賀 英，王 靜，薛乾隆，馬 會(huì)

河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院:1.婦科;2.急診科，河北張家口 075000

子宮內(nèi)膜癌是近年來女性最為常見的生殖系統(tǒng)腫瘤之一，有研究指出，子宮內(nèi)膜癌的臨床發(fā)病率占女性所有惡性腫瘤中的8%左右，并位于生殖器官惡性腫瘤第二位[1]。流行病學(xué)研究顯示，近年來我國子宮內(nèi)膜癌的臨床發(fā)病率逐年呈現(xiàn)明顯的上升趨勢(shì)，在西方發(fā)達(dá)國家，隨著普遍開展宮頸癌篩查等工作，雖然宮頸癌的發(fā)病率得到有效控制，但子宮內(nèi)膜癌已逐漸成為最常見的惡性婦科腫瘤[2-3]。一般情況下，絕經(jīng)后婦女是子宮內(nèi)膜癌的高發(fā)人群，臨床多表現(xiàn)為絕經(jīng)后陰道流血等癥狀，采用超聲檢查常提示宮腔占位或子宮內(nèi)膜增厚[4]。臨床中常采用細(xì)胞學(xué)檢查、超聲等手段對(duì)子宮內(nèi)膜癌進(jìn)行鑒別和診斷。此外，有研究指出，糖類抗原(CA)125等血清學(xué)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)可有效鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌[5]，但CA125在臨床應(yīng)用中仍缺乏靈敏度、特異度，且陽性率較低。目前研究認(rèn)為，能量代謝、物質(zhì)代謝與腫瘤的生物學(xué)特性密切相關(guān)[6]。丙酮酸激酶M2型(PKM2)參與腫瘤代謝調(diào)控，并與多種腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。有研究指出，細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白5(CDCA5)在黑色素瘤、胃癌、乳腺癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌等多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)狀態(tài)，且與患者預(yù)后質(zhì)量密切相關(guān)[7]。但PKM2和CDCA5在鑒別診斷絕經(jīng)后宮腔積液和子宮內(nèi)膜癌中的應(yīng)用仍鮮有報(bào)道，因此本文選擇本院收治的絕經(jīng)后宮腔積液和子宮內(nèi)膜癌患者作為研究對(duì)象，分析絕經(jīng)后宮腔積液患者血清PKM2和CDCA5檢測(cè)對(duì)子宮內(nèi)膜癌的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年2月至2019年12月本院收治的150例絕經(jīng)后宮腔積液患者作為研究對(duì)象，且以宮腔鏡子宮內(nèi)膜活檢術(shù)后石蠟切片病理報(bào)告作為金標(biāo)準(zhǔn)，分為宮腔積液組和子宮內(nèi)膜癌組。宮腔積液組共83例，平均(60.38±2.94)歲，平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(24.37±0.51)kg/m2，平均絕經(jīng)年齡為(49.83±1.03)歲，平均絕經(jīng)時(shí)間為(10.55±1.72)年，子宮內(nèi)膜癌組共67例，平均(60.43±30.13)歲，平均BMI(24.26±0.63)kg/m2，平均絕經(jīng)年齡為(50.01±1.03)歲，平均絕經(jīng)時(shí)間為(10.42±2.03)年。選擇同期在本院進(jìn)行體檢的50例體檢健康者作為對(duì)照組，平均(60.11±3.28)歲，平均BMI(24.11±0.73)kg/m2，平均絕經(jīng)年齡為(50.18±1.32)歲，平均絕經(jīng)時(shí)間為(10.63±1.67)年，各組受試者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法 采集所有受試者清晨外周空腹靜脈血3～5 mL，靜置10 min后使用低溫離心機(jī)以3 000 r/min速度離心處理10 min后吸取血清，置于-4 ℃冰箱中保存。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程對(duì)檢測(cè)儀器進(jìn)行操作，參照PKM2酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒(杭州聯(lián)科生物科技有限公司)和CDCA5酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒(杭州聯(lián)科生物科技有限公司)說明書和檢測(cè)儀器標(biāo)準(zhǔn)操作流程進(jìn)行操作，檢測(cè)受試者血清中PKM2和CDCA5水平。

2 結(jié) 果

2.1各組患者血中PKM2和CDCA5水平檢測(cè)結(jié)果 子宮內(nèi)膜癌組患者血中PKM2和CDCA5水平均明顯高于對(duì)照組和宮腔積液組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組患者血中PKM2和CDCA5水平檢測(cè)結(jié)果

2.2不同病理特征患者血中PKM2和CDCA5水平檢測(cè)結(jié)果 不同臨床分期、分化程度、肌層浸潤患者血中PKM2與CDCA5水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中不同臨床分期患者中Ⅲ/Ⅳ期患者血中PKM2和CDCA5水平最高，臨床Ⅰ期患者血中PKM2和CDCA5水平最低，不同分化程度患者中，低分化程度患者血中PKM2和CDCA5水平最高，高分化程度患者血中PKM2和CDCA5水平最低，肌層浸潤>1/2患者血中PKM2和CDCA5水平明顯高于肌層浸潤≤1/2患者，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血中PKM2和CDCA5水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 不同病理特征患者血中PKM2和CDCA5水平檢測(cè)結(jié)果

2.3患者血中PKM2和CDCA5水平與病理特征的關(guān)系 子宮內(nèi)膜癌患者血中PKM2和CDCA5水平是影響患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 患者血中PKM2和CDCA5水平與病理特征的關(guān)系

2.4患者血中PKM2和CDCA5水平鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌的價(jià)值 PKM2聯(lián)合CDCA5鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌的靈敏度、特異度及AUC均明顯高于PKM2或CDCA5的單獨(dú)應(yīng)用，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4和圖1。

表4 患者血中PKM2和CDCA5水平鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌的價(jià)值[n(%)]

圖1 ROC曲線

3 討 論

子宮內(nèi)膜癌是臨床中較為常見的發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，也是對(duì)女性生命安全造成嚴(yán)重威脅的女性生殖道惡性腫瘤[8]。目前，導(dǎo)致子宮內(nèi)膜癌發(fā)生和發(fā)展的病因尚未明確，其可能與糖尿病、不孕不育、肥胖、激素替代治療、生活飲食習(xí)慣等多種因素均存在密切關(guān)系[9]。近年來，子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì)，目前，臨床中主要依靠刮宮取病變組織行診斷性病理活檢，但刮宮術(shù)在臨床中屬于盲目性操作，且刮宮為有創(chuàng)檢查，會(huì)對(duì)部分患者造成身心傷害，并不適用于常規(guī)體檢和篩查[10]。盡管近年來子宮內(nèi)膜癌的治療和診斷取得一定進(jìn)展，但其病死率和發(fā)病率仍較高，尋找準(zhǔn)確有效評(píng)估子宮內(nèi)膜癌的生物標(biāo)志物對(duì)改善患者預(yù)后質(zhì)量和生存質(zhì)量具有重要意義[11]。血清腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用和檢測(cè)可有效輔助子宮內(nèi)膜癌的早期發(fā)現(xiàn)、鑒別診斷，并可有效分析評(píng)估子宮內(nèi)膜癌治療效果并監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)情況，具有操作方便、創(chuàng)傷小等優(yōu)點(diǎn)，已成為近年來臨床研究的熱點(diǎn)[12]。

近年來，惡性腫瘤的腫瘤細(xì)胞代謝已逐漸成為新的研究熱點(diǎn)，有學(xué)者指出，過度增殖是腫瘤細(xì)胞的重要特征，而在過度增殖過程中腫瘤細(xì)胞的能量代謝會(huì)產(chǎn)生明顯改變[13]。在腫瘤細(xì)胞的氧供應(yīng)充足情況下，腫瘤細(xì)胞糖酵解途徑依然異?；钴S，且糖酵解也是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)能的重要途徑，上述情況也被稱為瓦伯格效應(yīng)。丙酮酸激酶是細(xì)胞內(nèi)重要的代謝調(diào)控酶，也是糖酵解途徑中重要限速酶，有研究指出腫瘤細(xì)胞中M1是PK酶的剪接異構(gòu)體，PK酶為M2同工型[14]。一般情況下，嬰兒期PKM2活躍異常，在細(xì)胞快速生長時(shí)PKM2表達(dá)水平異常升高，但最終會(huì)被關(guān)閉，但PKM2會(huì)在腫瘤細(xì)胞中轉(zhuǎn)化和啟動(dòng)。有研究指出，PKM2是腫瘤能量代謝轉(zhuǎn)換標(biāo)志物，在包括肺癌、肝癌、腎癌等多種腫瘤中均處于異常高表達(dá)狀態(tài)，當(dāng)PKM2形成二聚體后瓦伯格效應(yīng)會(huì)大量激活，促進(jìn)腫瘤增殖和生長，因而PKM2可能成為治療腫瘤新的靶標(biāo)之一[15]。有學(xué)者指出，腫瘤細(xì)胞的惡性增殖在腫瘤的發(fā)生和演進(jìn)過程中扮演重要角色，而PKM2又可有效調(diào)節(jié)惡性增殖細(xì)胞信號(hào)通路[16]。既往有研究結(jié)果證實(shí)，子宮內(nèi)膜癌病理分級(jí)、手術(shù)分期與患者血清中PKM2水平密切相關(guān)，其可作為對(duì)子宮內(nèi)膜癌進(jìn)行輔助診斷的生物標(biāo)志物之一[17]。此外，有研究結(jié)果顯示[18]，子宮內(nèi)膜癌分期、病變程度與血清中PKM2水平呈正相關(guān)關(guān)系。

一般情況下，腫瘤細(xì)胞周期的異常改變可能與細(xì)胞分裂發(fā)生故障密切相關(guān)，且腫瘤細(xì)胞周期異常改變多引起腫瘤細(xì)胞增殖不受控制。有研究結(jié)果表明，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中許多細(xì)胞周期相關(guān)基因均被異常調(diào)控，而細(xì)胞周期相關(guān)基因可作為對(duì)腫瘤進(jìn)行治療的潛在藥物靶點(diǎn)[19]。CDCA5是細(xì)胞內(nèi)十分重要的分裂周期相關(guān)蛋白，其可有效促進(jìn)姐妹染色單體結(jié)合，并在姐妹染色單體準(zhǔn)確分離的過程中起到關(guān)鍵角色，CDCA5還可有效維持基因組的完整性，并調(diào)節(jié)細(xì)胞周期相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子和蛋白的活性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和參與腫瘤細(xì)胞的凋亡調(diào)控。有研究結(jié)果顯示，在肺癌組織中CDCA5水平處于異常高表達(dá)狀態(tài)，且CDCA5過表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌預(yù)后不良密切相關(guān)[20]。有研究發(fā)現(xiàn)[21]，在DNA 修復(fù)中CDCA5起到十分重要的調(diào)控作用，且CDCA5過度表達(dá)可作為預(yù)測(cè)患者不良預(yù)后的重要因素。既往研究結(jié)果顯示，CDCA5表達(dá)量升高在早期肝癌組織中呈現(xiàn)明顯的異常升高趨勢(shì)，且抑制CDCA5基因可有效降低肝癌細(xì)胞活力[22]。此外，CDCA5可作為潛在的治療腫瘤的靶點(diǎn)，并可作為評(píng)估和判斷惡性腫瘤診斷與預(yù)后的重要生物標(biāo)志物。

本研究結(jié)果顯示，相較于絕經(jīng)后宮腔積液組患者，子宮內(nèi)膜癌組患者血中PKM2和CDCA5水平均明顯升高，且不同臨床分期、分化程度、肌層浸潤患者血中PKM2和CDCA5水平存在明顯差異，其中Ⅲ/Ⅳ期患者、低分化程度患者、肌層浸潤>1/2患者血中PKM2和CDCA5水平明顯偏高，采用Logistic回歸模型分析發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌患者血中PKM2和CDCA5水平是影響患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。分析血中PKM2和CDCA5水平在鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌中的價(jià)值結(jié)果顯示，PKM2聯(lián)合CDCA5鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌的靈敏度、特異度及AUC均明顯高于PKM2或CDCA5的單獨(dú)應(yīng)用，且PKM2聯(lián)合CDCA5鑒別診斷的子宮內(nèi)膜癌的靈敏度、特異度均高于90%，且AUC大于0.9。結(jié)果提示通過聯(lián)合檢測(cè)患者血中PKM2和CDCA5可有效反映患者病變程度，并反映患者臨床分期、分化程度、肌層浸潤等病理特征，并可綜合反映患者體內(nèi)細(xì)胞增殖、凋亡及細(xì)胞活躍程度，可從多角度反映患者體內(nèi)狀態(tài)，進(jìn)而可為鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌提供數(shù)據(jù)支持。

子宮內(nèi)膜癌患者血清PKM2和CDCA5水平明顯高于宮腔積液患者，且PKM2和CDCA5聯(lián)合應(yīng)用可明顯提高鑒別診斷子宮內(nèi)膜癌臨床應(yīng)用價(jià)值。但本研究并未對(duì)患者進(jìn)行長期追蹤研究，有待后續(xù)進(jìn)一步分析患者血中PKM2和CDCA5水平與患者預(yù)后質(zhì)量的關(guān)系。