溫中軍，宋宏林，鐘 愧，徐新慧，楊 俊，，5，6

（1.興業(yè)縣葵陽鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，廣西 玉林537800；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學院 藥學院，河南 新鄉(xiāng)453003；3.新鄉(xiāng)市高新醫(yī)藥研究院，河南新鄉(xiāng)453003；4.河南班廷生物科技有限公司，河南 焦作454003；5.山西中條山生物工程研究院，山西太原030012；6.山西現(xiàn)代農(nóng)產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)中心，山西太原030012）

沃柑（Orah Mandarin）源自以色列的研發(fā)，是“坦普爾”橘橙與“丹西”紅橘的雜交品種。沃柑喜溫，在有效積溫較高的地方，沃柑可溶性固體物含量高達22%～26%；而在有效積溫較低的地方，沃柑可溶性固體物含量只有14%～16%，且果實偏小，果肉的酸度增加。因此，在我國地域偏南的廣西栽培的沃柑果實果徑大、外觀好、口感佳，明顯優(yōu)于云南、湖南、四川和重慶等地栽培的沃柑[1]。廣西壯族自治區(qū)水果生產(chǎn)技術(shù)指導總站統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，2017年廣西柑橘栽培面積為44.13萬hm2，總產(chǎn)量為687萬t，產(chǎn)值達213.47億元，其中沃柑產(chǎn)業(yè)發(fā)展最快。

沃柑采摘期是1月—5月，近年來種植面積增大，春季天氣不穩(wěn)定，沃柑早春銷售壓力較大；3月氣溫回升，樹體進入春梢抽生期和開花期，營養(yǎng)消耗，果實返青，糖度下降，也影響銷售[2-3]。實行錯峰銷售，是解決沃柑產(chǎn)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵，這對沃柑的貯藏保鮮提出了更高要求。目前，柑橘多使用化學保鮮殺菌方法降低貯藏腐爛率，包括保鮮劑2,4-二氯苯氧乙酸、殺菌劑咪鮮胺、甲基托布津、抑霉唑、百菌清和敵克松。但是，化學保鮮殺菌方法均有安全隱患[4-6]。為了解決上述安全隱患，一些植物保鮮殺菌方法被開發(fā)出來，如大蒜保存法和松枝紙箱保存法。但是，這些方法的運行成本較高，不利于沃柑的規(guī)?；A藏[7]。

互葉白千層（Melaleuca alternifolia）是桃金娘科白千層屬灌木，原產(chǎn)于澳大利亞[8]，其新鮮枝葉用水蒸餾提取，得到互葉白千層精油，又稱茶樹油（Tea tree oil）。茶樹油能有效地抑制致病菌和霉菌的功效，具有抑菌、抗炎、驅(qū)蟲、殺螨的功能，且滲透性強、安全性高、無污染、無腐蝕性[9]。

茶樹油主要成分1,8-桉葉素和松油醇-4，依據(jù)國際標準化組織標準（ISO 4730—1996）、澳大利亞標準（2782—1985）、美國標準（EOA）和中國標準（GB/T 26514—2011）的規(guī)定，茶樹油中松油醇-4含量高于30%，而1,8-桉葉素含量低于8%。試驗前期研究表明，茶樹油中1,8-桉葉素產(chǎn)生藥草香，不僅有解熱、消炎、抗菌、防腐作用，而且有強促滲作用，增加其他成分進入果皮內(nèi)層?？梢哉f，茶樹油中1,8-桉葉素具備了沃柑保鮮殺菌的條件。

團隊采用基因組定點編輯強互葉白千層合成1,8-桉葉素，培育出新型互葉白千層，獲得了新型茶樹油（New tea tree oil），其粗品中1,8-桉葉素含量超過75%，松油醇-4含量低于8%[10]。基于新型茶樹油的特性，采用其配制保鮮殺菌劑，研究新型茶樹油對低溫貯藏的沃柑的保鮮時間和果實品質(zhì)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

在廣西興業(yè)縣沃柑果園選取外觀成熟、富有彈性、品相相近、無腐爛、無病蟲害的沃柑500 kg，沃柑平均質(zhì)量132.4±8.7 g。沃柑被隨機分成5組（空白對照組，0.1%新型茶樹油組，0.5%新型茶樹油組，蘇打水處理組，大蒜水處理組），每組質(zhì)量100 kg。

將每個沃柑進行標記、稱質(zhì)量，并觀察外觀，剔除不符合標準的沃柑。

1.2 新型茶樹油保鮮殺菌劑制備

用去離子水配制無任何添加劑（空白對照組），0.1%新型茶樹油（0.1%新型茶樹油組）、0.5%新型茶樹油（0.5%新型茶樹油組）的保鮮殺菌劑；另外，配制對照組，即將食用小蘇打和去離子水按1∶100的比例溶解，配制保鮮殺菌劑（蘇打水處理組）；將新鮮大蒜去皮搗碎，加入去離子水，熬成大蒜汁，冷卻，配制保鮮殺菌劑（大蒜水處理組）。

1.3 沃柑預處理和低溫貯藏

沃柑放入保鮮殺菌劑中浸泡清洗10 min，然后取出自然風干，置冷庫中貯藏。冷庫溫度保持2～6℃，濕度保持85%～90%。

1.4 試驗方法

1.4.1 沃柑測定時間

沃柑冷庫貯藏1，2，4，6，8，10，12個月后取出，并進行外觀分析和內(nèi)在品質(zhì)測定。每組每次樣品取出10 kg。

1.4.2 外觀指標

沃柑外觀指標包含果實氣味、腐爛率、失重率、冷害。鼻嗅法分析果實氣味，即以新型茶樹油氣味為10分，去離子水氣味為0分作為評判標準，讓健康受試者嗅沃柑氣味，給出相應氣味分數(shù)；采用電子天平測量單果質(zhì)量，計算失重率；肉眼觀察腐爛和冷害（褐斑病和水腫?。嬎愀癄€率和冷害率。

1.4.3 內(nèi)在品質(zhì)

沃柑內(nèi)在品質(zhì)含果實口感、可溶性固形物、可滴定酸含量、固酸比、總糖和維C含量。品嘗法判定果實口感，即以蔗糖甜度為10分，去離子水甜度為0分作為評判標準，讓健康受試者品嘗沃柑，給出相應口感分數(shù)；用手持折光儀測定果實可溶性固形物含量，酸堿滴定法測定果汁可滴定酸含量，計算固酸比；斐林試劑標定法測定總糖含量，用2,6-二氯靛酚法測定果實維C含量。

1.4.4 健康自愿者征集

試驗征集了30名健康自愿者，其中男性17人，女性13人，年齡25～55歲，平均年齡35.6±9.3歲，去嗅沃柑氣味和品嘗沃柑口感。

1.5 統(tǒng)計分析

除部分外觀指標（如腐爛、冷害）不能重復測定外，每個樣品重復測定3次，以均值±標準偏差表示，利用SPSS 19.0軟件進行方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 沃柑低溫貯藏后外觀指標的變化

2.1.1 沃柑氣味

與空白對照組沃柑相比，低溫貯藏12個月，新型茶樹油處理的沃柑氣味顯著增強（p＜0.05或0.01）。其中，沃柑氣味最好時期為低溫貯藏后第2個月（p＜0.01）；但是，低溫貯藏12個月，蘇打水或大蒜水處理的沃柑氣味無顯著改變。

沃柑冷庫貯藏后果實氣味的變化見表1。

2.1.2 腐爛率

空白對照組沃柑，低溫貯藏后第4個月出現(xiàn)腐爛現(xiàn)象；新型茶樹油處理的沃柑，低溫貯藏后第6個月（0.1%新型茶樹油處理組）或第8個月（0.5%新型茶樹油處理組）才出現(xiàn)腐敗現(xiàn)象，其腐敗率遠低于空白對照組、蘇打水處理組和大蒜水處理組（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷庫貯藏后腐爛率見表2。

表1 沃柑冷庫貯藏后果實氣味的變化/分

表2 沃柑冷庫貯藏后腐爛率 /%

2.1.3 冷害率

空白對照組沃柑，低溫貯藏后第4個月出現(xiàn)褐斑病、水腫病等冷害現(xiàn)象；新型茶樹油處理的沃柑，低溫貯藏后第6個月（0.1%新型茶樹油處理組）或第8個月（0.5%新型茶樹油處理組）才出現(xiàn)冷害現(xiàn)象，其冷害率遠低于空白對照組、蘇打水處理組和大蒜水處理組（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷庫貯藏后冷害率見表3。

表3 沃柑冷庫貯藏后冷害率/%

2.1.4 失重率

低溫貯藏12個月，沃柑的失重率逐漸增高，但是各組間（空白對照組、0.1%新型茶樹油處理組、0.5%新型茶樹油處理組、蘇打水處理組和大蒜水處理組）的失重率無明顯差異（p＞0.05）。

2.2 沃柑低溫貯藏后內(nèi)在品質(zhì)的變化

2.2.1 沃柑口感

與空白對照組相比，低溫貯藏12個月，新型茶樹油處理的沃柑口感顯著提升（p＜0.05或0.01）。其中，沃柑口感最好時期為低溫貯藏后第4個月（p＜0.01）。同樣，與空白對照組相比，低溫貯藏12個月，蘇打水或大蒜水處理的沃柑口感也顯著提升，但是口感增強幅度遠不如新型茶樹油處理組（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷庫貯藏后口感的變化見表4。

表4 沃柑冷庫貯藏后口感的變化/分

2.2.2 總糖含量

低溫貯藏12個月，各組的沃柑總糖含量均升高。沃柑總糖含量升高幅度由強到弱的排序是0.5%新型茶樹油處理組、0.1%新型茶樹油處理組、大蒜水處理組、蘇打水處理組、空白對照組，各組間沃柑總糖含量變化相差顯著（p＜0.05或0.01）。

沃柑冷庫貯藏后總糖含量變化見表5。

2.2.3 維C含量

低溫貯藏12個月，各組的沃柑維C含量均升高。沃柑維C含量升高幅度由強到弱的排序是0.5%新型茶樹油處理組、0.1%新型茶樹油處理組、大蒜水處理組或蘇打水處理組、空白對照組，各組間沃柑維C含量變化相差顯著（p均＜0.05或0.01）。

表5 沃柑冷庫貯藏后總糖含量變化 /g

沃柑冷庫貯藏后維C含量變化見表6。

表6 沃柑冷庫貯藏后維C含量變化/g

2.2.4 可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比

低溫貯藏12個月，各組間（空白對照組、0.1%新型茶樹油處理組、0.5%新型茶樹油處理組、蘇打水處理組和大蒜水處理組）的可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比無明顯差別（p＞0.05）。

3 討論

互葉白千層（Melaleuca alternefolia）是澳大利亞土著人抗炎鎮(zhèn)痛、促進傷口愈合的植物藥[5]，其新鮮枝葉經(jīng)水蒸餾后得到茶樹油（Tea tree oil），香味獨特，具有殺菌抑菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抗敏止癢、促進傷口愈合的效果，且安全無毒。團隊發(fā)明“基因組定點編輯植物天然產(chǎn)物合成”技術(shù)，培育出新型互葉白千層，其新鮮枝葉經(jīng)水蒸餾后得到新型茶樹油（1,8-桉葉素含量＞75%）。研究發(fā)現(xiàn)，茶樹油中1,8-桉葉素不僅有解熱、消炎、抗菌、防腐作用，而且有強促滲作用，增加其他成分進入果皮內(nèi)層[8]。采用新型茶樹油配制噴灑劑，不僅預防沃柑病蟲害，還提升沃柑果實的外觀指標（氣味、單果質(zhì)量和果皮厚度）和內(nèi)在品質(zhì)（口感、可溶性固形物、可滴定酸、總糖和維C含量和固酸比）[9]。新型茶樹油是一種無污染、安全、可配制噴灑劑，不僅防治病蟲害，還能提升沃柑果實品質(zhì)。然而，新型茶樹油是否對采摘后沃柑果實貯藏影響，尚未見報道。

試驗研究沃柑外觀指標顯示，新型茶樹油不僅提升低溫貯藏的沃柑氣味，還降低低溫貯藏沃柑的腐爛率和冷害率，說明新型茶樹油可延長沃柑的低溫貯藏期。另外，試驗研究沃柑內(nèi)在品質(zhì)也顯示，新型茶樹油不僅提升低溫貯藏沃柑口感，還提高低溫貯藏沃柑的總糖含量和維C含量，說明新型茶樹油可提高低溫貯藏沃柑的內(nèi)在品質(zhì)。

試驗研究結(jié)果表明，新型茶樹油對低溫貯藏沃柑的失重率（外觀指標）、可溶性固形物、可滴定酸含量和固酸比（內(nèi)在品質(zhì)）影響與蘇打水處理組、大蒜水處理組和空白對照組無顯著差別，說明新型茶樹油對低溫貯藏沃柑的常規(guī)變化（如失重、可溶性固形物和酸性物質(zhì)）無影響，這可能與新型茶樹油的水溶特性，且配比容量（0.1%和0.5%）過低有關(guān)。

新型茶樹油（1,8-桉葉素含量＞75%）是如何保護沃柑低溫貯藏質(zhì)量，延長沃柑貯藏期，提升沃柑果實品質(zhì)的，尚需進一步研究。預測可能是通過1,8-桉葉素果皮滲透性，調(diào)節(jié)沃柑果實生理過程來完成。

4 結(jié)論

新型茶樹油不僅能提升低溫貯藏的沃柑氣味，降低低溫貯藏沃柑的腐爛率和冷害率、延長沃柑的低溫貯藏期，還能提升低溫貯藏沃柑口感，提高總糖含量和維C含量，提升了低溫貯藏沃柑的內(nèi)在品質(zhì)。新型茶樹油是一種無污染、安全、可配制的保鮮殺菌劑的原料。