張曉榮，李 微

陜西省榆林市第一醫(yī)院：1.檢驗科；2.輸血科，陜西榆林 719000

肝細(xì)胞癌是一種惡性程度較高的腫瘤，我國肝細(xì)胞癌病死率居世界第2位[1]，臨床多采用手術(shù)及肝移植術(shù)等方式治療肝細(xì)胞癌，但患者術(shù)后復(fù)發(fā)率高，遠期生存率不理想[2]。肝細(xì)胞癌患者肝臟組織血供豐富，極易發(fā)生微血管侵犯(MVI)[3]，其發(fā)生率為30%～60%，并與其病理特征和臨床分期有關(guān)，這也是導(dǎo)致肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的重要病理學(xué)基礎(chǔ)[4]。MVI是影響肝細(xì)胞癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的重要因素，MVI患者術(shù)后1、2、3、4年總生存率均明顯低于無MVI患者[5]。隨著人們對乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌MVI患者血清甲胎蛋白(AFP)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、巖藻糖苷酶(AFU)等血清學(xué)指標(biāo)的研究深入，AFP、VEGF、AFU有望作為預(yù)測肝細(xì)胞癌MVI的血清學(xué)指標(biāo)。本研究通過檢測乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平，并分析其與MVI的相關(guān)性，旨在為臨床治療和預(yù)后評估提供指導(dǎo)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年11月至2019年11月本院收治的235例乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)CT、磁共振及病理學(xué)明確診斷為肝細(xì)胞癌，同時符合《慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)(2015年版)》[6]中有關(guān)乙型肝炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)患者均接受肝細(xì)胞癌根治術(shù)治療，同時未接受其他相關(guān)治療；(3)符合赫爾辛基實驗準(zhǔn)則。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并嚴(yán)重心、腎等臟器疾病或其他惡性腫瘤者；(2)丙型肝炎、丁型肝炎以及酒精性肝炎等肝病者；(3)遠處轉(zhuǎn)移者；(4)精神障礙者。根據(jù)患者是否發(fā)生MVI，將其分為MVI組(108例)和無MVI組(127例)。此外，依據(jù)文獻[7]對患者MVI病理特征進行分級，將MVI組進一步分為低危組(M1期，20例)、中危組(M2期，31例)和高危組(M3期，57例)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者和家屬均簽署知情同意書。MVI組和無MVI組患者性別、年齡、肝功能分級(Child-Pugh分級)、肝硬化情況、腫瘤位置等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 患者一般資料在MVI組和無MVI組間比較

1.2方法 采集所有研究對象外周靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，取血清，保存于-80 ℃冰箱備用。AFP水平采用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒(北京源德生物醫(yī)學(xué)工程有限公司)進行檢測；VEGF水平采用ELISA試劑盒(美國安迪生物工程有限公司)進行檢測；AFU水平采用生化定量法進行測定，相關(guān)試劑盒由四川邁克生物科技股份有限公司提供。

1.3觀察指標(biāo) 比較MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平；比較不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平；分析乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI的相關(guān)性；分析血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者發(fā)生MVI的效能。

2 結(jié) 果

2.1MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較 MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于無MVI組患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 MVI組和無MVI組患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較

2.2不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較 高危組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于低危組、中危組患者(P<0.05)，中危組患者血清AFP、VEGF、AFU水平高于低危組患者(P<0.05)。見表3。

表3 不同MVI分級患者血清AFP、VEGF、AFU水平比較

2.3乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI發(fā)生的相關(guān)性分析 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MV發(fā)生I均呈正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI發(fā)生的相關(guān)性分析

2.4血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌發(fā)生MVI的效能 ROC曲線分析結(jié)果顯示，AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌MVI的曲線下面積(AUC)分別為0.867、0.924和0.904，3項指標(biāo)聯(lián)合診斷的AUC為0.958，均高于單項指標(biāo)檢測。見圖1、表5。

圖1 血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌發(fā)生MVI的ROC曲線

表5 血清AFP、VEGF、AFU診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌發(fā)生MVI的效能分析

3 討 論

肝細(xì)胞癌是一種常見的原發(fā)性肝癌，可能與肝炎病毒感染以及肝硬化有關(guān)[8]。人體感染乙型肝炎病毒后，一方面，乙型肝炎病毒DNA可隨機插入人染色體，誘導(dǎo)染色體突變、缺失；另一方面，乙型肝炎病毒能夠激活原癌基因，致使抑癌基因突變，從而在癌變過程中發(fā)揮作用，最終誘發(fā)肝細(xì)胞癌[9]。目前，手術(shù)切除和肝移植仍是治療肝細(xì)胞癌的主要途徑，但患者術(shù)后5年復(fù)發(fā)率高達70%，肝移植后復(fù)發(fā)率高達25%[10]。MVI指的是門靜脈分支在顯微鏡下出現(xiàn)癌細(xì)胞團的現(xiàn)象，也是肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)的獨立危險因素[11]。發(fā)現(xiàn)MVI不僅可幫助臨床醫(yī)生制訂手術(shù)后治療方案，還可指導(dǎo)外科醫(yī)生制訂肝移植、肝切除和擴大手術(shù)范圍。然而，MVI的診斷仍然依賴于肝切除或肝移植后的病理組織活檢。因此，尋找預(yù)測肝細(xì)胞癌MVI的血清學(xué)指標(biāo)具有重要意義。

AFP已被證實可作為肝細(xì)胞癌及術(shù)后無復(fù)發(fā)生存期的預(yù)測指標(biāo)[12]。血清AFP水平升高，多提示預(yù)后不良以及肝細(xì)胞癌術(shù)后復(fù)發(fā)[13]。LI等[14]研究顯示，AFP可獨立預(yù)測肝細(xì)胞癌切除術(shù)后患者總生存期和無復(fù)發(fā)生存期，在腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險較高(出現(xiàn)單個或多個MVI)的患者中，AFP應(yīng)答者(術(shù)后AFP下降程度大于AFP變化最佳臨界值)比無應(yīng)答者生存率更高。VEGF是一種與血管生長相關(guān)的特異性生長因子，可參與維持血管內(nèi)皮完整，還可調(diào)控腫瘤血管形成，與腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)[15]。楊錦鋒等[16]研究顯示，原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者腫瘤組織VEGF表達陽性率明顯高于癌旁組織，且其表達與腫瘤轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)。AFU在肝臟組織中表達豐富，一旦肝臟發(fā)生癌變，AFU大量釋放進入血液系統(tǒng)，血清AFU水平將明顯上升[17]。相比于健康人群，慢性肝炎、肝硬化以及肝細(xì)胞癌患者血清AFU水平均呈升高趨勢[18]。本研究結(jié)果顯示，MVI組血清AFP、VEGF、AFU水平明顯高于無MVI組，表明血清AFP、VEGF、AFU水平可能與乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌MVI有關(guān)。同時，隨著肝細(xì)胞癌MVI加重，血清AFP、VEGF、AFU水平逐漸上升，表明血清AFP、VEGF、AFU水平可反映肝細(xì)胞癌MVI程度，即血清AFP、VEGF、AFU水平越高，肝細(xì)胞癌MVI越嚴(yán)重。張義等[19]指出，VEGF與肝細(xì)胞癌血清AFP水平有關(guān)，且VEGF高表達組2年內(nèi)復(fù)發(fā)率明顯高于VEGF低表達組，VEGF高表達可能增加肝細(xì)胞癌術(shù)后短期復(fù)發(fā)風(fēng)險。故AFP、VEGF、AFU可作為預(yù)測肝細(xì)胞癌MVI的血清學(xué)指標(biāo)。

相關(guān)性分析結(jié)果顯示，乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平與MVI均呈正相關(guān)，表明乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平能夠在一定程度上反映肝細(xì)胞癌MVI程度，可作為診斷肝細(xì)胞癌MVI的血清學(xué)指標(biāo)。ROC曲線分析結(jié)果顯示，AFP、VEGF、AFU聯(lián)合檢測診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌MVI的AUC明顯高于各指標(biāo)單獨檢測，表明聯(lián)合檢測有助于提高對肝細(xì)胞癌MVI的診斷效能。臨床通過監(jiān)測肝細(xì)胞癌術(shù)后患者血清AFP、VEGF、AFU水平，可盡早篩選出MVI高危患者，從而及時實施針對性治療，以改善患者預(yù)后。但本研究收集樣本量有限，所得結(jié)論可能存在一定偏倚，后續(xù)工作中有待進一步增大樣本量，以充分證實以上結(jié)論的可靠性。

綜上所述，乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌患者血清AFP、VEGF、AFU水平明顯上升，其水平與肝細(xì)胞癌MVI呈正相關(guān)，聯(lián)合檢測血清AFP、VEGF、AFU對于診斷乙型肝炎相關(guān)肝細(xì)胞癌MVI具有較高的效能。