潘 猛，徐德昌，孫永敢，胡婕倫，聶少平，鐘虹光，堯梅香，謝明勇*

（1南昌大學(xué)食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 中加食品科學(xué)技術(shù)聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室（南昌） 南昌 330047 2江西江中食療科技有限公司 江西九江 330000）

全球胃、腸病患者從1985年的1.5 億人增至2011年的5 億人，預(yù)計(jì)到2025年將達(dá)7 億人。我國(guó)13 億人口中，胃、腸病患者約有1.2 億，屬全球“胃病大國(guó)”，胃、腸病已嚴(yán)重危機(jī)國(guó)民健康。胃腸道疾病涵蓋食管、胃、小腸、結(jié)腸和直腸等疾病，發(fā)病率位居前列的有急性或慢性胃炎、胃潰瘍、消化性潰瘍、功能性消化不良等[1-3]。這其中，胃病的發(fā)生和發(fā)展在一定程度上均與胃黏膜損傷有關(guān)[4]。胃黏膜損傷是指各種原因引起的胃黏膜炎性反應(yīng)，發(fā)生局部糜爛或累及黏膜肌層的壞死性缺損病變，是臨床常見(jiàn)病癥和多發(fā)病癥[5-6]。臨床上用于治療胃黏膜損傷的藥品主要有胃酸中和藥、H2 受體拮抗劑、H+泵抑制劑等，然而，服用這些藥物可能存在治療時(shí)間長(zhǎng)，愈合緩慢，復(fù)發(fā)率高，副作用大等問(wèn)題[7-9]。

大健康是根據(jù)時(shí)代發(fā)展、社會(huì)需求與疾病譜的改變而提出的一種全局理念。十九大明確提出“實(shí)施健康中國(guó)戰(zhàn)略”，同時(shí)，《國(guó)民營(yíng)養(yǎng)計(jì)劃（2017—2030年）》、《關(guān)于促進(jìn)食品工業(yè)健康發(fā)展的指導(dǎo)意見(jiàn)》 等一系列政策均明確提出鼓勵(lì)支持中醫(yī)藥功能食品、傳統(tǒng)食養(yǎng)食品，即“食藥同源”食療產(chǎn)品的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展[10-11]。如何開(kāi)發(fā)和利用“食藥同源”食療產(chǎn)品，預(yù)防和緩解人體疾病和亞健康狀態(tài)，具有重要的科學(xué)意義與社會(huì)價(jià)值。

在“食藥同源”食材中，茯苓是多孔菌科真菌茯苓【Poria cocos（Schw.）Wolf】的干燥菌核，具有利水滲濕、健脾安神的功效[12-14]。山藥（Dioscorea opposita）是薯蕷科植物薯蕷的干燥根莖，具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃、補(bǔ)肺益腎之功效[15-16]。猴頭菇（Hericium erinaceus）是一種大型真菌，子實(shí)體和發(fā)酵菌絲體均可入藥，具有助消化，抗?jié)儯迮K的功能[17-18]。本研究采用乙醇誘導(dǎo)建立大鼠急性胃黏膜損傷模型，探討基于茯苓-山藥復(fù)配提取物開(kāi)發(fā)的米稀和基于猴頭菇提取物開(kāi)發(fā)的餅干對(duì)大鼠胃黏膜損傷的改善作用，以期為富含“食藥同源”食材提取物的米稀和餅干改善胃黏膜損傷的作用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

茯苓-山藥復(fù)配提取物、米稀、猴頭菇提取物、餅干均由本實(shí)驗(yàn)室自制。

奧美拉唑，美國(guó)Sigma 公司；其它試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純級(jí)。

1.2 儀器與設(shè)備

METTLER TOLEDO XS105 電子分析天平，上海梅特勒-托利多儀器公司；HH-4 數(shù)顯恒溫水浴鍋，國(guó)華電器有限公司；光學(xué)倒置顯微鏡，日本Nikon 公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

Sprague-Dawley（SD）大鼠，雄性，SPF 級(jí)，體質(zhì)量為（180±20）g，湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司，許可證號(hào)：SCXK（湘）2011-0003；動(dòng)物飼料墊料，湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 乙醇致大鼠急性胃黏膜損傷模型的建立[19-20]將150 只雄性SD 大鼠隨機(jī)分為15 組：正常組、模型組、陽(yáng)性組、茯苓-山藥復(fù)配提取物低、中、高劑量組、米稀低、中、高劑量組、猴頭菇提取物低、中、高劑量組、餅干低、中、高劑量組，每組10 只。

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d 后，開(kāi)始正式實(shí)驗(yàn)。每2 d 稱重，根據(jù)體重變化調(diào)整灌胃劑量（1 mL/100 g）。每天灌胃茯苓-山藥復(fù)配提取物低、中、高劑量組對(duì)應(yīng)提取物675，1 350，2 700 mg/kg，米稀低、中、高劑量組對(duì)應(yīng)米稀116.1，232.2，464.4 mg/kg，猴頭菇提取物低、中、高劑量組對(duì)應(yīng)提取物2 160，4 320，8 640 mg/kg，餅干低、中、高劑量組對(duì)應(yīng)餅干135，270，540 mg/kg，正常組、模型組和陽(yáng)性組均灌胃相應(yīng)體積的生理鹽水，持續(xù)灌胃14 d。

第22 天，各組大鼠均嚴(yán)格禁食、不禁水1 d，期間亦禁止給藥。在第23 天，開(kāi)始造模，陽(yáng)性組在灌胃無(wú)水乙醇之前1 h 先灌胃奧美拉唑（30 mg/kg bw/d），之后除正常組外，其余所有組均灌胃無(wú)水乙醇4.0 mL/kg，1 h 后處死所有大鼠。具體流程如圖1所示。

圖1 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)流程圖Fig.1 Animal experiment flow chart

1.4.2 臟器指數(shù)測(cè)定 所有大鼠禁食、不禁水1 d，稱量并記錄體重后，處死，取臟器（脾臟、腎臟、

肝臟）并用生理鹽水清洗，濾紙吸干后稱重記錄，用于計(jì)算臟器指數(shù)。

1.4.3 胃黏膜損傷表觀形態(tài)觀察 所有大鼠禁食、不禁水1 d 后，處死，剪開(kāi)腹部取胃，洗凈內(nèi)容物后展開(kāi)固定，拍照記錄。

1.4.4 胃黏膜損傷指數(shù)測(cè)定 所有大鼠禁食、不禁水1 d 后，處死，剪開(kāi)腹部取胃，洗凈內(nèi)容物后展開(kāi)，肉眼觀察并記錄出血點(diǎn)個(gè)數(shù)，用游標(biāo)卡尺測(cè)量糜爛條帶的長(zhǎng)度和寬度。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1[21-25]。

表1 胃黏膜損傷指數(shù)評(píng)分表Table 1 Score of gastric mucosal injury index

1.4.5 胃組織HE 染色病理觀察 所有大鼠禁食、不禁水1 d 后，處死，剪開(kāi)腹部取胃，選取胃損傷最嚴(yán)重部位，切下約10 mm×2 mm 的組織，固定于4%多聚甲醛溶液中，常規(guī)梯度脫水、包埋、切片、烤片，HE 染色后置于光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果與分析

2.1 4 種受試物對(duì)大鼠臟器指數(shù)的影響

如表2所示，各實(shí)驗(yàn)組之間脾臟指數(shù)、腎臟指數(shù)、肝臟指數(shù)均無(wú)顯著性差異（P > 0.05），說(shuō)明乙醇致胃黏膜損傷模型對(duì)大鼠的其它臟器無(wú)明顯損傷，4 種受試物對(duì)大鼠無(wú)顯著毒副作用。

2.2 4 種受試物對(duì)大鼠體重變化的影響

如表3所示，在持續(xù)給予4 種受試物期間，大鼠體重穩(wěn)定增長(zhǎng)，各組之間均無(wú)顯著性差異（P>0.05），說(shuō)明4 種受試物對(duì)大鼠的正常生長(zhǎng)無(wú)顯著影響。

表3 4 種受試物對(duì)大鼠體重變化的影響（n=8）Table 3 Effect of four test substances on body weight change in rats（n=8）

2.3 4 種受試物對(duì)大鼠胃黏膜損傷表觀形態(tài)的影響

如圖2所示，正常組大鼠胃黏膜完整，形態(tài)及色澤均正常，未見(jiàn)出血、潰瘍、糜爛等異常；模型組大鼠胃黏膜有明顯的出血、潰瘍和糜爛，可見(jiàn)粗大的出血條帶及大量的出血點(diǎn)，胃黏膜呈暗紅色，表明乙醇致大鼠急性胃黏膜損傷模型造模成功；茯苓-山藥復(fù)配提取物及其米稀各劑量組可見(jiàn)大鼠胃黏膜的損傷程度均有明顯緩解，出血點(diǎn)和出血條帶明顯減少，且茯苓-山藥復(fù)配提取物和米稀的中劑量組效果均較好；猴頭菇提取物及其餅干各劑量組可見(jiàn)大鼠胃黏膜的損傷程度均有緩解，出血點(diǎn)和出血條帶有所減少，與茯苓-山藥復(fù)配提取物及其米稀各劑量組相比效果略差?？傊?，4 種受試物各劑量組均可減輕大鼠胃黏膜損傷程度，對(duì)胃黏膜具有一定的保護(hù)作用。

圖2 大鼠胃黏膜損傷形態(tài)觀察Fig.2 Observation of gastric mucosal injury in rats

2.4 4 種受試物對(duì)大鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響

由表4和圖3可知，與正常組相比，模型組的胃黏膜損傷指數(shù)顯著升高（P<0.01）；與模型組相比，陽(yáng)性組的胃黏膜損傷指數(shù)顯著降低（P<0.01）；4 種受試物的低、中、高劑量組與模型組相比，均能顯著降低胃黏膜損傷指數(shù)和升高胃黏膜損傷抑制率（P<0.01），并且損傷抑制率在茯苓-山藥復(fù)配提取物的中劑量組達(dá)到最高為64.36%。結(jié)果表明，4 種受試物均可顯著改善大鼠胃黏膜損傷情況，對(duì)大鼠胃黏膜損傷有一定的保護(hù)作用。

圖3 4 種受試物對(duì)大鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響（n=8）Fig.3 Effect of four test substances on gastric mucosal injury index in rats（n=8）

表4 4 種受試物對(duì)大鼠胃黏膜損傷指數(shù)的影響（n=8）Table 4 Effect of four test substances on gastric mucosal injury index in rats（n=8）

2.5 4 種受試物對(duì)大鼠胃組織病理學(xué)的影響

如圖4所示，正常組大鼠胃組織結(jié)構(gòu)完整，腺體排列整齊，未見(jiàn)胃黏膜上皮細(xì)胞脫落、水腫及充血現(xiàn)象。與正常組相比，模型組大鼠胃組織腺體結(jié)構(gòu)紊亂，胃黏膜嚴(yán)重充血，上皮細(xì)胞大量脫落，可見(jiàn)明顯的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。與模型組相比，預(yù)先給予4 種受試物及奧美拉唑均可明顯改善胃黏膜損傷狀態(tài)，胃黏膜上皮細(xì)胞脫落及胃黏膜充血情況減輕，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)減少。由此可知，預(yù)先給予大鼠4 種受試物2 周對(duì)胃黏膜損傷有顯著的預(yù)防保護(hù)作用。

圖4 4 種受試物對(duì)大鼠胃組織病理學(xué)觀察（倍數(shù)×100）Fig.4 Effect of four test substances on morphological changes of gastric tissue in rats（magnification×100）

3 結(jié)論

本研究以基于“食藥同源”食材（茯苓、山藥、猴頭菇）開(kāi)發(fā)的米稀和餅干為研究對(duì)象，探究其對(duì)胃黏膜損傷的預(yù)防改善作用。結(jié)果表明，茯苓-山藥復(fù)配提取物及其米稀、猴頭菇提取物及其餅干對(duì)乙醇誘導(dǎo)的大鼠急性胃黏膜損傷均有較好的預(yù)防保護(hù)作用，且茯苓-山藥復(fù)配提取物及其米稀的效果優(yōu)于猴頭菇提取物及其餅干，茯苓-山藥復(fù)配提取物的中劑量組效果最好。本研究結(jié)果可以為基于茯苓-山藥復(fù)配提取物開(kāi)發(fā)的米稀和基于猴頭菇提取物開(kāi)發(fā)的餅干以改善胃黏膜損傷作用提供理論依據(jù)，并為改善胃腸道功能健康食品的開(kāi)發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。