王俊美

血細(xì)胞分析是門診患者和住院患者常需進(jìn)行的一項檢查,是多種疾病診斷的必要檢查,檢測結(jié)果準(zhǔn)確性直接關(guān)系到患者是否可得到準(zhǔn)確的診斷及正確治療［1］。Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀是我國醫(yī)院實驗室應(yīng)用較為廣泛的一類全自動五分類血液分析儀,可實現(xiàn)迅速檢測,不僅應(yīng)用了傳統(tǒng)電阻抗法、射頻法,同時也應(yīng)用到流式細(xì)胞激光技術(shù),并應(yīng)用熒光染料、特殊化學(xué)試劑進(jìn)行靜脈血白細(xì)胞(white blood cell,WBC)分類,使WBC 分析獲得更高的敏感度與準(zhǔn)確度［2,3］。不過血細(xì)胞分析結(jié)果是否準(zhǔn)確,不僅與患者準(zhǔn)備、標(biāo)本采集、儀器性能有關(guān),也有黃疸、溶血、脂血這些血液本身問題有關(guān)［4］。臨床發(fā)現(xiàn),進(jìn)行血細(xì)胞分析時如果標(biāo)本發(fā)生脂血,則血細(xì)胞檢測結(jié)果準(zhǔn)確性會明顯降低［5］。既往研究中顯示脂血造成影響的指標(biāo)主要包括血紅蛋白(hemoglobin,Hb)與相關(guān)參數(shù),但本院進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),不同程度的脂血對血細(xì)胞檢測結(jié)果會產(chǎn)生不同的影響,嚴(yán)重止血甚至?xí)绊懙絎BC 計數(shù)與分類,但既往對這方面缺乏研究,本研究選取2018 年1 月～2019 年12 月200 份無脂血、溶血以及黃疸的標(biāo)本作為研究材料,具體分析如下。

1 材料與方法

1.1 材料 以2018 年1 月～2019 年12 月在本院進(jìn)行健康體檢的200例受檢者的血液標(biāo)本為研究對象,其中男120例,女80例；年齡最小20 歲,最大56 歲,平均年齡(34.15±10.16)歲。

1.2 方法 200例受檢者均在清晨空腹?fàn)顟B(tài)下應(yīng)用EDTA-K2抗凝管采集3 ml 血液標(biāo)本,常溫條件下保存,全部標(biāo)本均除外存在黃疸、溶血、脂血、高WBC。全部標(biāo)本均在采集后2 h 之內(nèi)完成檢測。將200 份血標(biāo)本隨機(jī)分為三組［對照A 組(66例)、對照B 組(67例)、對照C 組(67例)］,先常規(guī)進(jìn)行血細(xì)胞檢測,然后以3000 r/min速度進(jìn)行10 min離心處理,將血漿成分去除,相應(yīng)加入10、50、100 μl 脂肪乳劑,選擇全自動生化分析儀(日立7600)進(jìn)行甘油三酯(triglyceride,TG)水平的測定,TG 6.0～10.0 mmol/L 視為輕度脂血(輕度脂血組),TG 10.1～14.0 mmol/L 視為中度脂血(中度脂血組),TG ＞14.1 mmol/L 視為重度脂血(重度脂血組)［6］。然后均按照閉蓋模式對脂血標(biāo)本的血常規(guī)進(jìn)行檢測。

1.3 觀察指標(biāo) 比較輕度脂血組與對照A 組、中度脂血組與對照B 組、重度脂血組與對照C 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果,血細(xì)胞檢測指標(biāo)包括：WBC、Hb、血小板計數(shù)(blood platelet,PLT)、紅細(xì)胞計數(shù)(red blood cell,RBC)、平均紅細(xì)胞容積(mean corpuscular volume,MCV)、紅細(xì)胞比容(hematocrit,HCT)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC)、中性粒細(xì)胞(neutrophil,NEUT)百分比(NEUT%)、單核細(xì)胞(monocyte,MONO)百分比(MONO%)、淋巴細(xì)胞(lymphocyte,LYMPH)百分比(LYMPH%)、嗜堿性粒細(xì)胞(basophil granulocyte,BASO)百分比(BASO%)、嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils,EOS)百分比(EOS%)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 輕度脂血組與對照A 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較 輕度脂血組與對照A 組的RBC、Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%、LYMPH%、BASO%、EOS%檢測結(jié)果比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

表1 輕度脂血組與對照A 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

表1 輕度脂血組與對照A 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

注：兩組比較,P＞0.05

2.2 中度脂血組與對照B 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較 中度脂血組的RBC 低于對照B 組,Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%高于對照B 組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；兩組的PLT、HCT、NEUT%、LYMPH%、BASO%、EOS%比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表2。

表2 中度脂血組與對照B 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

表2 中度脂血組與對照B 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

注：與對照B 組比較,aP＜0.05

2.3 重度脂血組與對照C 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較 重度脂血組的RBC、LYMPH%低于對照C 組,Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%高于對照C 組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；兩組的BASO%、EOS%比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表3。

表3 重度脂血組與對照C 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

表3 重度脂血組與對照C 組的血細(xì)胞檢測結(jié)果比較()

注：與對照C 組比較,aP＜0.05

3 討論

臨床中腫瘤晚期患者、消化系統(tǒng)疾病患者、高脂血癥患者因為機(jī)體血脂水平偏高,胃腸外營養(yǎng)多以脂肪乳劑為營養(yǎng)液,導(dǎo)致患者抽取的血液標(biāo)本為脂血狀態(tài)［7］。臨床進(jìn)行血細(xì)胞檢測時脂血對檢測結(jié)果的影響最明顯［8］。既往研究顯示,脂血會影響血液分析儀檢測時WBC、Hb、MCH、MCHC、PLT 等多項指標(biāo)的結(jié)果［9］。

本研究血細(xì)胞檢測應(yīng)用的是Sysmex 公司的XE-2100 全自動血液分析儀,相較傳統(tǒng)檢測儀,這一代產(chǎn)品在性能、參數(shù)上均有明顯改進(jìn),基本消除了輕度脂血對血細(xì)胞檢測結(jié)果的影響［10］。本研究輕度脂血組與對照A 組的RBC、Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%、LYMPH%、BASO%、EOS%檢測結(jié)果比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。證實Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀的良好應(yīng)用價值。本研究中度脂血組的RBC 低于對照B 組,Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%高于對照B 組；重度脂血組的RBC、LYMPH%低于對照C 組,Hb、PLT、WBC、HCT、MCV、MCH、MCHC、NEUT%、MONO%高于對照C 組,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；提示標(biāo)本溶血后應(yīng)用Sysmex XE-2100全自動血液分析儀進(jìn)行血細(xì)胞檢測會不同程度影響檢測結(jié)果,脂血程度越嚴(yán)重,對結(jié)果準(zhǔn)確性的影響越大。以下針對具體指標(biāo)分析影響原因：①對WBC 分類的影響：檢測原理包括應(yīng)用WBC DIFF 檢測通道、細(xì)胞化學(xué)熒光染色技術(shù)結(jié)合半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞原理,被檢細(xì)胞被半導(dǎo)體激光照射時,按照每個細(xì)胞生成的信號完成細(xì)胞的分辨,縱坐標(biāo)表示側(cè)向熒光強度,可將亞甲藍(lán)對細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA 的染色強度反映出來,橫坐標(biāo)則為側(cè)向散射光強度的表示,可以將細(xì)胞內(nèi)容物反映出來,散射光信號和熒光信號會一起形成散點圖、直方圖,從而能實現(xiàn)NEUT、LYMPH、MONO 的區(qū)別［11］。②對Hb 的影響：原理為十二烷基磺酸鈉氧化亞鐵血紅素中Fe2+,形成SLS-Hb 衍生物,于555 nm 波長完成比色測定。但脂肪乳乳白色渾濁會使Hb 在比色法下的測定結(jié)果受影響,引起Hb 結(jié)果假性升高,導(dǎo)致MCH、MCHC 結(jié)果不準(zhǔn)確［12］。③對RBC/PLT 的影響：RBC/PLT 檢測的原理為經(jīng)典電阻抗原理,前鞘流和后鞘流保證流經(jīng)檢測部位的RBC/PLT 逐個通過,可防止細(xì)胞并列通過、側(cè)向通過導(dǎo)致的檢測誤差。不過脂肪乳顆粒流經(jīng)檢測部位會對檢測產(chǎn)生影響,影響RBC 計數(shù),進(jìn)而導(dǎo)致MCV、MCH 檢測結(jié)果受影響［13］。④對WBC 的影響：在流式細(xì)胞技術(shù)下逐個分析通過檢測部位的細(xì)胞或顆粒,防止重復(fù)檢測或發(fā)生漏檢,不過不管是應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)還是應(yīng)用電阻抗法,都無法做到完全識別每個細(xì)胞,導(dǎo)致結(jié)果受影響［14］。

本研究輕度、中度、重度溶血標(biāo)本檢測的BASO%、EOS%結(jié)果均與對照組無明顯差異,分析是由于對于這兩項指標(biāo)的檢測,Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀專門設(shè)立了BASO/EOS 通道,經(jīng)將特殊溶血劑加入后對其他細(xì)胞產(chǎn)生溶解,形成裸核,僅有BASO/EOS 完整性得以保留,然后按照細(xì)胞的大小以及體積實施專門檢測,所以不同程度脂血都沒有明顯影響到指標(biāo)檢測結(jié)果。為減輕脂血對血細(xì)胞檢測結(jié)果的影響,最充分發(fā)揮Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀應(yīng)用價值,需要熟練掌握脂血干擾判斷方法,本研究總結(jié)如下：當(dāng)儀器顯示乳糜/Hb 干擾提示,或血涂片中出現(xiàn)不同大小的不著色脂肪球,或放置后血漿部分出現(xiàn)乳白色渾濁,都應(yīng)該懷疑為脂血標(biāo)本,這種情況下應(yīng)該對甘油三酯(TG)水平進(jìn)行測定,具體判斷脂血程度。而可采取的糾正方法為：離心處理后將上層血漿成分去除,并加入相同體積的Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀原裝配套稀釋液,混勻后進(jìn)行血常規(guī)指標(biāo)檢測,同時標(biāo)明糾正前、糾正后的檢測結(jié)果,另外在化驗單中備注脂血標(biāo)本,供醫(yī)生診斷時判斷。

綜上所述,脂血會影響Sysmex XE-2100 全自動血液分析儀血細(xì)胞檢測結(jié)果,中度脂血會影響RBC、Hb、WBC、MCV、MCH、MCHC、MONO%指標(biāo)結(jié)果,重度脂血另外會影響PLT、HCT、NEUT%、LYMPH%水平,臨床應(yīng)加強重視,做好脂血標(biāo)本的預(yù)防,保證標(biāo)本可用性,確保指標(biāo)檢測準(zhǔn)確性。