戴如星，高彩云，楊俊，鄭雪群，明芳

柳州市人民醫(yī)院，廣西柳州545001

子宮內(nèi)膜癌是常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤，發(fā)病率占所有女性惡性腫瘤的第8位［1］。近年來(lái)，其病死率呈逐漸上升趨勢(shì)，嚴(yán)重影響女性健康［2］。腫瘤的發(fā)生與癌基因的激活及抑癌基因的失活有關(guān)。細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)抑制因子（SOCS1）基因位于16p13.13，此基因編碼蛋白細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)（SOCS）家族的成員，是細(xì)胞因子誘導(dǎo)的細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)因子（STAT）負(fù)性調(diào)節(jié)劑。該基因編碼蛋白在細(xì)胞因子受體的下游起負(fù)性調(diào)控作用［3］。近年研究發(fā)現(xiàn)，SOCS1在腫瘤中發(fā)揮抑癌基因的作用，在肝癌、卵巢癌等腫瘤中均存在表達(dá)下調(diào)現(xiàn)象，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的惡性進(jìn)展［4］。CUE 結(jié)構(gòu)域蛋白2（CUEDC2）基因位于10q24.32，該基因編碼蛋白CUEDC2 具有CUE 結(jié)構(gòu)域2，參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)和炎癥等諸多生理和病理過(guò)程［5］。CUEDC2 在乳腺癌、卵巢癌、肝細(xì)胞癌等腫瘤中均存在異常表達(dá)現(xiàn)象，并通過(guò)影響腫瘤代謝促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展［6］。本研究通過(guò)檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌患者癌組織中SOCS1、CUEDC2 表達(dá)，初步探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016 年1月—2020 年3 月我院接受治療的80例子宮內(nèi)膜癌患者，納入標(biāo)準(zhǔn)：①子宮內(nèi)膜癌診斷以病理學(xué)檢查為金標(biāo)準(zhǔn)；②均為初次診治；③無(wú)放化療等抗腫瘤治療史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重心肺肝腎等臟器功能異常；②合并有其他類(lèi)型惡性腫瘤；③合并精神障礙性疾病或自身免疫系統(tǒng)疾病。患者年齡48～65（65.4±5.2）歲；腫瘤直徑：≤5 cm者55例，＞5 cm 者25例；組織分化程度：高中分化47例，低分化33例；腫瘤分期參考2009年國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟FIGO 標(biāo)準(zhǔn)［7］：Ⅰ～Ⅱ期60 例，Ⅲ～Ⅳ期20 例；伴肌層浸潤(rùn)32例，無(wú)肌層浸潤(rùn)48例；伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移61例。本研究經(jīng)患者及家屬知情同意并簽字，經(jīng)我院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)通過(guò)。

1.2 癌及癌旁組織中SOCS1、CUEDC2 蛋白表達(dá)檢測(cè) 采用免疫組化法。將癌組織及癌旁組織（經(jīng)病理學(xué)檢查明確為正常子宮內(nèi)膜組織，距離癌組織＞5 cm）甲醛固定過(guò)夜，石蠟包埋切片，切片75 ℃烤箱2 h；二甲苯Ⅰ液浸泡15 min；二甲苯Ⅱ液浸泡15 min；梯度水化：100℅乙醇浸泡5 min；100℅乙醇浸泡5 min；95℅乙醇浸泡3 min；95℅乙醇浸泡3 min；90℅乙醇浸泡2 min；80℅乙醇浸泡2 min；檸檬酸鹽緩沖液加熱煮沸15 min，自然冷卻放至室溫；3%雙氧水去除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶30 min；一抗孵育過(guò)夜（SOCS1稀 釋 比1∶500，CUEDC2 稀 釋比1∶300），SOCS1、CUEDC2 抗 體 購(gòu) 自Abcam 公 司，貨 號(hào)ab9870、ab109649；二抗孵育2 h；DAB 顯色3 min；蘇木精復(fù)染30 s；梯度脫水封片。結(jié)果判定［8］：根據(jù)陽(yáng)性表達(dá)部位的染色強(qiáng)度及細(xì)胞數(shù)對(duì)蛋白表達(dá)進(jìn)行評(píng)估。不著色為0 分，顏色淺1 分，顏色深2 分。無(wú)著色細(xì)胞為0分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜25%為1分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)25%～50%為2 分，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞50%為3 分。染色結(jié)果為染色強(qiáng)度評(píng)分與陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)評(píng)分的乘積。0～2 判定為陰性，3～9為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)數(shù)資料用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。SOCS1與CUEDC2 表達(dá)的相關(guān)性采用Spearman 秩相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 子宮內(nèi)膜癌癌組織與癌旁組織中SOCS1、CUEDC2 表達(dá)比較 CUEDC2 陽(yáng)性表達(dá)主要位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。癌組織中SOCS1、CUEDC2 陽(yáng)性表達(dá)率分別為18.8%（18/80）、63.8（51/80），癌旁組織中分別為58.8%（47/80）、7.5%（6/80）。癌組織中SOCS1 陽(yáng)性表達(dá)率低于癌旁組織（χ2=21.791，P＜0.05），而CUEDC2 陽(yáng)性表達(dá)率高于癌旁組織（χ2=55.186，P＜0.05）。

2.2 子宮內(nèi)膜癌組織中SOCS1、CUEDC2 表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 子宮內(nèi)膜癌組織中SOCS1、CUEDC2 表達(dá)均與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)（P 均＜0.05），而與年齡、腫瘤直徑、肌層浸潤(rùn)及分化程度無(wú)關(guān)（P均＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 子宮內(nèi)膜癌組織中SOCS1、CUEDC2表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3 子宮內(nèi)膜癌組織中SOCS1 與CUEDC2 表達(dá)的相關(guān)性 Spearman 秩相關(guān)分析結(jié)果示，癌組織中SOCS1 與CUEDC2 表 達(dá) 呈 負(fù) 相 關(guān)（r=-0.598，P＜0.05）。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌起源于子宮內(nèi)膜上皮組織的腫瘤，是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤之一。近年來(lái)隨著我國(guó)人民經(jīng)濟(jì)水平的提高，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病有年輕化趨勢(shì)，發(fā)病率不斷升高。子宮內(nèi)膜癌的病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚，目前認(rèn)為子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生是遺傳因素、環(huán)境因素等共同作用的結(jié)果，而癌基因的異常激活及抑癌基因的失活是腫瘤發(fā)生的重要機(jī)制。深入研究影響子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，尋找新的早期診斷及治療的腫瘤標(biāo)志物，有較高臨床價(jià)值。

SOCS1是SOCS蛋白質(zhì)家族的成員，該家族成員通過(guò)負(fù)反饋系統(tǒng)參與調(diào)控經(jīng)典的Janus 激酶（JAK）/STAT 通路的調(diào)節(jié)。結(jié)構(gòu)上，SOCS1具有一個(gè)保守的羧基末端結(jié)構(gòu)域和SH2 結(jié)構(gòu)域，SH2 結(jié)構(gòu)域是SOCS1 結(jié)合Jak 激酶發(fā)揮功能的主要結(jié)構(gòu)。研究表明，在乳腺癌、肝癌等腫瘤中存在SOCS1 異常表達(dá)降低的現(xiàn)象，并通過(guò)激活JAK/STAT 信號(hào)通路，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展［9］。本研究中，癌組織中SOCS1 表達(dá)下調(diào)，其機(jī)制目前尚不清楚，可能與腫瘤中微小RNA（miR），如miR-155對(duì)SOCS1基因的表達(dá)抑制有關(guān)。研究表明，miR-155 能與SOCS1 的mRNA 結(jié)合，并降低SOCS1 mRNA 的穩(wěn)定性，進(jìn)而抑制SOCS1 基因的表達(dá)［10］。本研究中，癌組織中SOCS1 的表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，其機(jī)制可能是腫瘤發(fā)生時(shí)，SRC 家族的非受體酪氨酸激酶（SFK）可使SOCS1 磷酸化，導(dǎo)致SOCS1 二聚化并抑制SOCS1 與p53 相互作用，進(jìn)而導(dǎo)致p53 的抑癌功能減弱，促進(jìn)腫瘤的增殖及轉(zhuǎn)移等，導(dǎo)致腫瘤分期升高及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移［11］。此外，腫瘤發(fā)生時(shí)SOCS1 基因啟動(dòng)子區(qū)域的CpG 島處甲基化水平升高，引起SOCS1 基因表達(dá)沉默，進(jìn)而導(dǎo)致Janus 激酶2 磷酸化水平升高，細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子1 表達(dá)上調(diào)，亦促進(jìn)腫瘤的無(wú)限增殖及轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為［12］。

CUEDC2 是一種含CUE 結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)，結(jié)構(gòu)上具有保守的泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域。CUEDC2在多種真核細(xì)胞中表達(dá)，參與如細(xì)胞周期、分化及炎癥等多種生物學(xué)過(guò)程［13］。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，CUEDC2 在多種實(shí)體腫瘤中，如乳腺癌、卵巢癌和腦癌等腫瘤中表達(dá)異常升高［14-16］。高水平的CUEDC2 能導(dǎo)致抑癌基因APC的編碼蛋白功能失活，引起染色體錯(cuò)聚和非整倍性，促進(jìn)腫瘤形成［17］。本研究發(fā)現(xiàn)，CUEDC2 在子宮內(nèi)膜癌組織中表達(dá)明顯增加，其原因可能與CUEDC2的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控異常有關(guān)。有研究表明，miR-324-5p能結(jié)合CUEDC2mRNA 的3'非編碼區(qū)，抑制CUEDC2的表達(dá)，而腫瘤發(fā)生時(shí)miR-324-5p 表達(dá)顯著下調(diào)，導(dǎo)致CUEDC2mRNA 的穩(wěn)定性降低，引起CUEDC2表達(dá)升高［18］。此外，腫瘤中CUEDC2 的表達(dá)還受到腫瘤微環(huán)境中巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞分泌的抗炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素17、腫瘤壞死因子α 的影響。研究表明，腫瘤中抗炎細(xì)胞因子分泌水平升高促進(jìn)CUEDC2 表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致核因子κB 等信號(hào)通路的異常活化，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、抑制凋亡等生物學(xué)過(guò)程［19］。癌組織中CUEDC2的表達(dá)與腫瘤分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。其機(jī)制可能是CUEDC2 表達(dá)升高后，促進(jìn)p38 的磷酸化，激活絲裂原活化的蛋白激酶途徑，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的惡性增殖及淋巴轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致腫瘤分期升高［20］。此外，CUEDC2 能通過(guò)促進(jìn)腫瘤代謝促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。有研究發(fā)現(xiàn)，CUEDC2 能上調(diào)兩種關(guān)鍵的糖酵解蛋白，葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3 和乳酸脫氫酶A ，通過(guò)與糖皮質(zhì)激素受體相互作用，促進(jìn)腫瘤的無(wú)氧糖酵解及進(jìn)展［21］。本研究中，癌組織中SOCS1表達(dá)與CUEDC2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。目前在子宮內(nèi)膜癌中兩者相互作用的機(jī)制尚不清楚。有研究報(bào)道，在急性髓系白血病發(fā)生中，腫瘤細(xì)胞中CUEDC2 的過(guò)度表達(dá)能夠促進(jìn)SOCS1 蛋白的泛素化，導(dǎo)致SOCS1 蛋白穩(wěn)定性降低，并通過(guò)泛素-蛋白酶體途徑降解，引起SOCS1 蛋白表達(dá)下調(diào)［22］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中亦證實(shí)，CUEDC2 的基因敲除后的小鼠的總體生存率和無(wú)事件生存率顯著延長(zhǎng)。但二者之間的相互作用有待深入研究。

綜上所述，在子宮內(nèi)膜癌中SOCS1 表達(dá)下調(diào)，而CUEDC2表達(dá)上調(diào)，兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，兩者表達(dá)與腫瘤分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)；檢測(cè)二者表達(dá)有助于子宮內(nèi)膜癌病情判斷。