陳 磊 曾 軍 丁夢琴 鐘 玲 劉建偉 陳 懿 李 麗 沙爾山別克·阿不地力大* 高 雁*

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052；2.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院微生物應(yīng)用研究所，新疆特殊環(huán)境微生物實(shí)驗(yàn)室，烏魯木齊 830091；3.烏魯木齊膳源農(nóng)業(yè)科技有限公司，烏魯木齊 830052；4.烏魯木齊市米東區(qū)畜牧獸醫(yī)站，烏魯木齊 830052)

拜城油雞是新疆特色的地方品種，有著300多年的養(yǎng)殖歷史，主要分布在新疆阿克蘇地區(qū)拜城縣周圍，因其全身皮下分布著均勻的脂肪層，故得名“拜城油雞”，其曾于20世紀(jì)80年代種質(zhì)丟失，后經(jīng)復(fù)壯純化于2001年被農(nóng)業(yè)部收錄于《國家畜禽遺傳資源名錄》[1]。

蝦青素又名蝦黃質(zhì)、蝦黃素等，化學(xué)名為3，3′-二羥基-4，4′-二酮基-β，β-胡蘿卜素，是一種酮基類胡蘿卜素，具有抗氧化、著色、抗癌、抗炎和提高免疫力等生物學(xué)功能[2-4]。蝦青素存在諸多同分異構(gòu)體，而不同結(jié)構(gòu)型蝦青素抗氧化活性差異較大[5]。研究表明，天然左旋型蝦青素具有最強(qiáng)的抗氧化活性，是維生素E的500多倍，顯著高于人工合成消旋型及存在于紅發(fā)夫酵母中的右旋型，且其主要存在于雨生紅球藻為代表的藻類中[6-7]。目前，國內(nèi)外對于蝦青素的研究多集中在水產(chǎn)和肉雞養(yǎng)殖上[8-12]，主要功能作用為用于觀賞魚的增色，以及改善肉雞的皮膚及肌肉色澤、生長性能、免疫和抗氧化性能等，而在蛋雞養(yǎng)殖上的研究報(bào)道較少。

蛋雞在生產(chǎn)期間常常容易發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而造成產(chǎn)蛋性能不穩(wěn)定等問題。另外，由于拜城油雞產(chǎn)蛋量偏低，提高其產(chǎn)蛋、孵化性能和蛋品質(zhì)，對該行業(yè)發(fā)展和種質(zhì)資源保存具有重要意義。因此，本試驗(yàn)以新疆拜城油雞蛋雞為研究對象，通過在其飼糧中添加不同劑量的雨生紅球藻藻粉，研究其對拜城油雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和抗氧化性能的影響，從而確定其適宜添加劑量，為拜城油雞的生產(chǎn)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用雨生紅球藻藻粉購自于陜西某生物科技有限公司，其蝦青素含量為5%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼糧

試驗(yàn)選取體質(zhì)健康、體重[(2.3±0.3)kg]相近、產(chǎn)蛋率[(50±2)%]相似的48周齡拜城油雞480只，隨機(jī)分成4個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只雞。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組(試驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組)分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧基礎(chǔ)上添加2、4和6 g/kg雨生紅球藻藻粉(折合蝦青素含量為0.1、0.2和0.3 g/kg)的飼糧。試驗(yàn)預(yù)試期3周，正試期8周；預(yù)試期各組均飼喂基礎(chǔ)飼糧，按分組統(tǒng)計(jì)產(chǎn)蛋量及蛋重，并根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)?shù)恼{(diào)整。基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1994)和我國《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 33—2004)[13]，并結(jié)合《拜城油雞飼養(yǎng)管理手冊》進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

1.3 飼養(yǎng)管理

采用3層全階梯式籠養(yǎng)，每日飼喂2次(09：00和17：00)，自由飲水；采用自然光照和人工補(bǔ)光相結(jié)合，自然通風(fēng)，每天16：00人工清糞，采用常規(guī)免疫程序，每天17：30檢蛋。

1.4 測定指標(biāo)和方法

1.4.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間，每天記錄各重復(fù)死淘數(shù)、采食量、產(chǎn)蛋數(shù)和蛋重，并計(jì)算平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)

于正試期第56天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取7枚雞蛋進(jìn)行蛋品質(zhì)測定。蛋重、哈氏單位和蛋黃顏色采用以色列ORKA公司的蛋品質(zhì)量測定儀(型號：EA-01)測定；蛋殼厚度采用游標(biāo)卡尺測量，分別測量蛋殼的鈍端、銳端以及中間部分厚度，計(jì)算得出平均值，測定前去除蛋殼的內(nèi)外膜；蛋形指數(shù)采用游標(biāo)卡尺測量，分別測量蛋的縱徑和橫徑長度，并計(jì)算蛋形指數(shù)。

1.4.3 血清抗氧化指標(biāo)

于正試期第56天，對各組拜城油雞禁食12 h，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取3只體質(zhì)健康、體重、體尺相近的拜城油雞，進(jìn)行翅下靜脈采血，以4 000 r/min離心10 min，制取上清液于-20 ℃保存，用于血清抗氧化指標(biāo)的檢測。血清抗氧化指標(biāo)均采用抗氧化標(biāo)準(zhǔn)試劑盒檢測，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2019整理后，采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞生產(chǎn)性能的影響

雨生紅球藻藻粉對拜城油雞生產(chǎn)性能的影響見表2。由表可知，與對照組相比，各試驗(yàn)組拜城油雞平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比均無顯著差異(P>0.05)，這表明飼糧添加雨生紅球藻藻粉對拜城油雞生產(chǎn)性能無顯著影響。

表2 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of Haematococcus pluvialis powder on performance of Baicheng oil chickens

2.2 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞蛋品質(zhì)的影響

雨生紅球藻藻粉對拜城油雞蛋品質(zhì)的影響見表3。由表可知，與對照組相比，各試驗(yàn)組拜城油雞平均蛋重、哈氏單位和蛋形指數(shù)均無顯著差異(P>0.05)；各試驗(yàn)組蛋黃顏色極顯著高于對照組(P<0.01)，其中試驗(yàn)Ⅲ組蛋黃顏色最深，達(dá)到了14.25，且極顯著高于試驗(yàn)Ⅰ組(P<0.01)，顯著高于試驗(yàn)Ⅱ組(P<0.05)；試驗(yàn)Ⅲ組蛋殼厚度顯著高于對照組(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組蛋殼厚度與對照組相比差異不顯著(P>0.05)。

表3 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of Haematococcus pluvialis powder on egg quality of Baicheng oil chickens

2.3 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

雨生紅球藻藻粉對拜城油雞血清抗氧化指標(biāo)的影響見表4。由表可知，拜城油雞血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性隨雨生紅球藻藻粉添加劑量的提高而線性提高。與對照組相比，除試驗(yàn)Ⅰ組外，試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組拜城油雞血清GSH-Px活性均極顯著提高(P<0.01)，且試驗(yàn)Ⅲ組極顯著高于試驗(yàn)Ⅱ組(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅲ組肉雞血清SOD活性顯著高于對照組(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組肉雞血清SOD活性與對照組相比差異不顯著(P>0.05)。拜城油雞血清丙二醛(MDA)含量隨雨生紅球藻藻粉添加劑量的提高而線性降低。與對照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組拜城油雞血清MDA含量極顯著降低(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組顯著降低(P<0.05)，且試驗(yàn)Ⅱ組和試驗(yàn)Ⅲ組顯著低于試驗(yàn)I組(P<0.05)。

表4 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞血清抗氧化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of Haematococcus pluvialis powder on serum antioxidant indices of Baicheng oil chickens

3 討 論

研究表明，在自然界中，許多藻類生物體內(nèi)存在著含量較高的蝦青素，比如雨生紅球藻、血紅裸藻、小球藻和綠球藻等，其中雨生紅球藻體內(nèi)的蝦青素含量最高，可從其細(xì)胞干重中提取4%～5%的蝦青素，為目前已經(jīng)知道的含蝦青素含量最高的球藻類生物，也是目前天然蝦青素的主要提取來源[14]。此外，雨生紅球藻中蝦青素的酯類結(jié)構(gòu)由于與動(dòng)物體內(nèi)的結(jié)構(gòu)相似度極高，因此極易被動(dòng)物體吸收利用，是目前畜牧養(yǎng)殖中作為天然蝦青素來源最主要的添加劑。

3.1 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞生產(chǎn)性能的影響

本試驗(yàn)中，與對照組相比，飼糧添加雨生紅球藻藻粉對拜城油雞平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比均無顯著影響，這與王鈞藝[15]、Akiba等[16]和Waldenstedt等[17]的研究結(jié)果一致，說明雨生紅球藻藻粉及其所含蝦青素對于拜城油雞的生產(chǎn)性能以及飼料轉(zhuǎn)換率沒有顯著的改善作用。其原因可能是雨生紅球藻藻粉對拜城油雞營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收利用率以及飼糧適口性沒有顯著的改善作用，從而導(dǎo)致拜城油雞的平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比與對照組相比沒有發(fā)生顯著變化。

3.2 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞蛋品質(zhì)的影響

蛋黃顏色通常是人們判斷雞蛋品質(zhì)的重要參考依據(jù)之一，雞蛋蛋黃顏色越深越容易受到消費(fèi)者的喜愛。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼糧中雨生紅球藻藻粉添加劑量的提高，雞蛋蛋黃顏色也隨之提高，其中以6 g/kg添加組顏色最深。Akiba等[18]研究表明，在蛋雞飼糧中添加2、4、8和16 mg/kg的蝦青素，蛋黃顏色隨著飼糧中蝦青素含量的增加而增加。Conradie等[19]和Son等[20]也研究表明，飼喂蝦青素可以顯著提高蛋黃顏色。雨生紅球藻藻粉及其所含蝦青素能夠增加蛋黃顏色及在蛋黃中沉著，其原因可能是雨生紅球藻藻粉中的蝦青素以類胡蘿卜素的形式在被小腸吸收后，以游離狀態(tài)進(jìn)入血液循環(huán)，最終沉積在蛋黃，從而使得蛋黃顏色加深甚至出現(xiàn)紅色[21]。而雨生紅球藻藻粉對蛋重、哈氏單位以及蛋形指數(shù)均無顯著影響，這與王鈞藝[15]的研究結(jié)果相一致，其具體原因及機(jī)理還有待進(jìn)一步的研究。

3.3 雨生紅球藻藻粉對拜城油雞血清抗氧化指標(biāo)的影響

動(dòng)物機(jī)體有氧代謝產(chǎn)生的自由基和過氧化氫(H2O2)等物質(zhì)具有很強(qiáng)的氧化反應(yīng)能力，容易與蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等發(fā)生反應(yīng)，造成脂質(zhì)過氧化以及核酸的損傷，從而引起動(dòng)物機(jī)體的損傷。而蝦青素分子不僅具有較長的共軛雙鍵，而且在共軛雙鍵的末端具有羥基和不飽和酮，這樣特殊的結(jié)構(gòu)使蝦青素能夠向自由基提供電子或者吸引自由基未配對的電子，從而捕獲自由基，吸收其多余的能量到分子鏈中，導(dǎo)致分子降解，破壞超氧化反應(yīng)鏈，中斷氧化反應(yīng)過程，從而直接清除氧自由基，防止其他分子或組織細(xì)胞損傷從而起到抗氧化的作用[22]。在本試驗(yàn)中，隨著雨生紅球藻藻粉添加劑量的提高，拜城油雞血清SOD和GSH-Px活性線性升高，血清MDA含量也線性降低，這與吳斯諾[23]、Ao等[24]的研究結(jié)果相一致，這說明蝦青素能夠在氧化應(yīng)激的刺激下提高SOD和GSH-Px活性，降低MDA含量，從而提高拜城油雞的抗氧化性能。

4 結(jié) 論

① 飼糧添加雨生紅球藻藻粉對拜城油雞平均日采食量、產(chǎn)蛋率和料蛋比無顯著影響。

② 飼糧添加雨生紅球藻藻粉對拜城油雞平均蛋重、哈氏單位和蛋形指數(shù)無顯著影響；添加6 g/kg可顯著提高蛋殼厚度；對蛋黃顏色有極顯著影響，且呈現(xiàn)出線性劑量效應(yīng)關(guān)系，添加劑量越高蛋黃顏色指數(shù)越高。

③ 飼糧添加雨生紅球藻藻粉能夠提高拜城油雞血清SOD和GSH-Px活性，降低血清MDA含量，并且均呈現(xiàn)出線性劑量效應(yīng)關(guān)系。

④ 飼糧中雨生紅球藻藻粉的適宜添加劑量為6 g/kg(含0.3 g/kg蝦青素)。