摘 要：免疫膠體金技術多種方法結合固相標記免疫檢測技術，GICA原理是以條狀纖維層材料為固相，使樣品與層析材料待測物受體發(fā)生免疫反應。分析技術可用于家庭成員診斷保健等方面，目前廣泛應用于食品檢測、生物制劑定性等領域。今后提高靈敏度同時，膠體金免疫層析技術將向定量及多元檢測方向發(fā)展。研究介紹膠體免疫層析技術，論述食品檢測中膠體金免疫層析技術的應用。

關鍵詞：膠體金免疫層析技術;食品檢測;應用

食品安全問題是全球話題，目前食品安全出現(xiàn)生物毒素等問題，開發(fā)滿足要求的快速方便食品安全分析檢測技術非常迫切。近年來食品安全快速檢測技術包括ELISA等，ELISA法檢測時間較長，免疫層析技術是免疫與色譜層析技術結合的免疫分析法，原理是借助毛細作用使樣品溶液在層析條泳動，通過酶促顯色反應快速得到直觀實驗結果。省去繁瑣的加樣等步驟，技術適用于食品現(xiàn)場快速檢測。免疫金交通層析法具有靈敏度高，無需儀器等特點廣泛應用于食品安全檢測領域。

1.膠體金免疫層析技術研究

當前食品安全問題成為全球的公共衛(wèi)生問題，歐盟國家發(fā)現(xiàn)含有殺蟲劑氟蟲腈成分污染雞蛋，產毒菌在易感農作物中頻繁出現(xiàn)，研究食品安全快速檢測方法尤為重要，CGIS膠體金標記免疫層析技術是90年代興起的快速診斷技術，為食源性致病菌快速檢測提供解決途徑，成為食品安全快速定量檢測研究的熱點。隨著膠體金免疫層析技術的發(fā)展，將在食品安全檢測中得到廣泛應用。

1.1 膠體金免疫層析技術檢測原理

免疫層析按抗原與抗體結合方式分為競爭性與非競爭性，膠體金是繼放射性核素標記發(fā)展的固相標記物，膠體金顆粒在顯微鏡下大多為較小球形，膠體金為疏水性金溶膠，檢測中可用肉眼快速檢測樣品【1】。膠體金標記是在弱堿環(huán)境下膠體金帶負電荷，技術可形成穩(wěn)定膠體，膠體金可與其他生物大分子非共價結合，近年來膠體金標記成為重要的免疫標記技術。膠體金是在還原劑作用下聚合呈特定金顆粒，膠體金顆粒具有高電子密度特性，聚集出現(xiàn)肉眼課件粉色斑點。

1.2 免疫膠體金制備

生物納米顆粒在免疫測定中性能取決于蛋白質生物活性，制備膠體金質量關乎試條特性。膠體金制備法分為理化法，物理法包括熱分解法等，常用的為化學還原法，還原劑原理為使金粒子還原變位金原子，可制備不同大小膠體金顆?！?】。膠體金粒徑與制備加入檸檬酸鈉量相關，可通過測定吸光度確定膠體金顆粒大小。免疫膠體金制備是膠體吸附到膠體金表面，受到電解質等多方面的影響。免疫膠體金標記步驟為將蛋白質用雙蒸水透析除去電解質，用0.1mol/L的K2CO3調節(jié)膠體金pH，標記蛋白適當稀釋后滴加入膠體金中，滴加10%的BSA至濃度0.5%攪拌1h終止反應。加入等體積1%BSA溶液，獲得膠體金探針保存?zhèn)溆谩?/p>

2.膠體金免疫層析技術在食品安全檢測中的應用

近年來全球發(fā)生食源性病原微生物引起食品安全事故頻發(fā)，大腸桿菌等致癌病菌引起感染常見。目前廣泛使用的病原微生物檢測法存在過程繁瑣，不利于現(xiàn)場快速檢測等問題。研究食品安全快速檢測方法非常重要。膠體金免疫層洗發(fā)是將膠體金標記等多種方法結合的固相免疫檢測技術，具有適用于現(xiàn)場檢測等特點。食品安全檢測中膠體金免疫層析技術應用包括食品污染，食品添加劑，農藥殘留檢測等。

2.1 食品農獸藥殘留檢測

食品中農獸藥速度殘留嚴重威脅消費者的健康，由于膠體金免疫層析法簡單方便等優(yōu)點廣泛應用。研究利用膠體金標記抗幅喹諾酮類單克隆抗體制備膠體金免疫檢測失調，經LC-MS/MS法驗證檢測結果可靠【3】。研究以膠體金標記抗磺胺二甲嘧啶多克隆抗體，與高效液相色譜法對比檢測豬肉樣品檢測結果一致。阿特拉津是持久性廣譜除草劑，使用量達殘留期長，目前被列為可疑致癌物質。研究采用膠體金免疫層洗發(fā)進行檢測玉米中阿特拉津殘留實驗，通過樣品實際檢出值對比得出滿足對最高殘留限量要求。

2.2 非食品添加劑成分檢測

近年來一些食品經營者非法添加食品添加劑，研究非食用食品添加成分羅丹明B檢測技術非常迫切。大量文獻采用HPLC等方法精度滿足要求，但存在適用范圍小，操作復雜等問題。國內外相關文獻有關食品有害物檢測研究多數藥物殘留為有限量標注。羅丹明類非食品色素不允許檢出，將免疫膠體金技術用于羅丹明檢測可行。三聚氰胺是對身體有害的化工原料，研究乳制品三聚氰胺檢測方法，實驗采用膠體金免疫層析法快速檢測，對三聚氰胺定性檢測，可適用于三聚氰胺快速篩查檢測。實現(xiàn)乳制品三聚氰胺定性定量檢測。

結語

免疫膠體金技術是第四大標記技術，由于具有簡單快速等優(yōu)點，適用于批量檢測等。目前國內對膠體金免疫層析產品研究尚無成型產品，由于食品快速檢測產品市場巨大，盡快研制高質量免疫層析產品，對改善食品質量安全起到重要作用。實現(xiàn)多元檢測是未來免疫層析分析發(fā)展方向。多元檢測可在精確控制樣品加入量下對待測物定量?？赏ㄟ^復合多條件層析條方式，確定待測物含量濃度區(qū)間。提高檢測特異性對免疫層析產品非常重要。

參考文獻：

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[2]農彩美. 膠體金免疫層析技術在食品安全檢測中的應用[J]. 現(xiàn)代食品，2021，（09）：108-110.

[3]翟培，韓晉輝.膠體金免疫層析技術在食品安全現(xiàn)場快速檢測中的應用[J].現(xiàn)代農業(yè)科技，2020（04）：225-227+229.

作者簡介：

邵麗雁，1982年7月25日，女，漢，遼寧省普蘭店市人，本科，畢業(yè)院校：東北農業(yè)大學，任職單位：黑龍江省榮貝測試科技有限責任公司，職稱：初級，研究方向：食品檢驗。