房紅娟，李曉瑞，馬輝娟，田小娟，張琳剛

山西省運(yùn)城市中心醫(yī)院 耳鼻咽喉頭頸外科(運(yùn)城 044000)

慢性鼻竇炎(chronic rhinosinusitis，CRS)是耳鼻喉科常見(jiàn)疾病，因老年人呼吸功能降低，CRS的發(fā)生可引發(fā)一系列肺部并發(fā)癥，對(duì)老年人生活質(zhì)量和生命安全均有一定影響[1]。目前有研究[2-3]認(rèn)為，CRS的發(fā)生可伴有鼻黏膜的組織重塑過(guò)程，組織重塑是機(jī)體對(duì)慢性炎癥及創(chuàng)傷的反應(yīng)性變化。鼻腔黏膜組織重塑主要特征包括上皮損傷、成纖維細(xì)胞增生及基底膜的增厚。組織重塑可激活炎性細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子，促進(jìn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；同時(shí)也可引起黏膜組織纖維化，產(chǎn)生不可逆性改變?cè)黾又委熾y度[4]。白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)均為臨床常見(jiàn)細(xì)胞因子，由Th細(xì)胞分泌，其中IL-2、IL-6、TNF-α由Th1細(xì)胞分泌，主要參與細(xì)胞毒性、局部炎癥反應(yīng)相關(guān)的免疫應(yīng)答[5-6]。目前已有研究[7-8]探討了鼻腔黏膜炎癥與黏膜組織重塑之間的關(guān)系，但炎癥因子在血清中的變化及與黏膜重塑的關(guān)系仍值得探討。本研究通過(guò)分析CRS患者鼻腔黏膜組織重塑情況及血清IL-2、IL-6、TNF-α等指標(biāo)變化情況，并探討二者的相關(guān)性，旨在為評(píng)估鼻腔黏膜組織重塑情況提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇2019年7月至2020年1月于山西省運(yùn)城市中心醫(yī)院住院行鼻內(nèi)鏡手術(shù)的66例老年CRS患者為試驗(yàn)組，納入標(biāo)準(zhǔn)：1)符合CRS診斷指南[9]，鼻竇CT可見(jiàn)鼻竇炎性改變，部分伴鼻息肉；2)鼻內(nèi)鏡檢查可見(jiàn)鼻腔黏膜水腫、充血，有膿性分泌物；3)患者對(duì)本研究知情并簽署同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)合并哮喘、過(guò)敏性疾病者；有高血壓、糖尿病等嚴(yán)重內(nèi)科疾病者；2)合并未加以控制的感染性疾病者；3)術(shù)前使用激素藥物治療者。另?yè)裢谟诒驹盒斜侵懈羝C正手術(shù)的25例患者為對(duì)照組，對(duì)照組患者無(wú)明顯鼻部炎癥狀況，CT檢查無(wú)鼻竇炎表現(xiàn)，無(wú)急慢性感染疾病，未使用藥物。本研究經(jīng)運(yùn)城市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情并同意配合本研究。兩組性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性(表1)。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 鼻黏膜組織重塑觀察 兩組患者行鼻內(nèi)鏡手術(shù),取前篩區(qū)鼻黏膜，黏膜標(biāo)本獲取后放入10%多聚甲醛中固定，制備石蠟切片，切片厚度為4 μm。1)進(jìn)行HE染色并進(jìn)行觀察，每例標(biāo)本選取2張切片，每張切片選擇5個(gè)高倍鏡視野，觀察篩竇黏膜間質(zhì)炎癥細(xì)胞數(shù)量、上皮損傷情況及杯狀細(xì)胞增生情況，其中上皮細(xì)胞損傷按照Ponikau分級(jí)[10]方法分為4級(jí)。2)采用V-G染色，測(cè)定基底膜的厚度。3)采用Masson三色膠原染色，觀察黏膜細(xì)胞外基質(zhì)膠原沉積情況，主要測(cè)定鼻黏膜基底膜區(qū)MT藍(lán)色染色區(qū)域所占百分比。

1.2.2 血清學(xué)指標(biāo) 采集術(shù)前及術(shù)后外周靜脈血，離心分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定IL-2、IL-6、TNF-α水平，試劑盒購(gòu)自深圳聯(lián)合醫(yī)學(xué)科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，定性資料以例數(shù)(%)表示，組間比較行2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較行秩和檢驗(yàn)。符合正態(tài)分布的定量資料以表示，兩組間比較行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，指標(biāo)間相關(guān)性行Pearson相關(guān)性分析或Spearman相關(guān)性分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α除特別說(shuō)明外均設(shè)定為0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組鼻黏膜組織重塑情況比較

試驗(yàn)組鼻黏膜炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)個(gè)數(shù)、杯狀細(xì)胞化生個(gè)數(shù)、黏膜內(nèi)基質(zhì)沉積面積、基底膜厚度均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)；上皮化損傷1、2、3級(jí)上皮細(xì)胞所占百分比高于對(duì)照組(P<0.05);損傷0級(jí)上皮細(xì)胞所占百分比低于對(duì)照組(P<0.05)(表2、圖1)。

表2 兩組鼻黏膜組織重塑情況比較

圖1 試驗(yàn)組患者鼻黏膜組織重塑情況

2.2 兩組血清IL-2、IL-6、TNF-α水平比較

兩組血清IL-2、IL-6、TNF-α水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；試驗(yàn)組患者血清IL-2、IL-6、TNF-α水平明顯高于對(duì)照組(P<0.05)(表3)。

表3 兩組血清IL-2、IL-6、TNF-α水平比較

2.3 血清學(xué)指標(biāo)與鼻黏膜組織重塑的相關(guān)性

試驗(yàn)組血清IL-2、IL-6和TNF-α與鼻黏膜炎性細(xì)胞個(gè)數(shù)、杯狀細(xì)胞化生個(gè)數(shù)、黏膜內(nèi)基質(zhì)沉積面積、基底膜厚度均呈正相關(guān)(P<0.05)(表4)。

表4 血清學(xué)指標(biāo)與鼻黏膜組織重塑的相關(guān)性分析

3 討論

組織重塑是機(jī)體對(duì)創(chuàng)傷及炎癥所產(chǎn)生的增生樣反應(yīng)，組織結(jié)構(gòu)的重新構(gòu)建可導(dǎo)致病變慢性化、不可逆、難治性變化[11]。目前研究[12]認(rèn)為，CRS不論是變應(yīng)性或感染性，其病理學(xué)改變均為炎癥反應(yīng)，局部大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)可導(dǎo)致黏膜上皮細(xì)胞脫落、杯狀細(xì)胞增多、黏液腺體增生、膠原沉積及基底膜增厚等。上皮杯狀細(xì)胞化生是腺體對(duì)長(zhǎng)期慢性炎癥刺激所作出的代償性反應(yīng)，在病變?cè)缙冢@種代償反應(yīng)可促使腺體黏液分泌增多，黏液中的抗菌成分可保護(hù)纖毛、發(fā)揮抗病因子的效應(yīng)，有利于病情恢復(fù)；但隨著病情加重及病程延長(zhǎng)，腺體過(guò)度增生可導(dǎo)致分泌的黏液黏度增加，抗菌成分降低，影響鼻竇本身纖毛的功能[13]。細(xì)胞外機(jī)制降解及沉積作用失衡是導(dǎo)致氣道重塑的關(guān)鍵原因。目前研究[14]表明，鼻腔黏膜纖維化改變是CRS黏膜重塑的重要特征，基底膜是分隔上皮細(xì)胞及結(jié)締組織的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，是上皮細(xì)胞產(chǎn)生的胞外基質(zhì)，其主要發(fā)揮機(jī)械性支撐，維持組織形態(tài)、物質(zhì)交換，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及炎癥修復(fù)等過(guò)程。正常狀態(tài)下基底膜合成及降解處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，在反復(fù)炎癥刺激下，上皮細(xì)胞損傷，基底膜膠原暴露，黏膜纖維組織增生、修復(fù)過(guò)程反復(fù)，最終導(dǎo)致黏膜局部增厚、韌性增加、基底膜增厚[15]。本研究結(jié)果顯示，CRS患者存在鼻腔黏膜上皮損傷程度增加，炎癥細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、膠原沉積增多，基底膜增厚等改變，提示CRS患者存在鼻腔黏膜組織重塑過(guò)程，與李晶等[16]研究結(jié)果類(lèi)似。CRS黏膜重塑涉及炎癥、纖維化、細(xì)胞外機(jī)制合成等多種機(jī)制，其中局部炎癥浸潤(rùn)是最重要、關(guān)鍵的變化。李霞等[17]采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)了CRS患者IL-19及其受體的表達(dá)，結(jié)果顯示,CRS伴或不伴息肉患者中均存在IL-19表達(dá)升高；蘇飛等[18]研究也證實(shí)這一點(diǎn)。本研究結(jié)果顯示，CRS患者血清IL-2、IL-6、TNF-α水平升高，提示CRS患者可伴有細(xì)胞因子水平的失衡。本研究所檢測(cè)的炎癥因子雖與其他研究存在一定差異，但也證實(shí)CRS患者可伴有炎癥因子的增多。本研究進(jìn)一步探討了血清炎癥因子水平與鼻腔黏膜組織重塑指標(biāo)的關(guān)系，結(jié)果顯示，血清IL-2、TNF-α水平與鼻黏膜炎性細(xì)胞個(gè)數(shù)、杯狀細(xì)胞化生個(gè)數(shù)、黏膜內(nèi)基質(zhì)沉積面積、基底膜厚度呈正相關(guān)，提示血清炎癥因子指標(biāo)可一定程度反映鼻腔黏膜組織重塑過(guò)程及程度，可作為評(píng)估組織重塑的參考指標(biāo)。

綜上所述，老年CRS患者血清IL-2、IL-6、TNF-α等炎癥因子水平升高，且IL-2、IL-6和TNF-α水平與鼻腔黏膜組織重塑過(guò)程相關(guān)，或可作為評(píng)估組織重塑的參考指標(biāo)。本研究局限性在于樣本量較小，且血清學(xué)指標(biāo)可受患者自身生理狀態(tài)、疾病的影響，混雜因素較多，未來(lái)仍有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量并開(kāi)展組織學(xué)研究分析其相關(guān)性。