張富貴,趙 清

1.四川省綿陽市三臺縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川綿陽 621100;2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400010

骨骼是一種特殊的結(jié)締組織，能夠通過破骨細(xì)胞吸收舊骨，成骨細(xì)胞形成新骨，二者相互配合以完成骨骼的重塑，這一過程被稱為骨轉(zhuǎn)換。在骨轉(zhuǎn)換過程中，骨基質(zhì)的主要成分Ⅰ膠原蛋白在降解和形成過程中會產(chǎn)生多種代謝產(chǎn)物，這一類可以在血液、尿液和其他體液中檢測到的生化物質(zhì)被稱為骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物。Ⅰ型膠原羧基端肽β特殊序列(β-CTx)就是其中一種國際上公認(rèn)的反映骨吸收的標(biāo)志物，可以反映破骨細(xì)胞的活性，其水平的高低可反映骨重塑過程中溶骨性骨代謝指標(biāo)的轉(zhuǎn)變，增高時說明骨吸收程度增加，骨質(zhì)流失增加。本研究擬通過收集表觀健康體檢人群的β-CTx結(jié)果進(jìn)行相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)分析，按性別、年齡建立其在重慶地區(qū)的參考區(qū)間。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院2019年1月至2020年7月的健康體檢人群共4 918例，按性別和年齡分為4組，男性青年組(19～44歲)2 835例，男性中年組(>44～59歲)336例，女性青年組(19～44歲)1 544例，女性中年組(>44～59歲)203例。所選人群經(jīng)查閱其相應(yīng)的體檢項(xiàng)目均無影響骨代謝的相應(yīng)疾病，如：肝臟疾病、腎臟疾病、甲狀腺疾病等。清晨采集所有研究對象空腹靜脈血3 mL，及時分離血清，3 h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器與試劑 Roche Cobas6000全自動電化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑、校準(zhǔn)品，質(zhì)控品選用伯樂液體質(zhì)控。

1.3方法 β-CTx檢測方法為電化學(xué)發(fā)光法。檢測前對儀器按要求完成相應(yīng)的每日保養(yǎng)及質(zhì)控；試劑更換批號時進(jìn)行校準(zhǔn)并完成質(zhì)控。各校準(zhǔn)及質(zhì)控均符合要求，詳細(xì)記錄檢驗(yàn)結(jié)果，并查閱其相應(yīng)的體檢項(xiàng)目，剔除不符合納入標(biāo)準(zhǔn)的樣本數(shù)據(jù)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理。不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以M(P25,P75)表示，采用多個獨(dú)立樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)(Mann-Whitney檢驗(yàn))。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1各組數(shù)據(jù)按《臨床實(shí)驗(yàn)室如何確定和建立生物參考區(qū)間-核準(zhǔn)指南第2版》要求，采用SPSS中的explore查找并剔除各離群值前后的水平分布，見圖1、圖2。

圖1 剔除離群值前血清β-CTx水平分布

圖2 剔除離群值后血清β-CTx水平分布

2.2男性和女性β-CTx檢測結(jié)果比較 男性和女性β-CTx水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 男性和女性β-CTx檢測結(jié)果比較 [M(P25,P75)，μg/L]

2.3各實(shí)驗(yàn)室男性和女性β-CTx參考區(qū)間比較 根據(jù)非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以2.5%和97.5%的百分位點(diǎn)表示95%置信區(qū)間，本實(shí)驗(yàn)室建立的參考區(qū)間見表2。通過與廠商試劑說明書和上海等地區(qū)提供的參考區(qū)間比較發(fā)現(xiàn)，β-CTx之間的差異比較明顯，不能直接應(yīng)用。

表2 各實(shí)驗(yàn)室男性和女性β-CTx參考區(qū)間比較(P2.5～P97.5，μg/L)

3 討 論

骨質(zhì)疏松癥被稱為寂靜的殺手，是一種由多因素所致的系統(tǒng)性骨病，其主要特點(diǎn)是人體內(nèi)骨的質(zhì)與量都相應(yīng)下降，骨更加脆弱，導(dǎo)致人們在日常生活中甚至無明顯外傷的情況下也容易發(fā)生骨折[1-2]。中國與許多發(fā)展中國家乃至發(fā)達(dá)國家遭受骨質(zhì)疏松癥折磨的老年患者數(shù)量日益增加，骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)成為全世界面臨的一個巨大難題與挑戰(zhàn)。骨質(zhì)疏松癥在中國各地及其他發(fā)展中國家已達(dá)到流行水平，對各國龐大的老年人群來說，已經(jīng)造成了巨大威脅，尤其是絕經(jīng)后的老年女性。隨著社會人口的老齡化及人口平均壽命不斷提升，我國乃至全世界骨質(zhì)疏松癥患者數(shù)量日益增多。長期以來，人們對骨質(zhì)疏松癥的認(rèn)識都非常淺顯，大部分人認(rèn)為這只是缺鈣的問題或者一切歸因于年齡。因此,目前在我國骨質(zhì)疏松癥已經(jīng)發(fā)展為一個急需解決的公共衛(wèi)生問題。對于中老年人來說，他們是患骨質(zhì)疏松癥的高危人群，并且造成骨質(zhì)疏松的成因更復(fù)雜，一旦發(fā)生骨質(zhì)疏松性骨折，大都會長時間臥床不起，患者失去自理能力，給自身和家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。久而久之，其他各種并發(fā)癥接踵而至，嚴(yán)重者甚至出現(xiàn)死亡。

骨質(zhì)疏松癥的病理學(xué)多種多樣，導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的因素有許多，與許多導(dǎo)致骨重塑損傷的危險(xiǎn)因素有關(guān)，其中包括低運(yùn)動量、低鈣攝入或營養(yǎng)缺乏、低體質(zhì)量、家族史等，慢性腎病、脂肪瀉、糖尿病、類風(fēng)濕等慢性病患者亦常常患有骨質(zhì)疏松癥。目前，由于雙能X線吸收測量法(DEXA)具有快速、高精度測量骨密度的優(yōu)點(diǎn)，是臨床診斷骨質(zhì)疏松癥的金標(biāo)準(zhǔn)[3-4]。但是，用DEXA測定骨密度來進(jìn)行療效評估顯得不及時，往往需要1～2年的時間才能顯示出骨密度的變化，無法實(shí)時動態(tài)反映骨代謝及骨轉(zhuǎn)化率。而骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物在治療早期就出現(xiàn)改變，因此，用于抗骨吸收療效的判斷具有很高的臨床應(yīng)用價(jià)值，同時其短期內(nèi)水平的變化與若干年后的骨質(zhì)增加也具有很好的相關(guān)性[5]。

早在2004年血清骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物(BTM)就被美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會推薦用于評估個體骨代謝的變化。BTM是在骨轉(zhuǎn)換過程中產(chǎn)生的，包含各種酶及其來自骨細(xì)胞和骨基質(zhì)成分的分解產(chǎn)物。Ⅰ型膠原N端前肽和β膠原特殊序列是目前大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室開展的項(xiàng)目。由于Ⅰ型膠原C端肽在血液中不被降解，因此可直接反映骨基質(zhì)膠原蛋白的降解活性，并且在成熟膠原蛋白降解過程中，C末端肽α天冬氨酸轉(zhuǎn)化為β天冬氨酸，因此檢測到的β膠原特殊序列反映了個體實(shí)時的骨吸收狀態(tài)，反映了骨吸收程度的增加，這在骨質(zhì)疏松癥患者中最常見。與DEXA測定骨密度比較，測定BTM更能迅速、無創(chuàng)、早期反映骨組織的合成和分解代謝，從而反映成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞在骨重建中的活性，這對骨代謝疾病的篩查、診斷、治療評估等至關(guān)重要。

以前認(rèn)為檢測β-CTx沒有必要分性別設(shè)定參考區(qū)間，現(xiàn)在有研究認(rèn)為BTM在性別之間存在差異，并且在不同年齡段差異也很大，如李梅等[6]在對不同年齡段健康漢族男女性血清β膠原特殊序列水平分析中發(fā)現(xiàn)，同年齡組男性血清β膠原特殊序列水平高于絕經(jīng)前女性，但同年齡組絕經(jīng)后女性血清水平相反，絕經(jīng)后女性血清水平高于同年齡組男性。表明在女性絕經(jīng)以前，男性的骨代謝狀態(tài)一直都要比女性更活躍，而在女性絕經(jīng)后，女性的骨代謝活躍程度則高于男性，這與顧青等[7]和袁樂永等[8]的研究結(jié)果相似，<49歲組女性血清β膠原特殊序列水平低于同年齡組男性，≥49歲組女性的血清水平則高于同年齡組男性。因此，按性別、年齡分組建立β-CTx的參考值尤其必要。

本研究依據(jù)世界衛(wèi)生組織對年齡分段做出的新界定，18～44歲為青年人，>44～60歲為中年人，>60歲為老年人。通過性別和年齡分組分析發(fā)現(xiàn)，不同年齡、不同性別人群的β-CTx參考范圍差異明顯。

本研究結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)室β-CTx參考區(qū)間不僅與廠商提供的參考值差異甚大，同時，通過與上海地區(qū)、上海臨港地區(qū)、湖北十堰地區(qū)的β-CTx參考值比較發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)間也有明顯差異[9-10]。且β-CTx具有較大的變異性，除受性別、年齡、人種、地域、骨折、懷孕哺乳、疾病、藥物、肝腎功能等不可控因素的影響外，還受晝夜節(jié)律、飲食、鍛煉等可控因素的影響。當(dāng)然，不同臨床實(shí)驗(yàn)室的儀器、試劑，以及檢測平臺的準(zhǔn)確度和精準(zhǔn)度、樣本操作、質(zhì)量控制、標(biāo)準(zhǔn)化等也會影響檢測結(jié)果的變異性。對于絕經(jīng)后的女性，血清β-CTx水平會進(jìn)一步升高，因此，在診斷骨代謝疾病時，假陽性率偏高[10]。

綜上所述，各地區(qū)建立并使用一個符合當(dāng)?shù)貙?shí)際情況的骨代謝標(biāo)志物參考區(qū)間，無論是對骨代謝疾病的預(yù)防、診斷，還是預(yù)后評估等，均具有重要價(jià)值。