于少芳,盧紅伶,陳琳,王紅芬,祝新榮
(浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 蠶桑與茶葉研究所,浙江 杭州 310021)
人類食物的種類豐富多樣,隨著人們生活水平的提高和科技的快速發(fā)展,人們對食物中營養(yǎng)元素的組分構(gòu)成越來越關(guān)注、對食物的品質(zhì)要求越來越高。昆蟲具有不飽和脂肪酸含量高、氨基酸種類齊全、營養(yǎng)成分構(gòu)成合理等優(yōu)點,是開發(fā)功能性食品的重要來源。家蠶蛹含有豐富的蛋白質(zhì),其中8種氨基酸是人體生長發(fā)育所必需的氨基酸[1-3]。家蠶蛹含有大量的油脂,不飽和脂肪酸含量高[4-5],特別是油酸、亞油酸和α-亞麻酸等多種人體必需的不飽和脂肪酸,具有較高的營養(yǎng)保健價值[6]。因此,評估不同家蠶品種蠶蛹的脂肪酸組成及含量對優(yōu)質(zhì)家蠶蛹蠶品種的培育與食藥用家蠶資源的開發(fā)利用具有重要意義。
浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑與茶葉研究所有豐富的家蠶種質(zhì)資源,但高食藥用價值的蠶品種仍是一個空白。
本實驗采用氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)檢測技術(shù),針對市場利用家蠶蛹資源開發(fā)優(yōu)質(zhì)保健食品的需求,對蠶桑與茶葉研究所16個現(xiàn)行家蠶品種的蛹油脂肪酸組成及含量進(jìn)行測定分析,評估16個家蠶品種的蠶蛹品質(zhì),為培育優(yōu)質(zhì)食藥用蠶品種提供依據(jù)。
16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹,均由浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑與茶葉研究所提供。
選取上蔟第9天的新鮮雌、雄蠶蛹樣品,經(jīng)65 ℃烘干、粉碎并過40目篩。稱取該蠶蛹粉0.2 g,加3 mL石油醚、3 mL乙醚,再加入9 mL 0.4 mol·L-1KOH-CH3OH溶液,搖勻,放置反應(yīng)約16 h。而后加入飽和的NaCl溶液加速分層,靜置20 min,取上層液,離心后取上層,揮干,加入1 mL石油醚,6 000 r·min-1離心30 min,取上層液,過膜,進(jìn)氣相。
標(biāo)液:稱取標(biāo)準(zhǔn)品適量,用石油醚配制成1 mg·mL-1濃度的液體。
標(biāo)準(zhǔn)品名稱:GLC 68A,公司:NU-CHEK PREP,INC。
采用安捷倫7890A-5975C氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國安捷倫公司)。色譜柱為DB-FFAP毛細(xì)管柱,載氣N2,柱前壓49 kPa,進(jìn)樣口溫度270 ℃,傳輸線溫度250 ℃;程序升溫設(shè)置為起始溫度170 ℃,以15 ℃·min-1升至220 ℃,保持30 min;進(jìn)樣量1 μL;分流比40∶1。
采用索氏提取法檢測蠶蛹出油率。稱取粉碎過篩后的蠶蛹粉1 g,全部移入稱重過的濾紙筒內(nèi)。將濾紙筒放入脂肪抽提器內(nèi),連接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器抽提冷凝管上端加入無水乙醚或石油醚至瓶內(nèi)容積的2/3處,于水浴上加熱,使乙醚或石油醚不斷回流提取,一般抽提6~12 h。取下接收瓶,回收乙醚或石油醚,待接收瓶內(nèi)乙醚剩1~2 mL時在水浴上蒸干,再用95~105 ℃干燥2 h,放入干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱量。將提取油脂后的蠶蛹粉包烘干稱重,重復(fù)2次,結(jié)果取平均值。
利用GC-MS檢測16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量,并對比脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品確定家蠶蛹脂肪酸的成分(表1)。16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量為25%~45%,品種間差異明顯,且雌、雄蛹之間含量差別大。其中含油率最高是平30B的雄蛹,最低的是卵明的雌蛹。將脂肪酸相對含量<0.15%的忽略,蠶蛹樣品中檢測到的脂肪酸成分為7~10個,不同品種之間成分差別不明顯。而蠶蛹樣品中脂肪酸含量>0.5%的成分有6類,分別是C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸、C16∶0棕櫚酸、C18∶2亞油酸、C18∶0硬脂酸、C16∶1棕櫚油酸,其中C18∶3亞麻酸的含量高達(dá)30%。
表1 不同品種家蠶蛹的脂肪酸成分和含量分析
在雌蛹中,不飽和脂肪酸相對含量C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸(圖1)。雌蛹中相對含量最高的脂肪酸為C18∶3亞麻酸,其相對含量>40%的品種有11個,最高的品種為限菁A,高達(dá)45.59%。最低的品種為云7,為36.66%。蠶蛹中相對含量最低的脂肪酸為C16∶1棕櫚油酸;C18∶1油酸的相對含量與C16∶0棕櫚酸的相對含量接近;C18∶2亞油酸的相對含量與C18∶0硬脂酸的相對含量相差無幾。
圖1 不同品種雌蠶蛹的脂肪酸相對含量
在雄蛹中,不飽和脂肪酸相對含量C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸(圖2)。雄蛹中相對含量最高的脂肪酸為C18∶3亞麻酸。其中最高的品種為限菁A,高達(dá)38.50%;最低的品種為卵82B雄,為32.37%。各種脂肪酸相對含量趨勢與雌蛹一致。
圖2 不同品種雄蠶蛹的脂肪酸相對含量
家蠶雌、雄蛹中均含有C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸、C16∶0棕櫚酸、C18∶2亞油酸、C18∶0硬脂酸、C16∶1棕櫚油酸這6大類脂肪酸,且其相對含量趨勢一致,都是C18∶3亞麻酸>C18∶1油酸>C16∶0棕櫚酸>C18∶2亞油酸>C18∶0硬脂酸>C16∶1棕櫚油酸。從圖2可知,蠶蛹各脂肪酸C18∶3亞麻酸、C18∶1油酸與C18∶2亞油酸三者具有相關(guān)關(guān)系,本文將16個不同家蠶品種蠶蛹的6種脂肪酸進(jìn)行相關(guān)關(guān)系分析,相關(guān)系數(shù)見表2。相關(guān)系數(shù)的絕對值>0.8為強(qiáng)相關(guān)關(guān)系,0.3~0.8為弱相關(guān)關(guān)系。其中,C18∶1油酸與C18∶2亞油酸和C18∶3亞麻酸均呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)分別為-0.878和-0.800。C16∶1棕櫚油酸與C18∶2亞油酸呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為-0.810。其他脂肪酸之間相關(guān)關(guān)系均為弱相關(guān)關(guān)系。
表2 蠶蛹中各脂肪酸之間的相關(guān)性
本實驗利用GC-MS測定了16個家蠶品種的雌、雄蠶蛹脂肪酸含量和成分。分析結(jié)果顯示,不論是蠶蛹的出油率還是脂肪酸相對含量,品種間的差異較大,具有一定的品種和性別特異性。雄蛹的含油率高于雌蛹,但是雌蛹中的不飽和脂肪酸C18∶3亞麻酸高于雄蛹。其中含油率最高的是平30B品種的雄蛹,而不飽和脂肪酸C18∶3相對含量最高的是限菁A品種的雌蛹。蠶蛹各脂肪酸之間具有一定的相關(guān)關(guān)系。此結(jié)果對選育高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)家蠶蛹油蠶品種具有指導(dǎo)意義,為蠶蛹的食用化產(chǎn)業(yè)發(fā)展奠定基礎(chǔ)。
我國家蠶種質(zhì)資源豐富,蠶桑產(chǎn)業(yè)在世界上占據(jù)主導(dǎo)地位。但目前為止,家蠶品種應(yīng)用仍注重于繭絲的利用,綜合開發(fā)與利用嚴(yán)重不足,長期以來蠶蛹僅作為動物的飼料或廢棄物,浪費(fèi)相當(dāng)嚴(yán)重,家蠶蛹作為食藥用資源開發(fā)尚處于初期。開發(fā)家蠶的食藥用價值需要品種與技術(shù)的創(chuàng)新,具有特定食藥用價值蠶品種的培育是家蠶食藥用產(chǎn)業(yè)化利用的基礎(chǔ),對促進(jìn)蠶絲產(chǎn)業(yè)綜合效益的提高具有一定的現(xiàn)實意義。