繆穎波， 宋 穎， 趙 強(qiáng)， 諸佩超， 周 維， 王 青， 徐 翀

（上海市臨床檢驗(yàn)中心臨床血液體液學(xué)研究室，上海 200126）

在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，如何設(shè)定分析性能規(guī)范（簡(jiǎn)稱性能規(guī)范）備受關(guān)注。設(shè)定性能規(guī)范的研究主要是針對(duì)定量測(cè)定項(xiàng)目，以數(shù)值形式表達(dá)的性能規(guī)范可以和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)及室內(nèi)質(zhì)量控制數(shù)據(jù)反映出的分析性能進(jìn)行比較。2014年，歐洲臨床化學(xué)和檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(huì)（European Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，EFLM）等機(jī)構(gòu)在意大利米蘭召開會(huì)議[1]，推薦基于臨床需求、生物學(xué)變異或當(dāng)前技術(shù)水平[2]設(shè)定性能規(guī)范。上海市臨床檢驗(yàn)中心自2015年起開始組織白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)能力驗(yàn)證活動(dòng)，因白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目無明確的性能規(guī)范，故以美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法規(guī)（the Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 ，CLIA′88）推薦的靶值±3s為標(biāo)準(zhǔn)。本研究旨在探索適用于上海地區(qū)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目的性能規(guī)范，以進(jìn)一步指導(dǎo)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室科學(xué)、合理地進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目的室內(nèi)質(zhì)量控制、性能驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室管理，不斷提高檢驗(yàn)質(zhì)量。

1 材料和方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

收集2015—2020年上海市臨床檢驗(yàn)中心12次共60批次白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)能力驗(yàn)證活動(dòng)數(shù)據(jù)，包括中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、單核細(xì)胞計(jì)數(shù)5個(gè)絕對(duì)值計(jì)數(shù)項(xiàng)目。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目能力驗(yàn)證物品均購自美國R&D公司。

1.2 方法

依據(jù)西班牙臨床化學(xué)和分子病理學(xué)協(xié)會(huì)匯總?cè)蚋鞯亟】等巳簷z驗(yàn)項(xiàng)目個(gè)體內(nèi)、個(gè)體間生物學(xué)變異數(shù)據(jù)庫[3]，通過公式[4]計(jì)算出最佳、最適宜和最低性能規(guī)范。以2015—2020年上海市臨床檢驗(yàn)中心各年能力驗(yàn)證活動(dòng)每個(gè)批次所有實(shí)驗(yàn)室回報(bào)數(shù)據(jù)“百分差值”的P10～P90計(jì)算該批次80%的“百分差值”的分布區(qū)間[5]，不同批次回報(bào)數(shù)據(jù)均取最大值。區(qū)間計(jì)算公式為：（P10，P90）=（中位數(shù)-TEa%當(dāng)前，中位數(shù)+TEa%當(dāng)前），即TEa%當(dāng)前=1/2（P10，P90），式中TEa為允許總誤差（allowable total error）。比較每次能力驗(yàn)證活動(dòng)每個(gè)項(xiàng)目5個(gè)不同濃度水平樣品能力驗(yàn)證結(jié)果基于生物學(xué)變異和基于當(dāng)前技術(shù)水平設(shè)定的4種性能規(guī)范的最低通過率。各項(xiàng)目基于生物學(xué)變異和基于當(dāng)前技術(shù)水平設(shè)定的性能規(guī)范見表1。

表1 各項(xiàng)目基于生物學(xué)變異和基于當(dāng)前技術(shù)水平設(shè)定的性能規(guī)范 %

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用上海市臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)量評(píng)價(jià)評(píng)分系統(tǒng)和Medcalc 19.1軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的性能規(guī)范項(xiàng)目

2015—2020 年每年2次的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)能力驗(yàn)證活動(dòng)回報(bào)結(jié)果中，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)3個(gè)項(xiàng)目每次能力驗(yàn)證活動(dòng)5個(gè)不同濃度水平樣品能力驗(yàn)證結(jié)果基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的最佳性能規(guī)范的最低通過率分別為80.3%、80.0%和80.5%。淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目所有批次基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的最佳、適宜和最低性能規(guī)范的最低通過率分別為17.6%、36.2%和80.1%。

2.2 基于當(dāng)前技術(shù)水平導(dǎo)出的性能規(guī)范項(xiàng)目

單核細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目所有批次基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的最佳、適宜和最低性能規(guī)范的最低通過率分別為2.6%、13.9%和19.1%，而基于當(dāng)前技術(shù)水平導(dǎo)出的性能規(guī)范最低通過率為81.2%。

3 討論

在靶值±3s的可接受限規(guī)則下，離散程度越大，控制限就越寬；離散程度越小，控制限就越窄。若結(jié)果超出極窄的控制限，就會(huì)被評(píng)判為不合格；而在較大的控制限內(nèi)，卻可評(píng)判為合格。故不能客觀、準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平。中國合格評(píng)定國家認(rèn)可委員會(huì)建議能力驗(yàn)證或室間質(zhì)量評(píng)價(jià)項(xiàng)目評(píng)價(jià)界限以固定百分比或數(shù)值作為可接受限[6]。相較于靶值±3s的可接受限規(guī)則，這個(gè)建議可以提供給醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室一個(gè)明確的、方便使用的性能規(guī)范，且可避免因傳統(tǒng)s倍數(shù)評(píng)價(jià)方式中s的不同而導(dǎo)致的同一項(xiàng)目不同濃度水平能力驗(yàn)證結(jié)果的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)不同。

目前，我國尚未建立基于我國人群的生物學(xué)變異數(shù)據(jù)庫，因此本研究利用國外學(xué)者基于全球健康人群建立的研究數(shù)據(jù)[3]導(dǎo)出相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)（表1）。

本研究結(jié)果顯示，2015—2020年上海地區(qū)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)能力驗(yàn)證活動(dòng)中，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)3個(gè)項(xiàng)目可達(dá)到基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的最佳性能規(guī)范。可能與中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)是白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目中數(shù)值最高、計(jì)數(shù)重復(fù)性高的項(xiàng)目有關(guān)；嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞雖然在白細(xì)胞中的含量較低，但由于細(xì)胞質(zhì)中含有特殊顆粒，采用阻抗法、激光散射法和熒光染色法檢測(cè)[7]可清晰辨別。本研究淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目只能達(dá)到最低性能規(guī)范，可能是其與單核細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目在采用熒光染色法檢測(cè)時(shí)，側(cè)向熒光和散色光散點(diǎn)圖表現(xiàn)近似等有關(guān)[8-10]。另外，由于單核細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目在低濃度水平（＜1.0×109/L）時(shí)數(shù)值極低，基于當(dāng)前技術(shù)水平導(dǎo)出的性能規(guī)范以百分?jǐn)?shù)表示可能達(dá)到200%，如濃度為0.02×109/L時(shí)，TEa%當(dāng)前為225%；濃度為0.1×109/L時(shí)，TEa%當(dāng)前為75%，故采用CLIA′88推薦的低濃度檢測(cè)項(xiàng)目以絕對(duì)值表示可接受限[11]。分析原因可能與目前無法對(duì)血液分析儀的分類計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行常規(guī)校準(zhǔn)有關(guān)，也可能與目前分類計(jì)數(shù)質(zhì)控品是采用人紅細(xì)胞添加其他物質(zhì)組成的混懸液，且添加的數(shù)量較少，導(dǎo)致每次檢測(cè)結(jié)果差異較大有關(guān)。

本研究建立的白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目的性能規(guī)范可應(yīng)用于室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（能力驗(yàn)證）結(jié)果的分析，醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室也可以將其作為白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目的質(zhì)量目標(biāo)，評(píng)價(jià)該項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室不精密度和偏移，計(jì)算西格瑪值，選擇合適的質(zhì)控規(guī)則。整體質(zhì)量較高的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室也可以選擇基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的適宜或最佳性能規(guī)范作為質(zhì)量目標(biāo)。能力驗(yàn)證計(jì)劃的質(zhì)量目標(biāo)不一定與醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量目標(biāo)相一致。能力驗(yàn)證的要求是以監(jiān)管為主，以大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室通過為標(biāo)準(zhǔn)，但作為不同質(zhì)量水平的醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室在達(dá)到此要求的同時(shí)，可設(shè)定更高的要求，以幫助其提高檢測(cè)水平或判斷哪種檢測(cè)系統(tǒng)更為優(yōu)秀（性能驗(yàn)證或方法學(xué)確認(rèn)）。作為監(jiān)管部門的臨床檢驗(yàn)中心，可將不同水平的可接受限用于不同場(chǎng)景，如在能力驗(yàn)證活動(dòng)中，可使用范圍較大的可接受限，以保證醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室達(dá)到基本要求；在正確度驗(yàn)證活動(dòng)中，可使用范圍較小的可接受限，以提高各檢測(cè)系統(tǒng)的一致性。

綜上所述，基于生物學(xué)變異導(dǎo)出的最佳性能規(guī)范和最低性能規(guī)范分別適用于上海地區(qū)臨床實(shí)驗(yàn)室白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)中中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)和淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)4個(gè)項(xiàng)目能力驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)；而基于當(dāng)前技術(shù)水平導(dǎo)出的性能規(guī)范適用于單核細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目的能力驗(yàn)證結(jié)果評(píng)價(jià)。這一標(biāo)準(zhǔn)可為醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室制定量化的質(zhì)量目標(biāo)提供依據(jù)，從而持續(xù)提高白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)項(xiàng)目的檢測(cè)水平。