徐春蘭，林新瑜，劉 偉△，蘭曉玲

(1.成都大學(xué)，四川 成都 646000；2．四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所，四川 成都 610031)

熒光是物質(zhì)的一種光致發(fā)光現(xiàn)象，由紫外線誘導(dǎo)產(chǎn)生的熒光統(tǒng)稱為紫外線熒光(ultraviolet induced fluorescence, UVF)，其中由紫外線激發(fā)產(chǎn)生的紅色熒光特指為紫外線誘導(dǎo)產(chǎn)生的紅色熒光(ultraviolet induced red fluorescence，UVRF)[1]。1927年，Bommer用UV照射人體面部時(shí)在痤瘡患者毛囊開口處發(fā)現(xiàn)了獨(dú)特的紅色熒光，成為首個(gè)觀察并報(bào)道UVRF的學(xué)者[2]，其后大量學(xué)者對UVRF產(chǎn)生的原因進(jìn)行了研究?，F(xiàn)將面部UVRF產(chǎn)生的原因及與面部UVRF相關(guān)的熒光技術(shù)在痤瘡診治中的應(yīng)用概述如下。

1 面部UVRF產(chǎn)生的原因

1.1 UVRF與痤瘡丙酸桿菌(P. acnes)既往從毛囊皮脂腺中提取的熒光光譜可以反映出多種熒光細(xì)菌的存在，其中粉刺和毛囊中最常見的細(xì)菌是P. acnes和顆粒丙酸桿菌，但顆粒丙酸桿菌數(shù)量明顯少于P. acnes。有研究證實(shí)痤瘡患者面部的UVRF是由長波紫外線照射下P.acnes產(chǎn)生的糞卟啉III和原卟啉IX(PpIX)發(fā)出的，且熒光強(qiáng)度與皮膚表面P.acnes的總密度密切相關(guān)；通過熒光法對毛囊皮脂腺擠出物進(jìn)行研究，結(jié)果顯示熒光光譜與之前實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)P. acnes的熒光光譜非常相似，由此認(rèn)為擠出物的光譜很可能反映出P.acnes的熒光光譜；此外，通過顆粒丙酸桿菌和P.acnes(血清型I和II)細(xì)菌的相應(yīng)熒光研究，得出了毛囊皮脂腺中發(fā)現(xiàn)的熒光光譜主要是由于P.acnes存在的結(jié)論[3,4]。用長波紫外線UVA照射痤瘡患者面部皮膚時(shí)，發(fā)現(xiàn)部分封閉或完全封閉的皮脂腺顯示出特別高的熒光強(qiáng)度，特別是在鼻唇溝部位，在某種程度提示單個(gè)皮脂腺腺體的熒光強(qiáng)度可作為粉刺內(nèi)P.acnes含量和引起粉刺的各種潛在物質(zhì)的指標(biāo)。另有研究發(fā)現(xiàn)：在氪離子激光器407 nm的照射下，人體皮膚紅色光譜區(qū)域呈現(xiàn)出強(qiáng)烈的自發(fā)熒光，光譜由三個(gè)主峰組成，分別約600、620和640 nm，它們是典型的金屬卟啉如鋅原卟啉、糞卟啉和游離原卟啉IX，其中糞卟啉III與P.acnes計(jì)數(shù)之間高度相關(guān)[5,6]。近年來，有學(xué)者利用 VISIA 皮膚記錄和分析系統(tǒng)攝得痤瘡患者面部紫外 照片和紅色模式照片對痤瘡患者皮膚紫外熒光進(jìn)行了由表及里的觀察，認(rèn)為毛孔處UVRF由P.acnes合成的卟啉類物質(zhì)發(fā)出，但痤瘡粉刺皮損內(nèi)P.acnes的密度可能不高甚至缺如[7]。

1.2 UVRF與皮脂雖然主流觀點(diǎn)認(rèn)為痤瘡患者面部UVRF的產(chǎn)生是由P.acnes代謝產(chǎn)生的卟啉所致，但尚無定論。有研究表明UVRF可能與皮脂有關(guān)。部分學(xué)者對痤瘡患者面部UVRF面積與P.acnes培養(yǎng)結(jié)果和皮脂分泌量之間的關(guān)系進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：培養(yǎng)率與紅色熒光區(qū)域的相關(guān)性不顯著。在將患者分類為高皮脂和低皮脂組后，UVRF區(qū)域存在顯著差異，紅色熒光區(qū)與皮脂分泌的相關(guān)性強(qiáng)于與P.acnes的相關(guān)性，這一發(fā)現(xiàn)表明，紅色熒光不僅受P.acnes影響，還受皮脂的影響[8]。

對UVRF與痤瘡嚴(yán)重程度和皮脂分泌量之間的關(guān)系進(jìn)行研究顯示，無論皮膚類型如何，T區(qū)的皮脂水平和熒光強(qiáng)度(面積百分比和橙紅色斑點(diǎn)數(shù))均高于U區(qū)，與臨床痤瘡等級(jí)相關(guān)的皮脂量和熒光斑面積顯著為負(fù)，橙紅色熒光與皮脂水平之間存在顯著的正相關(guān)。由此得出結(jié)論：橙紅色熒光顯示與非炎性痤瘡病變(粉刺)的存在和高皮脂量的相關(guān)性高于炎性痤瘡病變(膿皰)和低皮脂量的存在[9]。另一項(xiàng)針對痤瘡患者的研究發(fā)現(xiàn)，U區(qū)的熒光強(qiáng)度與皮脂水平和痤瘡病變的數(shù)量呈正相關(guān)；在T區(qū)，熒光強(qiáng)度與皮脂水平相關(guān)，但與痤瘡皮損數(shù)量無關(guān)，支持了面部UVRF的起源與皮脂成分相關(guān)的假設(shè)[10]。

近期有學(xué)者發(fā)現(xiàn)紅色熒光物質(zhì)在皮脂分泌量高的T區(qū)檢出率較皮脂分泌量低的U區(qū)高，由此推斷痤瘡患者UVRF物質(zhì)的出現(xiàn)可能與皮脂分泌有關(guān)；在使用UVA光應(yīng)用簡單的光學(xué)系統(tǒng)來刺激和獲得體內(nèi)面部熒光圖像時(shí)，發(fā)現(xiàn)紅色熒光與皮脂水平呈正相關(guān)[11]。在對痤瘡患者面部UVRF與皮脂間的關(guān)系進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，有學(xué)者也在正常皮膚的受試者中使用UVRF進(jìn)行了觀察，以研究UVRF與正常人群皮脂測量之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)UVRF與正常皮脂水平相關(guān)，認(rèn)為它可能對評估正常皮膚面部油脂有幫助[12]。還有學(xué)者通過檢測皮脂和熒光，對尋常型痤瘡患者皮脂水平和毛囊熒光之間的相關(guān)性進(jìn)行了分析，結(jié)果顯示尋常型痤瘡患者皮脂水平與毛囊熒光密切相關(guān)[13]。

2 UVRF在痤瘡診斷和治療中的應(yīng)用

2.1 UVRF在痤瘡診斷中的應(yīng)用由于熒光方法觀察方便且快速無創(chuàng)，UVRF逐漸成為痤瘡嚴(yán)重程度評估及治療效果觀察和監(jiān)測的指標(biāo)。激光誘導(dǎo)的自體熒光被用于臨床上很多疾病的檢測和診斷，同時(shí)他們還進(jìn)行了消融人角質(zhì)層后體內(nèi)熒光光譜和5-氨基酮戊酸(ALA)誘導(dǎo)皮膚內(nèi)源性卟啉成像的研究，獲得了ALA熒光區(qū)域的高對比度視頻圖像，開啟了ALA熒光成像的研究之旅。此后，對UVRF應(yīng)用于痤瘡診斷及療效評估方面的研究和方法日益增多。使用多光譜圖像(MSI)提取痤瘡皮膚病變光譜信息、使用405 nm LED照明器的熒光數(shù)字?jǐn)z影方式拍攝面部紅色熒光點(diǎn)、使用熒光光譜分析系統(tǒng)測量面部皮膚中常見的糞卟啉及原卟啉IX的特征光譜并進(jìn)行定量分析、使用VISIA-CR多模式成像對痤瘡病變進(jìn)行自動(dòng)分類等研究相繼報(bào)道[14,15]。這些研究表明熒光攝影是痤瘡治療過程中評估痤瘡的有力工具，不僅提高了臨床觀察的可視性，可以對痤瘡病變類型進(jìn)行分類，而且還可以通過計(jì)算機(jī)定位、圖像分割和三維分析等方法進(jìn)行病變跟蹤和測量，通過對面部皮膚中特征性光譜進(jìn)行定量分析從而用于痤瘡嚴(yán)重程度測量和評估[16,17]。

2.2 UVRF用于痤瘡治療隨著痤瘡患者面部UVRF研究的深入，在此基礎(chǔ)上發(fā)展起來的熒光診斷和光動(dòng)力療法(PDT)的報(bào)道也日益增多。國內(nèi)外大量研究表明，內(nèi)源性卟啉可作為進(jìn)行光動(dòng)力療法的光敏劑，外源性光敏劑ALA或其甲酯的應(yīng)用導(dǎo)致在皮脂腺單位的卟啉增加，可以增強(qiáng)自體熒光的強(qiáng)度，使得光動(dòng)力療法治療痤瘡成為可能[18]。光動(dòng)力療法可以根據(jù)內(nèi)源性卟啉產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度決定是否需要使用外源性光敏劑進(jìn)行熒光增強(qiáng)。有學(xué)者對熒光診斷和光動(dòng)力療法治療痤瘡的新方法進(jìn)行了探討，基于在自然光和熒光下的同時(shí)診斷，研究表明用熒光診斷控制皮膚病治療具有前瞻性，能實(shí)時(shí)監(jiān)測皮膚光敏劑濃度變化，優(yōu)化時(shí)間和照射劑量，精確定義進(jìn)行光動(dòng)力療法所需的皮膚面積[19]。

2.3 UVRF用于痤瘡療效評估早期研究使用UVRF評估克林霉素對尋常痤瘡患者的治療效果，顯示治療后熒光顯著降低，表明UVRF在痤瘡治療過程中可能是有利的評估工具[20]。隨后發(fā)現(xiàn)卟啉熒光與痤瘡丙酸桿菌密度的降低密切相關(guān)，認(rèn)為數(shù)字熒光攝影是一種可靠、快速、簡便的篩查技術(shù)，可證明外用抗菌劑對痤瘡丙酸桿菌的抑制作用，建議將UVRF作為過氧化苯甲酰對痤瘡丙酸桿菌抑制作用的指標(biāo)[21]。為進(jìn)一步證實(shí)熒光成像作為痤瘡患者光動(dòng)力療法輔助評估工具的可能性， 通過對面部痤瘡患者光動(dòng)力療法治療過程中的熒光圖像進(jìn)行了紋理分析和多元數(shù)據(jù)分析，發(fā)現(xiàn)UVRF的特征可能與臨床評估有關(guān)，熒光成像可以用作痤瘡的客觀評估，但是該技術(shù)還有進(jìn)一步改進(jìn)的可能[22]。此后，在對接受異維A酸治療的痤瘡患者進(jìn)行卟啉濃度分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，治療后患者的卟啉濃度顯著降低，且臨床改善與卟啉水平降低有關(guān)[23]。近期通過UVRF對痤瘡患者外用10%百香果種籽提取物乳膏治療前后進(jìn)行臨床診斷和評估，對治療前后痤瘡皮損計(jì)數(shù)和UVRF的差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，外用百香果種籽提取物可改善尋常型痤瘡，減少皮損數(shù)量和UVRF[24]。還有學(xué)者在使用強(qiáng)脈沖光輔助治療尋常痤瘡中將UVRF作為痤瘡療效評估的方法[25]。近年來，在對無創(chuàng)性檢測技術(shù)在尋常型痤瘡療效早期評價(jià)中的研究發(fā)現(xiàn)，相對于傳統(tǒng)的臨床評價(jià)方法，治療早期患者臨床癥狀改善不明顯時(shí)，UVRF值變化的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示UVRF值在輕、中度痤瘡早期療效評價(jià)中并無明顯優(yōu)勢，其在早期療效評價(jià)中的價(jià)值還有待進(jìn)一步驗(yàn)證；但在治療一周后，伴隨著痤瘡癥狀的改善，UVRF 值呈下降趨勢，表明UVRF是一個(gè)有效的痤瘡療效評價(jià)指標(biāo)[26]。然而使用數(shù)字熒光工具發(fā)現(xiàn)，尋常痤瘡的嚴(yán)重程度與UVRF之間沒有相關(guān)性，痤瘡皮損類型也被發(fā)現(xiàn)與UVRF無關(guān)，UVRF用于痤瘡療效評估的機(jī)制還需進(jìn)一步研究[27]。

3 結(jié)語

痤瘡患者面部UVRF產(chǎn)生的原因是復(fù)雜的，雖然已有研究表明UVRF可能與痤瘡丙酸桿菌生成的卟啉及皮脂有關(guān)，但其確切原因還需更深入研究。同時(shí)，數(shù)字熒光在痤瘡臨床和研究評估中的作用仍在不斷發(fā)展，UVRF是否能成為痤瘡臨床應(yīng)用和研究評估中的有力工具，還需進(jìn)一步研究論證。