汪冠軍，宋立強(qiáng)

(西平縣人民醫(yī)院病理科，河南 西平 463900)

卵巢癌是婦科3大惡性腫瘤之一，預(yù)后最差，近20 a來其發(fā)病率以每年0.1%的速度增長，且在初期臨床癥狀較少，診斷較為困難，早期得到救治較少，5 a生存率僅為20%～30%，嚴(yán)重威脅女性的生命安全[1-2]。卵巢癌的早期篩查主要依賴于定期普查，且患者經(jīng)治療后復(fù)發(fā)率較高，復(fù)發(fā)后并無有效的治療方法，因而分析有效的生物標(biāo)志物對(duì)疾病的預(yù)防、預(yù)后評(píng)估均具有一定的價(jià)值[3-4]。葉酸結(jié)合蛋白1(folate binding protein 1, FOLR1)、間皮素(mesothelin, MSLN)在卵巢癌的進(jìn)程中研究相對(duì)較少，其表達(dá)機(jī)制目前尚存在爭(zhēng)議[5]?；诖?，本研究旨在分析FOLR1、MSLN蛋白在卵巢癌組織中表達(dá)的變化及臨床病理意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析2017年7月至2019年9月西平縣人民醫(yī)院收治的90例卵巢癌患者的臨床資料。所有患者均符合卵巢癌相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，B超、CT等影像學(xué)及組織活檢確診，并排除子宮內(nèi)膜異位癥、轉(zhuǎn)移癌患者。病理類型：漿液性囊腺癌56例，子宮膜樣癌27例，黏液性囊腺癌7例；分化程度：中低分化75例，高分化15例；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期30例，Ⅲ～Ⅳ期60例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有24例，無66例。收集上述患者術(shù)后切除癌組織，質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%中性多聚甲醛溶液固定24 h(標(biāo)本離體到固定時(shí)間需<0.5 h)，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片。同時(shí)選擇交界性卵巢腫瘤組織標(biāo)本15例、正常卵巢組織標(biāo)本30例作為對(duì)照。

1.2 標(biāo)本處理方法標(biāo)本切片后進(jìn)行免疫組化染色：將組織放置于60 ℃烤箱中拷片(>30 min)，采用二甲苯(或二甲苯替代品)為石蠟切片脫蠟，再用無水乙醇梯度稀釋液回水。蘇木素-伊紅染色：利用細(xì)胞內(nèi)外的酸堿度與蘇木素、伊紅進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，細(xì)胞核與蘇木素呈藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)與伊紅呈紅色。采用中性樹膠、甘油等封片。每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野，若細(xì)胞膜著色則表示蛋白表達(dá)。并根據(jù)染色強(qiáng)度進(jìn)行計(jì)分，棕褐色3分、棕黃色2分、淺黃色1分、未著色0分；再根據(jù)染色陽性率計(jì)分，無陽性0分、1%～25% 1分、26%～50% 2分、51%～75% 3分、76%～100% 4分。將染色強(qiáng)度與染色陽性率計(jì)分的乘積作為最終判斷蛋白表達(dá)的結(jié)果，≤4分表示蛋白表達(dá)陰性，>4分則表示蛋白表達(dá)陽性。免疫組染色化試劑盒購自美國Thermo Fisher Scientific公司。

1.3 指標(biāo)評(píng)價(jià)按照上述方法檢測(cè)和比較分析不同卵巢組織中FOLR1、MSLN蛋白的表達(dá)，并分析FOLR1、MSLN表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 FOLR1、MSLN蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá)卵巢癌組織中FOLR1、MSLN的陽性率分別為86.67%、61.11%，明顯高于交界性卵巢腫瘤組織(6.67%、13.33%)、正常卵巢(3.33%、0.00%)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=84.053，P<0.001；χ2=40.218，P<0.001)。見表1。

表1 FOLR1、MSLN蛋白在不同卵巢組織中的表達(dá) n(%)

2.2 FOLR1、MSLN蛋白表達(dá)與卵巢癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系卵巢癌組織中FOLR1表達(dá)與其臨床分期關(guān)系密切(χ2=18.281，P<0.001)；卵巢癌組織中MSLN表達(dá)與其臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切(χ2=11.314，P=0.001；χ2=6.800，P=0.009)。見表2、3。

3 討論

卵巢癌早期癥狀不明顯，缺乏特異性癥狀，臨床早期診斷較為困難，約2/3患者就診時(shí)已經(jīng)處于晚期，而早期發(fā)現(xiàn)、診斷及治療可降低病死率，因而卵巢癌的早期診斷是臨床治療的關(guān)鍵，尋找準(zhǔn)確率較高的診斷方法極為重要[7]。隨著對(duì)腫瘤發(fā)病機(jī)制的深層次研究，發(fā)現(xiàn)多種基因共同參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展這一過程，因而尋找敏感的生物標(biāo)志物對(duì)于疾病的診斷、治療、預(yù)后等均具有一定的價(jià)值。FOLR1蛋白屬于糖基化磷脂酰基醇偶聯(lián)蛋白，對(duì)葉酸與其衍生物的親和力較高[8]。既往研究[9-10]發(fā)現(xiàn)，在惡性腫瘤組織中FOLR1蛋白呈現(xiàn)高表達(dá)，在正常組織中表達(dá)較低，且發(fā)現(xiàn)上調(diào)FOLR1的表達(dá)可增加葉酸的攝取量，從而保證機(jī)體的需求。根據(jù)上述研究可推測(cè)出FOLR1蛋白在卵巢癌組織中呈高表達(dá)。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)OLR1蛋白表達(dá)從正常卵巢組織、交界性卵巢腫瘤組織到卵巢癌組織的陽性率不斷增加，且卵巢癌組織中FOLR1蛋白陽性率高于交界性卵巢腫瘤組織和正常卵巢組織。這也驗(yàn)證了之前的推測(cè)。

表2 FOLR1蛋白表達(dá)與卵巢癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 n(%)

表3 MSLN蛋白表達(dá)與卵巢癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系 n(%)

MSLN蛋白屬于一種細(xì)胞表面糖蛋白，在多種實(shí)體瘤組織中均有表達(dá)，與細(xì)胞的存活、增殖、黏附以及腫瘤的進(jìn)展均具有一定的關(guān)系，且有研究指出MSLN蛋白除了可以用于評(píng)估腫瘤治療的效果，也可作為潛在的腫瘤治療靶點(diǎn)[11-12]。本研究結(jié)果還顯示，MSLN蛋白在卵巢癌組織中的陽性率明顯高于交界性卵巢腫瘤組織、正常卵巢組織，提示了MSLN蛋白作為卵巢癌的早期診斷標(biāo)志的可行性。

梁振等[13]研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)OLR1、MSLN蛋白表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理參數(shù)具有一定的關(guān)系。本研究通過分析FOLR1、MSLN蛋白與卵巢癌患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，卵巢癌組織中FOLR1蛋白表達(dá)與其臨床分期關(guān)系密切，MSLN蛋白表達(dá)與其臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，由此提示FOLR1、MSLN蛋白表達(dá)的異常可提示卵巢癌病情程度，從而評(píng)估患者的預(yù)后。目前，關(guān)于卵巢癌的腫瘤標(biāo)志物較多，且大多采用血清標(biāo)本檢測(cè)，而通過檢測(cè)人體組織中的生物標(biāo)志物相對(duì)穩(wěn)定，可降低外在因素的影響，進(jìn)行預(yù)后更為準(zhǔn)確的評(píng)估，也為臨床治療方式的選擇提供新的思路[14-15]。

綜上所述，F(xiàn)OLR1、MSLN蛋白表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理參數(shù)具有相關(guān)性，共同參與疾病的進(jìn)程，通過檢測(cè)FOLR1、MSLN蛋白表達(dá)可評(píng)估卵巢癌的治療及預(yù)后情況。