向 峰

東莞康華醫(yī)院有限公司，廣東省東莞市 523000

傳染性單核細(xì)胞增多癥(Infectious mononucleosis，IM)是一種由EB病毒引起的亞急性或急性血液性疾病，其主要臨床特征有發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大及肝脾腫脹等[1]，兒童發(fā)病最常見(jiàn)。治療不及時(shí)易導(dǎo)致患者出現(xiàn)呼吸、消化、血液循環(huán)、神經(jīng)、泌尿等多器官損害，因此，早期診斷并治療意義重大。研究發(fā)現(xiàn)，EB細(xì)胞可引起B(yǎng)淋巴細(xì)胞發(fā)生變性、凋亡，并誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞發(fā)生免疫反應(yīng)，從而影響患者的免疫功能[2-3]。本研究主要探討IM患兒外周血異形淋巴細(xì)胞與T細(xì)胞亞群之間的相關(guān)性，以期為該疾病早期篩查診斷提供一定理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年6月—2019年6月在我院兒科治療的65例EB病毒感染兒童(1～14歲)(傳染性單核細(xì)胞增多癥)作為研究組，選擇同期在我院體檢中心接受體檢的65例健康兒童(1～14歲)作為對(duì)照組。傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷標(biāo)準(zhǔn)主要根據(jù)臨床癥狀和實(shí)驗(yàn)室檢查：滿足臨床癥狀中的任意3項(xiàng)及實(shí)驗(yàn)室檢查中第4項(xiàng)；或滿足臨床癥狀中的任意3項(xiàng)及實(shí)驗(yàn)室檢查中1～3項(xiàng)中的任意1項(xiàng)則診斷為傳染性單核細(xì)胞增多癥。臨床癥狀主要有：(1)發(fā)熱；(2)咽峽炎；(3)頸部淋巴結(jié)腫大；(4)肝臟腫大；(5)脾臟腫大；(6)眼瞼腫大。實(shí)驗(yàn)室檢查主要有：(1)CA-IgM和CA-IgG陽(yáng)性，且NA-IgG陰性；(2)CA-IgM陰性，但抗CA-IgG抗體陽(yáng)性；(3)雙份血清抗CA-IgG抗體滴度4倍及以上；(4)外周異形淋巴細(xì)胞比例≥10%。兩組兒童的性別、年齡、身高和體重均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。所有患兒家長(zhǎng)均簽署知情同意書(shū)，并自愿參加本次研究。

1.2 方法

1.2.1 異形淋巴細(xì)胞測(cè)定：取適量血滴制成涂片，瑞氏染色后，由專業(yè)計(jì)數(shù)人員計(jì)算異形淋巴細(xì)胞亞群比值。

1.2.2 淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定：取患兒清晨空腹血，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞亞群(CD3+T淋巴細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS22.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，組間計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IM組和對(duì)照組兒童異形淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群比較 IM組兒童異形淋巴細(xì)胞顯著性增加，與對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與對(duì)照組兒童相比，IM組兒童CD3+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞顯著增加，而CD4+T淋巴細(xì)胞、CD4+/CD8+、NK細(xì)胞顯著降低，且差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 IM組和對(duì)照組兒童異形淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群比較

2.2 IM組患者異形淋巴細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞的相關(guān)性分析 異形淋巴細(xì)胞與CD3+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞呈正相關(guān)，與CD4+/CD8+和NK細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)；與T淋巴細(xì)胞總數(shù)、活化T淋巴細(xì)胞呈正相關(guān)，與調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)。見(jiàn)表2。

3 討論

EB病毒是一種雙鏈DNA病毒，具有嗜B細(xì)胞特性。傳染性單核細(xì)胞增多癥(IM)主要是由原發(fā)性EB病毒感染所導(dǎo)致的一種亞急性或急性全身性疾病。嬰幼兒IM患者常常無(wú)明顯癥狀或僅有輕微的不典型癥狀；年長(zhǎng)患者發(fā)病初期常伴隨乏力、頭痛、畏寒、惡心等輕微癥狀；發(fā)病中后期主要的臨床表現(xiàn)有發(fā)熱、咽峽炎、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大、皮膚黏膜皮疹等[4]。由于IM發(fā)病初期癥狀不明顯，導(dǎo)致其早期診斷比較困難。研究顯示，血清異形淋巴細(xì)胞比例可以評(píng)估IM疾病的嚴(yán)重程度[5]。本研究發(fā)現(xiàn)，IM組患兒異形淋巴細(xì)胞比例為(9.57±2.61)%，顯著高于對(duì)照組的(0.67±0.19)%。異形淋巴細(xì)胞檢測(cè)方法簡(jiǎn)單快速，價(jià)格低廉，適用于基層醫(yī)院，可成為實(shí)驗(yàn)室輔助診斷IM的方式之一。

表2 異形淋巴細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞相關(guān)性分析

隨著免疫學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)，EB病毒可以引起免疫功能紊亂，尤其是T細(xì)胞免疫紊亂[6]。研究顯示，其發(fā)病機(jī)制主要是EB感染患兒并在患兒體內(nèi)細(xì)胞進(jìn)行復(fù)制，導(dǎo)致健康細(xì)胞被溶解；EB病毒被進(jìn)一步釋放到血液中，刺激CD23+B細(xì)胞增殖，與此同時(shí)，引起CD4+T淋巴細(xì)胞增殖，并釋放淋巴因子調(diào)節(jié)局部炎癥反應(yīng)；淋巴因子可以進(jìn)一步抑制被感染的CD23+B細(xì)胞增殖，并進(jìn)一步消耗CD4+T淋巴細(xì)胞[7-9]。EB病毒感染的急性期，CD8+T淋巴細(xì)胞快速活化并增殖，從而溶解破壞被感染的CD23+B細(xì)胞，抑制其異常增殖[10]。因此，CD8+T淋巴細(xì)胞和CD4+T淋巴細(xì)胞在此過(guò)程中發(fā)揮重要作用。CD4+/CD8+是反映患兒免疫功能的重要指標(biāo)。當(dāng)CD4+T淋巴細(xì)胞和CD8+T淋巴細(xì)胞異常表達(dá)，CD4+/CD8+比值降低與免疫系統(tǒng)損傷程度相關(guān)。本研究顯示，異形淋巴細(xì)胞與CD3+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞呈正相關(guān)，與CD4+/CD8+和NK細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)；與T淋巴細(xì)胞總數(shù)呈正相關(guān)，證實(shí)了以上發(fā)病機(jī)制。IM組患兒CD8+T細(xì)胞百分比顯著上升，說(shuō)明IM患兒體內(nèi)T細(xì)胞發(fā)生強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)；除此以外，CD4+T細(xì)胞百分比和CD4+/CD8+比值顯著下降，說(shuō)明IM患兒體內(nèi)免疫功能下降。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞主要有自然Treg細(xì)胞和適應(yīng)性Treg細(xì)胞[11]。CD4CD25+CD127-Treg代表自然Treg細(xì)胞，可以區(qū)別有活化效應(yīng)的輔助性T淋巴細(xì)胞[12]。本研究結(jié)果顯示，IM患兒中異形淋巴細(xì)胞與活化T淋巴細(xì)胞呈正相關(guān)，與調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與既往研究結(jié)果一致。

綜上所述，傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒體內(nèi)異形淋巴細(xì)胞比值顯著增加，且存在明顯的T淋巴細(xì)胞免疫紊亂，CD8+T淋巴細(xì)胞顯著增加，CD4+T淋巴細(xì)胞比例顯著下降；異形淋巴細(xì)胞與CD8+T淋巴細(xì)胞、CD4+/CD8+比值可能存在相關(guān)性。該結(jié)果證實(shí)了異形淋巴細(xì)胞與淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)在傳染性單核細(xì)胞增多癥診斷中的價(jià)值，并證實(shí)了EB感染可導(dǎo)致傳染性單核細(xì)胞增多癥患兒免疫功能紊亂，為臨床早期

診斷提供了理論依據(jù)。