蔣燦燦，周淑萍

[安徽理工大學(xué)第一附屬醫(yī)院(淮南市第一人民醫(yī)院)，安徽 淮南 232000]

癌癥作為世界性公共衛(wèi)生健康威脅的主要原因之一，具有高病死、高復(fù)發(fā)、高轉(zhuǎn)移和預(yù)后差等特點(diǎn)。根據(jù)2018年全球癌癥統(tǒng)計(jì)，全球新增癌癥病例1 810萬(wàn)例，死亡的病例數(shù)高達(dá)960萬(wàn)[1]。盡管手術(shù)切除、放化療、免疫治療、內(nèi)分泌治療及靶向治療等臨床應(yīng)用手段在癌癥的治療方面取得了一定進(jìn)展,但癌癥患者的存活率仍然較低，造成這一后果的原因多是早期診斷率低及無(wú)有效的預(yù)后評(píng)估手段。目前抗癌常用的治療藥物和方案包括：索拉非尼、阿霉素(Adriamycin,ADM)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)、含鉑抗癌藥物、免疫治療等[2-5]。這些傳統(tǒng)療法仍是現(xiàn)今主要治療形式，但這些藥物在治療后期多會(huì)使癌細(xì)胞產(chǎn)生藥物抵抗，并由此產(chǎn)生治療成功率降低，預(yù)后不佳的后果。腫瘤藥物治療過(guò)程中出現(xiàn)的耐藥機(jī)制繁而復(fù)雜，目前研究出的可能機(jī)制包括腫瘤干細(xì)胞非正常性激活、化療藥物代謝速度增加、DNA損傷后修復(fù)能力增強(qiáng)、細(xì)胞凋亡信號(hào)通路活性喪失、細(xì)胞內(nèi)藥物積聚被重新分布及轉(zhuǎn)運(yùn)體(識(shí)別和排出藥物)的表達(dá)增加等[6-8]。

環(huán)狀RNA是一種內(nèi)源性RNA，由前體RNA經(jīng)反向剪接或選擇性剪接形成的單鏈環(huán)狀結(jié)構(gòu)，其特征是在真核生物中具有較高的序列保守性、表達(dá)特異性及高度穩(wěn)定性等。與其他線性RNA相比，環(huán)狀RNA所特有的閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)，使其無(wú)游離端，不易被核糖核酸酶剪切，難以被許多典型的RNA降解途徑降解，故可在體內(nèi)穩(wěn)定存在[9]。研究表明，大多數(shù)已測(cè)序的環(huán)狀RNA比線性RNA具有更長(zhǎng)的半衰期，特別是在永久性細(xì)胞中，例如，隨著年齡的增長(zhǎng)，環(huán)狀RNA會(huì)在神經(jīng)細(xì)胞中大量富集[10-13]。此外，一些環(huán)狀RNA可以促進(jìn)或者抑制靶基因的表達(dá)，這主要是因?yàn)槠洳糠制紊虾信cmiRNA相結(jié)合的位點(diǎn)，可通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合miRNA，阻止miRNA與目標(biāo)基因結(jié)合，共同調(diào)控靶基因的表達(dá)[14-15]。目前已證實(shí)體內(nèi)的miRNA可調(diào)節(jié)幾十到上百個(gè)基因的表達(dá)，以及同時(shí)控制多個(gè)細(xì)胞途徑的下傳，在基因組中起主要調(diào)節(jié)作用。在癌細(xì)胞中，一些miRNA的調(diào)控作用經(jīng)常被解除，隨之出現(xiàn)細(xì)胞原癌基因逃脫miRNA介導(dǎo)的抑制，獲得獨(dú)立于原癌基因本身的突變功能[16-17]。隨著對(duì)miRNA研究的深入，已發(fā)現(xiàn)miRNA不僅在癌組織和細(xì)胞中差異性表達(dá)(上調(diào)或下調(diào))，并且還參與癌細(xì)胞的生長(zhǎng)浸潤(rùn)、遠(yuǎn)處或多處轉(zhuǎn)移、細(xì)胞耐藥等[18-22]。基于miRNA的一系列作用，有研究者提出構(gòu)建miRNA模擬物作為治療腫瘤的藥物，系統(tǒng)或局部地將模擬物注射到目標(biāo)組織部位，但血流中易降解，靶向性不佳以及局部傳遞困難等問(wèn)題，是目前需要面對(duì)的挑戰(zhàn)[23]。與miRNA易降解、壽命短、不穩(wěn)定等缺陷相比，環(huán)狀RNA不僅可在體液(唾液、血液及組織液)中穩(wěn)定存在，而且具有復(fù)制保守性。因此通過(guò)circRNA/miRNA軸改變靶基因的表達(dá)量，糾正細(xì)胞缺陷所致的癌細(xì)胞過(guò)度增殖，并促進(jìn)凋亡途徑的激活以及癌細(xì)胞死亡，是目前科研工作中需考慮的方向之一。除此之外環(huán)狀RNA還有蛋白質(zhì)翻譯、基因轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后修飾等作用[14,24-26]。針對(duì)環(huán)狀RNA特有的結(jié)構(gòu)、功能及作用機(jī)制，其有成為腫瘤預(yù)防、早期診斷、治療靶點(diǎn)確認(rèn)、療效評(píng)估及預(yù)后評(píng)估的分子標(biāo)志物的潛力。

1 環(huán)狀RNA的生物學(xué)特征

早在20世紀(jì)70年代，Kolakofsky首次在仙臺(tái)病毒中發(fā)現(xiàn)了單鏈的、閉合環(huán)狀的、無(wú)蛋白質(zhì)外殼的一種RNA分子，但因認(rèn)識(shí)的不足，以及測(cè)序技術(shù)的匱乏，最初認(rèn)為其是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中錯(cuò)誤拼接的產(chǎn)物，隨著高通量測(cè)序技術(shù)及生物信息技術(shù)的快速發(fā)展，才改變對(duì)環(huán)狀RNA結(jié)構(gòu)的錯(cuò)誤認(rèn)知[27]。環(huán)狀RNA除了多數(shù)來(lái)自外顯子外，還有少部分分別源于3'UTR、5'UTR、內(nèi)含子、基因間區(qū)以及反義RNA。根據(jù)環(huán)狀RNA的組成序列及結(jié)構(gòu)的不同，可將其分為外顯子circRNA、內(nèi)含子circRNA、外顯子-內(nèi)含子circRNA和基因間型circRNA，其中，外顯子RNA占據(jù)所鑒定出的circRNA的80 %[28-29]?？蒲泄ぷ髡咴趯?duì)環(huán)狀RNA的生物學(xué)特性，及其在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中所發(fā)揮的作用進(jìn)行了一系列研究后，提出了以下幾點(diǎn)認(rèn)識(shí)：首先，環(huán)狀RNA幾乎在所有的組織和細(xì)胞中都差異性表達(dá)，包括肺癌、胃癌及泌尿道腫瘤等[30-34]；其次，同一腫瘤中，不同的circRNA表達(dá)方式也存在差異，而簡(jiǎn)單的上下調(diào)方式已難以滿足其表達(dá)需要，例如在胃癌中，circHIPK3和circPVT1表達(dá)上調(diào)[30-31]，而circLARP4表達(dá)下調(diào)[32]；第三，相同環(huán)狀RNA在不同腫瘤中表達(dá)也不相同，并且其上下調(diào)模式也不相同，例如，circHIPK3在絕大多數(shù)癌癥中的表達(dá)都是上調(diào)的[30,33]，但在膀胱癌中它是下調(diào)的[34]。具有復(fù)雜表達(dá)模式的環(huán)狀RNA，在生物學(xué)功能及臨床應(yīng)用中也展示了其復(fù)雜的一面。環(huán)狀RNA除了調(diào)控腫瘤生長(zhǎng)浸潤(rùn)、遠(yuǎn)處或多處轉(zhuǎn)移以及腫瘤周圍血供增加等作用外，還與癌癥的各種臨床表征及患者預(yù)后相關(guān)[35-36]。環(huán)狀RNA與腫瘤臨床治療的相關(guān)性提示了其潛在的臨床診斷價(jià)值，例如，低表達(dá)的circNOL10可能暗示該肺癌惡性程度不高，預(yù)后良好[37]；而circDONSON的高表達(dá)則提示該胃癌患者出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，需加強(qiáng)重視[38]。綜上所述，環(huán)狀RNA在腫瘤的早期診斷、治療及預(yù)后中有重大意義。

2 環(huán)狀RNA與藥物耐藥

目前，靶向治療、化療、免疫治療及內(nèi)分泌治療等仍是癌癥相關(guān)疾病藥物治療的主流。如分子靶向藥物常用藥劑包括索拉非尼、瑞格拉非尼等。而常用的臨床化療藥物有阿霉素、5-氟尿嘧啶、順鉑和奧沙利鉑。至于腫瘤的免疫治療，它是一種新的治療選擇，主要包括免疫檢查點(diǎn)阻滯劑：程序性死亡受體-1(Programmed Cell Death-1,PD-1)、程序性死亡受體配體-1(Programmed Cell Receptor-ligand 1,PD-L1)等。而腫瘤的內(nèi)分泌治療則主要是針對(duì)雄激素及雌激素受體的藥物，其中廣泛使用的藥物為苯扎魯胺、他莫昔芬等。

環(huán)狀RNA是作為一種內(nèi)源性RNA，在體內(nèi)大量富集，并可能以差異性表達(dá)的方式在組織和細(xì)胞中存在。最近，環(huán)狀RNA被證明在一些細(xì)胞生長(zhǎng)的各個(gè)過(guò)程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，如miRNA“海綿”、RBP結(jié)合分子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子、蛋白質(zhì)翻譯以及免疫調(diào)節(jié)因子等[39-40]。新的證據(jù)表明環(huán)狀RNA除了調(diào)控腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移以及增加血供等作用外，還與癌癥的各種臨床表征及患者預(yù)后相關(guān)。本文從腫瘤耐藥的角度探討環(huán)狀RNA的作用、功能及機(jī)制，以期為臨床治療提供新思路。

2.1環(huán)狀RNA與阿霉素耐藥 阿霉素作為抑制細(xì)胞周期的抗癌藥物，在臨床上廣泛使用，其潛在作用為:抑制DNA復(fù)制合成，干擾復(fù)制所需的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ活性，并參與誘導(dǎo)線粒體自由基損傷等[41-42]。在多種癌癥的黃金治療方案中，阿霉素是治療的關(guān)鍵要素之一，然而，其抗癌作用隨著長(zhǎng)期暴露于濃度梯度中而逐漸減弱，最終形成多藥耐藥[43-44]，但隨著對(duì)環(huán)狀RNA的了解愈加深入，其在阿霉素耐藥方面存在的潛在臨床診療價(jià)值也隨之彰顯。有研究者在乳腺癌患者的癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了一種名為circKDM4C的環(huán)狀RNA，此命名是因其來(lái)源于賴氨酸去甲基化酶4C(Lysine Demethylase 4C,KDM4C)基因。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了在乳腺癌細(xì)胞和組織中circKDM4C的表達(dá)較正常細(xì)胞和組織下降，并且其低表達(dá)會(huì)影響乳腺癌的預(yù)后和轉(zhuǎn)移。通過(guò)流式細(xì)胞儀和Western印跡分析得出，circKDM4C基因敲除可抑制阿霉素誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，而circKDM4C過(guò)表達(dá)可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)得出，低表達(dá)的circKDM4C可通過(guò)與miR-548p相互作用，抑制靶基因吩嗪生物合成類蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域(Phenazine Biosynthesis Like Protein Domain Containing,PBLD)的表達(dá)，最終導(dǎo)致病情進(jìn)展以及化療耐藥性增強(qiáng)。此研究提出了乳腺癌患者潛在的治療靶點(diǎn)可能是circKDM4C/miR-548p/PBLD軸[45]。此外，骨肉瘤患者的組織、血液和化療耐藥細(xì)胞中，circPVT1顯著上調(diào)，但敲除circPVT1后可降低經(jīng)典耐藥相關(guān)基因ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體B1(ATP Binding Cassette Transporter B1,ABCB1)的表達(dá)，從而增加了骨肉瘤細(xì)胞對(duì)阿霉素和順鉑的敏感性[46]。在不影響體內(nèi)其他RNA表達(dá)的情況下，若能精準(zhǔn)調(diào)控致癌環(huán)狀RNA，使其轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂兄委熞饬x的RNA藥物。如上述，circPVT1在非小細(xì)胞性肺癌及骨肉瘤中表達(dá)上調(diào)則會(huì)導(dǎo)致多重耐藥，若研發(fā)一種能靶向于circPVT1的RNA藥物抑制其表達(dá)，便可解決腫瘤細(xì)胞或組織的耐藥性問(wèn)題[46-47]。

2.2環(huán)狀RNA與5-氟尿嘧啶(5-FU)耐藥 5-氟尿嘧啶(5-FU)是一種細(xì)胞周期抗代謝化療藥物，其抗癌機(jī)制為：干擾DNA合成，促使細(xì)胞周期停滯等[48]。在5-FU耐藥的乳腺癌(Breast Cancer,BC)細(xì)胞中，存在顯著差異性表達(dá)的是：CDR1as(上調(diào))以及miR-7(下調(diào))，并且miR-7是CDR1as的靶基因之一，二者可共同調(diào)控周期蛋白E1(Cyclin E1,CCNE1)的表達(dá)，過(guò)表達(dá)miR-7或者沉默CDR1as都可增加5-FU耐藥BC細(xì)胞的化療敏感性，上述結(jié)論可表明CDR1as可能是確定和優(yōu)化乳腺癌治療策略的潛在工具[49]。此外，有研究者發(fā)現(xiàn)，與5-FU敏感大腸癌組織及細(xì)胞相比，在5-FU耐藥的大腸癌中，circ-PRKDC和FOXM1的表達(dá)升高，miR-375的表達(dá)較正常組織和細(xì)胞明顯下調(diào)，而沉默circ-PRKDC或過(guò)表達(dá)miR-375、FOXM1都可增加耐5-FU大腸癌細(xì)胞的敏感性，進(jìn)一步的研究表明，敲除circ-PRKDC基因后可調(diào)控miR-375/FOXM1軸，抑制Wnt/β-catenin通路，增強(qiáng)5-FU耐藥細(xì)胞對(duì)5-FU的敏感性[50]。

2.3環(huán)狀RNA與鉑類藥物耐藥 鉑類藥物，包括順鉑及奧沙利鉑等，作為一種廣譜抗腫瘤藥，主要抑癌功能為：抑制DNA合成和轉(zhuǎn)錄，是癌癥治療最常用的藥物之一[51-52]。順鉑由Michele Peyrone合成，首先是用作睪丸癌和卵巢癌的治療藥物。在對(duì)順鉑耐藥和順鉑敏感的胃癌組織進(jìn)行RNA測(cè)序后，得出circAKT3在順鉑耐藥胃癌組織中顯著表達(dá)，而與其結(jié)合的miR-198表達(dá)水平下降。功能學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，circAKT3/miR-198軸靶向調(diào)控目的基因PIK3R1的表達(dá)后，激活相關(guān)信號(hào)通路PI3K/AKT，最終增加胃癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性[53]。相關(guān)研究證明，乳腺癌易感基因1(Breast Cancer Susceptibility Gene 1,BRCA1)作為DNA修復(fù)分子，可通過(guò)激活PI3K/AKT通路促進(jìn)其表達(dá)，此信號(hào)通路還可增加以順鉑為基礎(chǔ)的DNA損傷化療藥物的耐藥性，表明circAKT3可作為良好生物標(biāo)志物，用于預(yù)測(cè)胃癌患者是否出現(xiàn)順鉑耐藥[54]。不同的環(huán)狀RNA在同一組織或細(xì)胞中具有不同表達(dá)模式，例如，同是順鉑耐藥的胃癌組織，circCUL2的含量較正常組織顯著減少，而其下調(diào)可能代表著癌細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和耐藥的增強(qiáng)。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)表明，miR-142-3p與circCUL2、Rho相關(guān)卷曲螺旋形蛋白激酶2(Rho-associated Coiled Coil-containing Protein Kinase 2,ROCK2)的表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)，而circCUL2與ROCK2的表達(dá)水平呈正相關(guān)。在上調(diào)circCUL2的順鉑耐藥細(xì)胞中檢測(cè)到表達(dá)增加的ROCK2，這表明ROCK2可能是circCUL2通過(guò)結(jié)合miR-142-3p促進(jìn)順鉑耐藥胃癌細(xì)胞自噬的靶基因的表達(dá)產(chǎn)物[55]。此外，與順鉑敏感的肝癌組織相比，順鉑耐藥的肝細(xì)胞性肝癌(Hepatocellular Carcinoma,HCC)患者組織中，circRNA-101505與含氧化硝基結(jié)構(gòu)域蛋白1(Oxidored-nitro domain-containing protein 1,NOR1)表達(dá)降低，而miR-103的表達(dá)升高，且circRNA-101505是作為miR-103的“海綿”發(fā)揮作用，在過(guò)表達(dá)circRNA-101505的肝癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，circRNA-101505/miR-103軸可增加NOR1的表達(dá)量，從而降低肝癌細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥性[56]。而在奧沙利鉑耐藥的HCC中，過(guò)表達(dá)的circFBXO11可減輕細(xì)胞周期阻滯和細(xì)胞凋亡，降低對(duì)奧沙利鉑的敏感性[57]。這些結(jié)果證實(shí)了環(huán)狀RNA在鉑類化療藥物耐藥中的重大意義，考慮到這些血清環(huán)狀RNA在監(jiān)測(cè)耐藥性方面的敏感性和特異性，其有望成為抗癌耐藥最合適的候選分子。

2.4環(huán)狀RNA與索拉菲尼耐藥 索拉非尼通過(guò)酶抑制作用抑制癌細(xì)胞增殖和癌周血供，主要是通過(guò)靶向B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸激酶(B-Raf proto-oncogene,serine/threonine kinase,BRAF)、C-Raf原癌基因絲蘇氨酸蛋白激酶(Recombinant C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase,Raf-1)、跨膜配體Fms樣酪氨酸激酶3(FMS-like Tyrosine kinase 3,FLT3)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-2/3(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2/3,VEGFR-2/3)和β型血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(Platelet-derived Growth Factor Receptor-β,PDGFR-β)等來(lái)發(fā)揮作用，特別是在調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程通路中發(fā)揮抗癌療效[58-60]。而索拉菲尼作為肝細(xì)胞癌標(biāo)準(zhǔn)靶向治療藥物之一，在全球晚期肝細(xì)胞性肝癌患者的治療中顯示其巨大作用，但其和絕大多數(shù)抗癌藥物一樣不可避免的出現(xiàn)耐藥反應(yīng)。在對(duì)索拉非尼耐藥HCC細(xì)胞系中環(huán)狀RNA的表達(dá)譜進(jìn)行分析，有582個(gè)環(huán)狀RNA差異性表達(dá)，其中272個(gè)上調(diào)，310個(gè)表達(dá)下調(diào)。通過(guò)高通量測(cè)序探索了索拉非尼耐藥HCC細(xì)胞系中差異表達(dá)的環(huán)狀RNA，鑒定出三個(gè)差異表達(dá)的環(huán)狀RNA，分別為hsa-circ-0006294、hsa-circ-0035944和hsa-circ-0084663，并預(yù)測(cè)它們?cè)谒骼颇峄熌退幹锌赡芷鹬匾饔肹61]。

2.5環(huán)狀RNA與免疫治療耐藥 目前，抗PD-1作為癌癥臨床免疫治療的代表，顯示出其優(yōu)越的應(yīng)用前景[62]。PD1是一種抑制性受體，可在活化的淋巴細(xì)胞表面表達(dá)[63]。以肝細(xì)胞為例，PD1可以在肝癌患者的NK細(xì)胞上過(guò)度表達(dá)，并促進(jìn)激活的NK細(xì)胞功能失調(diào)[64-65]。在肝癌細(xì)胞中，可通過(guò)上調(diào)circUHRF1的表達(dá)，使circUHRF1/miR-449c-5p軸不再抑制TIM-3的表達(dá)，從而抑制NK細(xì)胞發(fā)揮其功能。功能性實(shí)驗(yàn)表明，將敲除circUHRF1的基因?qū)敫伟┘?xì)胞后，抗PD1治療的敏感性可增加。這些結(jié)果表明，過(guò)表達(dá)circUHRF1可能會(huì)阻礙肝癌對(duì)抗PD1治療的反應(yīng)，靶向circUHRF1可能是恢復(fù)肝癌對(duì)抗PD1治療敏感性的一種有效方法[66]。

2.6環(huán)狀RNA與內(nèi)分泌治療 苯扎魯胺(Enzalutamide,Enz)是第二代內(nèi)分泌治療藥物，它可以競(jìng)爭(zhēng)性地與雄激素受體(Androgen Receptor,AR)結(jié)合，招募共激活劑，與AR DNA結(jié)合，激活A(yù)R靶基因[67]，但在治療后的2～3年內(nèi)，大多數(shù)患者會(huì)發(fā)展成去勢(shì)抵抗型前列腺癌(Castration-resistant Prostate Cancer,CRPC)[68]。在苯扎魯胺耐藥(Enzalutamide-resistant,EnzR)的前列腺癌細(xì)胞中，檢測(cè)到circUCK2和10-11轉(zhuǎn)位酶1(Ten-eleven Translocation1,TET1)低表達(dá)，而miR-767-5p顯著表達(dá)。此外，上調(diào)circUCK2的表達(dá)水平，則miR-767-5p表達(dá)減少，靶基因TET1表達(dá)增加，并且出現(xiàn)癌細(xì)胞增殖和侵襲速度減慢。由此可推斷circUCK2在前列腺癌去勢(shì)、EnzR以及前列腺癌的發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[69]。在未來(lái)的臨床治療中，可通過(guò)檢測(cè)TET1的表達(dá)明確前列腺癌的進(jìn)展，使用TET1激動(dòng)劑或上調(diào)TET1的表達(dá)來(lái)輔助治療。他莫昔芬(Tamoxifen，TAM)是一種選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，廣泛用于乳腺癌的治療，然而接受TAM治療的患者中有30 %～40 %在15年內(nèi)復(fù)發(fā)，成為典型的TAM耐藥腫瘤[70-71]。在構(gòu)建的他莫昔芬耐藥乳腺癌細(xì)胞中，通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)出，hsa-circ-0025202在癌組織中低表達(dá)，hsa-circ-0025202過(guò)表達(dá)可通過(guò)miR-1825P/FOXO3a軸實(shí)現(xiàn)抑瘤和他莫昔芬增敏作用[72]。hsa-circ-0025202可能是TAM耐藥的一個(gè)重要的、有前景的生物標(biāo)志物，這需要進(jìn)一步的臨床研究來(lái)證明。

綜上所述，耐藥已成為腫瘤治療中不可避免的一個(gè)問(wèn)題，探索癌癥化療耐藥的機(jī)制將為改進(jìn)腫瘤治療提供機(jī)會(huì)。已經(jīng)證實(shí)，環(huán)狀RNA失調(diào)與腫瘤進(jìn)展和化療耐藥密切相關(guān)。環(huán)狀RNA可在體液中大量表達(dá)，并可能以細(xì)胞和組織特異性的方式表達(dá)，它們還通過(guò)不同的生物學(xué)功能在腫瘤耐藥中發(fā)揮重要的作用。環(huán)狀RNA所特有的閉環(huán)結(jié)構(gòu)為其在體液和血液中的穩(wěn)定性存在提供了有利條件。液體活檢是一種微創(chuàng)的分析患者液體標(biāo)本的方法，已廣泛應(yīng)用于腫瘤檢測(cè)[73-74]。因此是否可將環(huán)狀RNA作為生物標(biāo)志物納入臨床檢驗(yàn)診斷，也是我們目前尚需考慮的一個(gè)方向。

3 前景及展望

越來(lái)越多的環(huán)狀RNA被證實(shí)與腫瘤藥物治療耐藥相關(guān)。因此，將環(huán)狀RNA納入臨床診斷治療，我們有兩方面需考慮。首先，其作為競(jìng)爭(zhēng)性RNA分子，可調(diào)節(jié)miRNA的表達(dá)，能夠作為臨床治療的直接靶點(diǎn)[75]。一些主要致癌環(huán)狀RNA在不少腫瘤中的表達(dá)都存在異常，并與多藥耐藥相關(guān)。對(duì)這些致癌環(huán)狀RNA的精確調(diào)控可能會(huì)在惡性腫瘤的治療中起作用。環(huán)狀RNA特有的反向剪接結(jié)構(gòu)代表了其可作為潛在的治療靶點(diǎn)，讓我們能夠更精確地調(diào)控這些致癌環(huán)狀RNA，且不會(huì)影響正常線性RNA的功能。其次，由于一些環(huán)狀RNA與miRNA結(jié)合位點(diǎn)數(shù)較多，其可作為腫瘤抑制因子成為潛在的治療靶點(diǎn)，circRNA-101505通過(guò)海綿化miR-103減輕肝癌對(duì)順鉑的耐藥性就是一個(gè)典型的例子[56]。事實(shí)上，環(huán)狀RNA的海綿作用可被用來(lái)特異性地設(shè)計(jì)和靶向致癌miRNA譜，從而發(fā)揮腫瘤治療作用。然而，實(shí)施上述任何一種策略，都將面臨一個(gè)主要挑戰(zhàn)，即如何準(zhǔn)確、安全地將環(huán)狀RNA轉(zhuǎn)運(yùn)到惡性腫瘤細(xì)胞中，并且不對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生影響。制備環(huán)狀RNA模擬物或拮抗劑，并使其在體內(nèi)保持穩(wěn)定性、生物活性以及增加靶向遞送效率是成功開發(fā)基于環(huán)狀RNA療法的關(guān)鍵因素。