(寧夏紅枸杞產(chǎn)業(yè)有限公司,寧夏中寧 755100)
枸杞果酒是枸杞的傳統(tǒng)食用方式之一,其中枸杞發(fā)酵果酒是通過微生物發(fā)酵法生產(chǎn)果酒,能夠更多地保留枸杞果實中營養(yǎng)成分,酒精度較低,適用人群廣[1],但目前寧夏紅枸杞產(chǎn)業(yè)有限公司所生產(chǎn)的部分系列枸杞果酒由于多酚類物質(zhì)含量較高,不僅嚴重影響枸杞果酒的外觀和貨架壽命,而且使得酒體苦味較重,為解決這一問題,本研究采用具有良好生物安全性和吸附性的PVPP[2-4]對酒體進行處理,研究PVPP對多酚類物質(zhì)的吸附作用,并且研究不同濃度的PVPP對枸杞果酒口感及褐變防止率等因素的影響,確定最佳PVPP的用量,為實際工業(yè)生產(chǎn)和技術(shù)改進提供理論支持。
PVPP材料:南京都萊試劑有限公司。
儀器設(shè)備:恒溫水浴鍋,上海舍巖儀器有限公司;722s 可見光分光光度計,上海棱光技術(shù)有限公司。
原料及試劑:枸杞、酵母、SO2、果膠酶,寧夏紅枸杞產(chǎn)業(yè)有限公司提供,其他試劑均為分析純。
1.2.1 枸杞果酒的釀造
取300 g 枸杞清洗,1∶4 復水打漿,打入發(fā)酵罐中,先接入益生菌發(fā)酵10 h 后滅菌,待溫度降到常溫,加入40 mg/L 果膠酶水解30 min,加入60 mg/L SO2處理30 min,接入酵母菌進行發(fā)酵,隔天補糖,補糖量為發(fā)酵酒精度所需的蔗糖添加量,直至發(fā)酵結(jié)束,分流上清液,分裝到6 個500 mL 貯酒瓶中,置于4 ℃冰箱保存。
1.2.2 PVPP的處理
為使加入酒體中的PVPP 的含量分別達到1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L,稱取0.5 g、0.75 g、1 g、1.25 g、1.5 g PVPP加入少量但足以使PVPP 充分膨脹的蒸餾水,置于28 ℃水浴鍋中恒溫保存。
1.2.3 枸杞果酒中多酚類物質(zhì)的測定
枸杞果酒中多酚類物質(zhì)可以與酒石酸亞鐵形成藍紫色絡(luò)合物,絡(luò)合物在545 nm 處吸光度值在一定的濃度范圍內(nèi)與多酚類化合物濃度成正比,測定方法參照酒石酸亞鐵分光光度法測定茶多酚[5]。
1.2.4 PVPP對枸杞果酒口感的影響
酒體感官評分表見表1。
表1 PVPP處理枸杞果酒后感官評分
1.2.5 PVPP對枸杞果酒品質(zhì)的影響
采用分光光度計測定1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP 處理后酒體在430 nm處的吸光值。
1.2.6 PVPP對枸杞果酒理化性質(zhì)的影響
國標法測定0 mg/L(空白)、1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP 處理后酒體糖度、蛋白質(zhì)、酒度、揮發(fā)酸、總酸含量。
以1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP處理制備好的枸杞發(fā)酵果酒,處理溫度為28 ℃,測定不同處理時間對PVPP 吸附多酚物質(zhì)的影響,結(jié)果見圖1。
圖1 不同處理條件下PVPP對酒體多酚類物質(zhì)的影響
由圖1 不同處理條件下PVPP 對酒體多酚類物質(zhì)的影響結(jié)果可看出,PVPP 可以有效吸附酒體中多酚類物質(zhì),不同濃度的PVPP 對酒體中多酚類物質(zhì)的吸附程度不同,濃度越高,吸附作用越強,且作用有效時間相似。當PVPP 濃度為1000 mg/L 時,28 ℃處理酒體100 min,酒體中多酚類物質(zhì)含量下降54.4 mg/L,當PVPP 濃度為1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L時,28 ℃處理酒體80 min,酒體中多酚類物質(zhì)含量分別下降71.6 mg/L、82.9 mg/L、102.6 mg/L、104.2 mg/L,PVPP濃度在1000~2500 mg/L范圍內(nèi)時,隨著濃度的增加,枸杞果酒中多酚類物質(zhì)含量下降明顯,但當PVPP 濃度繼續(xù)增加,直至3000 mg/L時,其對酒體中多酚類物質(zhì)的吸附作用增加不明顯,這可能是因為當PVPP濃度為2500 mg/L時,處理80 min,此時對酒體中可吸附的酚類物質(zhì)已經(jīng)達到完全吸附,當濃度再繼續(xù)增加時只能縮短其作用時間,多酚類物質(zhì)吸附量并沒有得到顯著的增加。
以1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP處理制備好的枸杞發(fā)酵果酒,處理溫度為28 ℃,作用80 min 后過濾,留濾液,在4 ℃條件下貯藏3 個月后,專業(yè)人士對酒體進行感官品評。
以1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP 處理制備好的枸杞發(fā)酵果酒,在4 ℃條件下貯藏3 個月,取未經(jīng)過PVPP 處理同種工藝下的枸杞發(fā)酵果酒作為空白,按照1.2.3 對不同條件的樣品的吸光度值進行測量,并按照公式一對褐變防止率進行計算,結(jié)果見圖2。
圖2 不同濃度PVPP處理后枸杞果酒口感及褐變防止率的變化
圖3 不同濃度PVPP對枸杞果酒氣味、口感和色澤影響
圖2 表示不同濃度PVPP 處理后枸杞果酒口感及褐變防止率的變化情況,從圖2 可以看出,PVPP對枸杞果酒有著較強的抗褐變能力,當濃度達到2500 mg/L 時,褐變防止率達到最高25.00 %,濃度為3000 mg/L 時,褐變防止率為24.24 %,與前者相比變化不明顯。圖3 表示PVPP 對枸杞果酒氣味、口感和色澤影響情況,枸杞果酒口感隨著PVPP 添加量的增加出現(xiàn)了不同程度的變化,當其濃度為1500 mg/L時,酒體口感醇厚,苦味適中,酒體清亮、透明、有光澤,當PVPP 濃度繼續(xù)增加時,酒體整體口感呈現(xiàn)下降趨勢,主要表現(xiàn)在氣味和口感兩方面,其中氣味中枸杞果香味會隨著PVPP 濃度的增加呈現(xiàn)顯著減少,同時,口感方面隨著PVPP 濃度的增加苦味減少,醇厚感增強,但當PVPP 濃度增加量超過2000 mg/L 時,口感下降明顯,色澤受到PVPP的影響較小。
采用0 mg/L、1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP 處理制備好的枸杞發(fā)酵果酒,處理溫度為28 ℃,作用80 min 后過濾,留濾液,測定酒體糖度、蛋白質(zhì)、酒精度、總酸、揮發(fā)酸含量,結(jié)果見表2。
表2為0 mg/L、1000 mg/L、1500 mg/L、2000 mg/L、2500 mg/L、3000 mg/L PVPP 對枸杞果酒理化指標的影響,結(jié)果表明,不同濃度PVPP 處理果酒后,酒體的糖度、總酸和揮發(fā)酸含量沒有顯著性差異,說明不同濃度PVPP 對酒體的糖度、總酸和揮發(fā)酸影響不顯著,但是從不同濃度PVPP 處理果酒,酒體中蛋白質(zhì)含量變化可以看出,隨著PVPP 濃度增加,蛋白質(zhì)含量在逐漸減小,這說明PVPP 對枸杞果酒中蛋白質(zhì)具有一定的吸附作用,并且具有一定的顯著相關(guān)性。這是因為PVPP 是一種交聯(lián)聚合物,其結(jié)構(gòu)中存在類似蛋白內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu),具有一定的生物相容性和極性[2],因此會對蛋白產(chǎn)生吸附作用。
本文對寧夏紅枸杞產(chǎn)業(yè)有限公司所生產(chǎn)的部分系列枸杞果酒進行PVPP 處理,發(fā)現(xiàn)適當濃度的PVPP 可以減少酒體苦味,使酒體醇厚的口感適中,但如果濃度過高,會使酒體果香味損失嚴重,口感寡淡。測定不同濃度的PVPP對酒體多酚類物質(zhì)實驗發(fā)現(xiàn),PVPP 對多酚類物質(zhì)具有較強的吸附作用,并且可以做到有效的防止酒體褐變的作用。通過測定酒體理化指標,發(fā)現(xiàn)PVPP 對蛋白同樣具有顯著的吸附作用,而對其他理化指標作用不明顯。
表2 不同濃度PVPP對枸杞果酒理化指標的影響
PVPP 作為澄清劑的應用是一把雙刃劍,用量需要針對不同酒體進行大量實驗去確定,本文中雖然確定出針對PVPP 的最佳用量,并且得知多酚類物質(zhì)和蛋白的含量下降可以使的酒體苦味下降,但并沒有對酒體中影響苦味的因素是哪種多酚類物質(zhì)或蛋白進行定量定性分析,因此在后續(xù)的研究中需要多對其原因作深入的分析。