質的方式保留在乳腺癌腫瘤細胞內，Trop-2的信號功能可通過抗體介導的細胞表面分子交聯(lián)或通過膜內切割激活[7]。表明這是Trop-2功能調節(jié)的一部分。研究發(fā)現(xiàn)細胞膜定位和成熟糖基化的Trop-2與癌癥患者生存率的降低有關，而細胞內滯留的Trop-2與疾病復發(fā)率的降低和生存率的提高有關[8]。采用抗Trop-2抗體免疫組化方法證明，Trop-2激活狀態(tài)是乳腺癌腫瘤進展的關鍵決定因素，是乳腺癌患者生存的有力指標。

2.3 前列腺癌

Xie等[9]提出高Trop-2表達可在雄激素敏感和雄激素非依賴性前列腺腫瘤中識別出不同的細胞亞群，并且它可能是雄激素敏感腫瘤中前列腺癌（PCa）治療反應的預測性生物標志物。

Trop-2通過其胞外結構域和α5β1整合素締合，從而導致α5β1相關的分子從黏著斑重新定位到前沿，并通過調節(jié)Rac1 GTPase活性來增強定向前列腺癌細胞的遷移[10-12]。

Trerotola等[13]發(fā)現(xiàn)Trop-2在PCa細胞中促進α5β1整合素依賴性轉移信號通路，并且Trop-2表達的改變可用于鑒定早期PCa。

2.4 胰腺癌

利用逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR）和免疫熒光法研究人胰腺癌中Trop-2的表達，結果顯示，在胰腺癌中，Trop-2的表達率遠高于腫瘤周圍組織（87.1%對9.7%），并且Trop-2在胰腺癌中的高表達與低分化變化有關，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；相反，Trop-2的表達與性別或年齡之間沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計學上的顯著相關性[14-15]。作為臨床預后指標，Trop-2可能是胰腺癌的潛在治療靶標。

Strop等[16]使用位點特異性轉谷氨酰胺酶介導的偶聯(lián)方法和專有的微管抑制劑（MTI）接頭有效載荷PF-06380101開發(fā)了可裂解的Trop-2 ADC（RN927C），通過臨床試驗表明RN927C具有良好的實體瘤治療（包括胰腺癌、卵巢癌等）指標。

2.5 甲狀腺乳頭狀癌

BRAF基因突變是甲狀腺乳頭狀癌（PTC）最常見的遺傳改變。有研究表明，Trop-2的表達與BRAF、V600E基因突變有關，Trop-2可用于預測BRAF、V600E的基因突變，對于診斷甲狀腺乳頭狀癌具有重要價值[17-18]。

2.6 結腸癌

Wang等[19]證明了Trop-2的表達與結直腸癌的不良預后和侵襲性表現(xiàn)相關，并認為Trop-2可能是結直腸癌靶向治療的候選基因，且低濃度的TNF-α通過上調ERK1/2信號通路的Trop-2顯著增強了結腸癌細胞的遷移和侵襲。Zhao等[3]證實，用特定的ERK1/2抑制劑治療，可抑制TNF-α誘導的Trop-2上調及TNF-α誘導的結腸癌細胞遷移和侵襲。Yamashita等[8]認為，黏蛋白1（MUC1）和Trop-2在各種上皮腫瘤細胞中均過表達，其高表達與不良預后相關，兩種蛋白均在人乳腺癌細胞MCF-7細胞中表達，但在人結腸癌細胞HCT116細胞中均不表達，將MUC1 cDNA導入HCT116細胞（HCT116/MUC1）后，誘導了Trop-2的表達。

2.7 食管鱗狀細胞癌

Tang等[20]鑒定了食管鱗狀細胞癌（SCC）患者血清中的抗Trop-2抗體，證明在SCC細胞中，Trop-2的表達明顯高于正常食管黏膜和永生食管黏膜細胞。此外，通過免疫組化分析，SCC細胞中Trop-2蛋白的表達也高于增生性食管黏膜中Trop-2的表達[21]。楊勇等[22]研究表明，抑制食管癌Trop-2基因表達可降低食管癌細胞的增殖及侵襲能力，其機制與下調Ki-67、MMP-2等有關。

3 以Trop-2為靶點的抗腫瘤藥物研究

目前，全球尚無以Trop-2為靶點的抗腫瘤藥物上市。

TF12是由Immunomedics公司研發(fā)，它是由抗Trop-2Fab片段和抗組胺-琥珀酰-甘氨酸（HSG）Fab片段組成的雙特異性抗體，IMP288是一種放射性標記的HSG肽，在用于腫瘤治療時，TF12與IMP288需要聯(lián)合使用。在小鼠前列腺癌移植瘤模型中，TF12可以特異性地與表達Trop-2的胰腺癌細胞有效結合，并能快速攝取放射性標記的IMP288，兩者聯(lián)合用藥可使藥物快速富集于腫瘤部位，相比于單藥可明顯改善生存期，且無腎毒性及血液毒性[23]。

Sacituzumab govitecan（IMMU-132） 是 由 Immunomedics 公司研發(fā)，它是一種由人源化單抗hRS7和細胞毒素SN-38偶聯(lián)而成的抗體藥物偶聯(lián)物（antibody-drug conjugate，ADC）。IMMU-132通過hRS7結合Trop-2后，能夠內化進入腫瘤細胞，遞送SN-38至腫瘤內，理論上能夠有效地增加腫瘤內的細胞毒素濃度，同時降低細胞毒素在血液循環(huán)系統(tǒng)的血藥濃度[24]。IMMU-132在Ⅱ期臨床試驗中顯示出良好的治療效果，獲得了美國FDA的突破性療法認定，Immunomedics已經(jīng)在美國提交了該藥物用于治療轉移性三陰性乳腺癌的上市申請。

DS-1062是日本第一三共使用專有的DXd技術設計的ADC藥物，它由人源化的抗Trop-2單克隆抗體通過四肽連接頭與新型拓撲異構酶I抑制劑連接[25]。DXd ADC技術提供了靈活性，可以提供適合的藥物與抗體之比（drug/antibody ratio，DAR）。DS-1062的DAR值為4，兼顧了療效與安全性。2019年的世界肺癌大會上，第一三共公布了一項DS-1062治療非小細胞肺癌患者的1期臨床試驗結果，在46名可被評估的患者中（DS-1062使用劑量在0.27～10.0 mg/kg），12名患者達到部分緩解，7名接受8.0 mg/kg推薦劑量的患者中，5名達到了部分緩解，其他兩名患者病情穩(wěn)定[26]。

SKB-264是由科倫藥業(yè)研發(fā)，它是一款靶向Trop-2的ADC藥物，該藥物在美國獲批一期臨床研究，并已在中國獲得臨床批準，擬用于治療Trop-2表達的惡性腫瘤。臨床前研究數(shù)據(jù)表明，SKB-264在Trop-2陽性的乳腺癌、胃癌、肺癌和結直腸癌動物模型中的抗腫瘤活性顯著，具有良好的安全性和耐受性。

BAT8003是由百奧泰生物公司研發(fā)的以Trop-2為靶點的ADC藥物，是國內第一款針對靶點提交臨床研究申請的藥物。2019年1月，BAT8003獲得中國臨床試驗批件，目前正在開展Ⅰ期臨床試驗，擬用于治療Trop-2陽性晚期上皮癌，主要包括乳腺癌、非小細胞肺癌和尿路上皮癌等[27]。這款ADC藥物由糖基化修飾重組人源化抗Trop2抗體BAT0808通過穩(wěn)定的硫醚鍵與藥物Batansine（一種美登素衍生物）進行共價連接而成，BAT8003通過糖基化修飾，增強了BAT8003招募及激活NK免疫細胞的能力，進而增強抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC）。

DAC-002是杭州多禧生物公司研發(fā)的針對Trop-2靶點的ADC藥物，多禧生物已經(jīng)在中國提交DAC-002的臨床試驗申請。這款ADC是抗Trop-2通過智能連結子偶聯(lián)抗微管蛋白Tubulysin B類似物，主要用于治療Trop-2陽性的三陰性乳腺癌、小細胞肺癌、胰腺癌等實體腫瘤治療[28]。

4 展望

與正常的組織細胞相比，Trop-2在多種惡性腫瘤細胞中表達上調，而與Trop-2表達的基線水平無關。因此，Trop-2是未來腫瘤治療研究中的候選靶標[29-30]。目前，靶向Trop-2的放射免疫療法、抗體藥物聯(lián)合傳統(tǒng)化療、化學抑制劑療法及抗體偶聯(lián)藥物正在迅速發(fā)展并逐漸應用于臨床研究。以Trop-2為靶點的藥物研究，有著很高的研究價值的和良好的發(fā)展前景，預計不遠的將來，必定會有以Trop-2為靶點的新型抗腫瘤的藥物獲批上市。