聞樂嫣，毛建梅，安小風(fēng)，楊 兵，王智榮，闞建全,*

（1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風(fēng)險評估實驗室（重慶），重慶 400715；3.中匈食品科學(xué)合作研究中心，重慶 400715；4.重慶山林源林業(yè)綜合開發(fā)有限公司，重慶 400800）

毛葉山桐子（Idesia polycarpavar.vestitaDiels）是楊柳科（Salicaceae）山桐子屬（Idesia）的木本油料植物，又稱油葡萄、水冬瓜，多為野生存在，果實富含油脂，含量最高可達(dá)40%，且油脂中含有較多的高級脂肪酸與多不飽和脂肪酸，其中亞油酸含量最豐富，約占油脂的60%[1]。亞油酸對人體健康有著重要的意義和價值，是人體不能合成的必需脂肪酸之一，也是γ-亞麻酸和花生四烯酸的合成前體物質(zhì)[2]，有助于降低人體血漿膽固醇和改變體內(nèi)膽固醇的分布，進(jìn)而預(yù)防心血管疾病的發(fā)生[3-4]。相關(guān)研究表明，毛葉山桐子油的亞油酸含量顯著高于花生油、橄欖油以及茶籽油[5-6]。因此，毛葉山桐子油逐漸受到消費者的喜愛和青睞，在高品質(zhì)食用油及亞油酸相關(guān)產(chǎn)品方面具有極高的開發(fā)應(yīng)用前景。

目前，關(guān)于毛葉山桐子及其同屬植物的研究，主要集中在其油脂含量及脂肪酸組成[7-8]，對于果實中非油脂化學(xué)成分的研究則相對較少。相關(guān)研究表明，果實提取物中的酚類、生物堿等物質(zhì)，具有良好的緩蝕效果[9]；果實的乙酸乙酯提取物能夠通過調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝及炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，改善油酸誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞肝脂肪變性中脂質(zhì)代謝和炎癥的紊亂[10]；脫脂后的毛葉山桐子果渣經(jīng)過動態(tài)發(fā)酵可獲得營養(yǎng)結(jié)構(gòu)合理的發(fā)酵飼料[11]；另外，從果實中分離出的Idescarpin物質(zhì)，能夠通過降低酪蛋白酶活性以抑制黑色素的生物合成[12]；Lee等[13]發(fā)現(xiàn)，毛葉山桐子的甲醇提取物對脂肪形成具有一定的抑制作用。由此可見，毛葉山桐子果實的其他化學(xué)成分具有多種生物活性，可作為其研究和發(fā)展的方向。因此，了解毛葉山桐子果實中其他化學(xué)物質(zhì)的含量、差異性及生長規(guī)律性，對于毛葉山桐子在食品、化工、醫(yī)藥等領(lǐng)域的開發(fā)與利用具有潛在意義。

對毛葉山桐子果實中的非油脂基本化學(xué)組分以及油脂的脂肪酸組成在生長過程中的變化情況鮮見研究。本實驗通過比較2個品種毛葉山桐子果實在生長過程中，包括粗脂肪在內(nèi)的多種化學(xué)成分含量以及油脂脂肪酸組成的變化，探究不同部位間各化學(xué)成分含量的差異性，了解各基本組分在毛葉山桐子中的存在情況，明確其開發(fā)利用價值，并通過多個指標(biāo)綜合評價不同品種不同生長期的毛葉山桐子果實，得到毛葉山桐子果實作為油脂原料和綜合開發(fā)原料的最佳采收期，以期在高品質(zhì)食用油、動物飼料、天然抗氧化劑、生物柴油、化工用油等方面的綜合利用提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

毛葉山桐子新鮮樣品由重慶山林源林業(yè)綜合開發(fā)有限公司提供，重慶1號、重慶2號毛葉山桐子屬于重慶地區(qū)種植較廣泛的2個品種，于2019年9—12月，每月的 5日、20日采集。觀察果實形態(tài)，而后去除壞果、洗凈，50 ℃熱泵烘干箱中干制，干制后的整果分離得果肉及種子，將整果、果肉、種子分別粉碎后過40 目篩，并密封保存，備用。

37種脂肪酸甲酯混合標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥97%）、福林-酚試劑（分析純）、蘆?。ǚ治黾儯?北京索萊寶科技有限公司；沒食子酸（分析純）、正己烷（色譜純） 上海阿拉丁試劑公司；其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

WB-KQ01型移動熱泵烘干箱 廣州溫伴節(jié)能熱泵有限公司；7890A型氣相色譜儀 安捷倫科技（中國）有限公司；SH420F型石墨消解儀、K9840型自動凱氏定氮儀 山東海能科學(xué)儀器股份有限公司；Epoch2型全自動酶標(biāo)儀 美國伯騰儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 粗脂肪的提取

參考GB 5009.6—2016《食品中脂肪的測定》索氏抽提法[14]。稱取5 g（精確至0.1 mg）樣品粉末，濾紙包裹后，加入約300 mL石油醚（30～60 ℃）[6]，60 ℃水浴提取8 h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，得到粗脂肪提取物，稱量，計算粗脂肪含量（以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示）。提取物于4 ℃保存，備用；濾紙包內(nèi)提取后粉末40 ℃烘干，常溫密封保存，備用。

1.3.2 果實百粒質(zhì)量、籽實比及成分指標(biāo)測定

隨機選取100 粒新鮮果實，105 ℃烘至絕干，測定干基百粒質(zhì)量，而后分離果肉和種子，計算籽實比。

水分含量：參考GB 5009.3—2016《食品中水分的測定》[15]；灰分含量：參考GB 5009.4—2016《食品中灰分的測定》[16]；蛋白質(zhì)含量：參考GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測定》[17]；粗纖維含量：采用差值法計算。

1.3.3 總糖含量測定

參考Dubois等[18]的方法，并進(jìn)行適當(dāng)修改。稱取0.1 g（精確至0.1 mg）樣品粉末，加10 mL 6 mol/L HCl溶液，沸水浴下水解約30 min，去離子水定容至25 mL。

取0.1 mL水解溶液加0.9 mL去離子水稀釋，加入1 mL 5%苯酚溶液和5 mL濃硫酸后，立即搖勻，反應(yīng)30 min后于490 nm波長處測定吸光度。

用葡萄糖制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到葡萄糖質(zhì)量濃度（x，μg/mL）與吸光度（y）的標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.006 7x+ 0.003 4，R2=0.999 8。由此計算樣品中總糖含量，結(jié)果以每100 g干基樣品中含有相當(dāng)于葡萄糖的 質(zhì)量（g/100 g）表示。

1.3.4 總酚含量測定

采用福林-酚法測定[19-20]，酸性甲醇[21]作為提取劑，于765 nm波長處測定吸光度。

用沒食子酸制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到?jīng)]食子酸質(zhì)量濃度（x，μg/mL）與吸光度（y）的標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.060 1x+ 0.016 3，R2=0.999 1。由此計算樣品中總酚的含量，結(jié)果以每克干基樣品中含有相當(dāng)于沒食子酸的 質(zhì)量（mg/g）表示。

1.3.5 總黃酮含量測定

采用亞硝酸鈉法，乙醇作為提取劑，用蘆丁制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，于510 nm波長處測定吸光度[22-23]。

得到蘆丁質(zhì)量濃度（x，μg/mL）與吸光度（y）的標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.006x-0.002 9，R2=0.999 7。由此計算樣品中總黃酮的含量，結(jié)果以每克干基樣品中含有相當(dāng)于蘆丁的質(zhì)量（mg/g）表示。

1.3.6 油脂脂肪酸組成測定

采用氣相色譜法測定[1]。稱取20 mg（精確至0.1 mg）油脂，溶解于2 mL正己烷中，加入1 mL 1 mol/L的KOH-甲醇溶液，渦旋10 s，60 ℃水浴反應(yīng)40 min，冷卻后加入5 mL飽和NaCl溶液，渦旋10 s后7 500 r/min離心10 min，取上層正己烷層經(jīng)0.22 μm有機濾膜過濾，所得樣品用于氣相色譜分析。

氣相色譜條件：色譜柱：DB-WAX毛細(xì)管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；柱流量1 mL/min；不分流；進(jìn)樣量1 μL；進(jìn)樣口溫度240 ℃，檢測器溫度240 ℃；升溫程序：初始溫度80 ℃，保持3 min，以10 ℃/min升溫至150 ℃，保持3 min，再以10 ℃/min升溫至240 ℃，保持8 min。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用Excel 2013進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，并以±s（n=3）的形式表示，采用SPSS 18.0進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PCA）及單因素方差分析，Tukey檢驗進(jìn)行差異性比較，OriginPro 2018作為繪圖工具。

2 結(jié)果與分析

2.1 果實形態(tài)學(xué)及鮮果含水量變化分析

2個品種的盛花期在4月21日左右，且在各個時期均存在果實大小不一的現(xiàn)象，采集前期更明顯。果實顏色均僅在采集的前2個月變化明顯（圖1），由青綠色逐漸轉(zhuǎn)為黃綠色、橙紅色，最終呈現(xiàn)鮮紅色；相比較而言，重慶1號毛葉山桐子果實顏色較重慶2號毛葉山桐子早半個月左右達(dá)到鮮紅狀態(tài)，但重慶2號毛葉山桐子果實顏色鮮紅后，蟲害現(xiàn)象較嚴(yán)重，后期果實掉落現(xiàn)象較嚴(yán)重。重慶1號毛葉山桐子果實百粒質(zhì)量由6.03 g上升至11.30 g，成熟后期質(zhì)量較前期增長近1 倍，籽實比由1.18下降至0.80；重慶2號百粒質(zhì)量由8.17 g上升至10.84 g，籽實比由1.50下降至1.12，重慶1號毛葉山桐子果實中果肉成分占比更大，且在生長過程中生物質(zhì)積累的程度要高于重慶2號。對于果實水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化，重慶1號毛葉山桐子為66%～70%，重慶2號毛葉山桐子為66%～71%，整個時期的變化差異不顯著（P＜0.05）。

圖1 不同時期2個品種果實形態(tài)變化Fig. 1 Changes in appearance of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars during different growth periods

2.2 粗脂肪含量分析

由圖2A可知，重慶1號毛葉山桐子果實不同部位的粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)在不同時期的變化顯著，約由11%增長到16%，后續(xù)有稍許下降，可見，油脂在生長過程中進(jìn)行了明顯的積累和消耗；相關(guān)性分析結(jié)果表明，整果與果肉粗脂肪含量變化趨勢表現(xiàn)出相關(guān)性（r=0.744，P＜0.05），說明生長過程中，整果的粗脂肪含量變化主要受果肉部分物質(zhì)含量變化的影響，該結(jié)論與Li Yu[1]和田瀟瀟[24]等的研究結(jié)論近似；另外，該品種在11月5日時粗脂肪含量達(dá)到最大值，隨后逐漸降低，且在此時果實已達(dá)到形態(tài)學(xué)成熟狀態(tài)，因此，選擇11月5日即盛花期后198 d左右作為該品種作為油脂原料的最佳采收期。由圖2B可知，重慶2號僅在采集前期不同部位的粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)發(fā)生了顯著增長，由最初的13%到19%，后續(xù)生長過程中變化不明顯，且在不同部位的差異性不大，由此推斷出，生長過程中該品種脂肪進(jìn)行較微弱的消耗與積累；整果和果肉（r=0.779，P＜0.05）、整果和種子（r=0.968，P＜0.01）分別在不同水平上表呈現(xiàn)出相關(guān)性。考慮到后續(xù)生長過程中油脂含量變化不大，且落果現(xiàn)象愈加嚴(yán)重的情況，將10月20日即盛花期后182 d左右定為該品種作為油脂原料的最佳采收期。

圖2 不同時期2個品種不同部位粗脂肪含量變化Fig. 2 Changes in crude fat content in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars during different growth periods

2.3 其他化學(xué)成分含量變化分析

2.3.1 總糖含量分析

如圖3所示，重慶1號、2號毛葉山桐子果實的整果、果肉、種子部分的總糖含量分別為11～13、20～23、15～18 g/100 g，總糖含量整體表現(xiàn)為果肉＞整果＞種子，各部位的總糖含量差異性顯著；生長過程中，整果與果肉中的總糖含量均有略微增長的趨勢，而種子中的總糖略微下降；重慶2號毛葉山桐子果實中整果、果肉、種子3 部分的總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化分別為16～18、16～19、12～16 g/100 g，種子中的總糖含量總體最低，在多個時期總糖含量表現(xiàn)為果肉＞果實，不同部位總糖含量差異較顯著。植物細(xì)胞中脂肪的合成依賴于糖類，特別是糖類的糖酵解過程中產(chǎn)生的丙酮酸[25]，因此果實中糖的含量關(guān)乎脂肪的合成。對果實不同部位中總糖與脂肪在不同時期的含量進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)兩者間不存在相關(guān)性，由此可見，毛葉山桐子中脂肪含量不受總糖含量影響。另外，血橙果實中糖分（特別是果糖和葡萄糖）的積累有助于花色苷的合成[26]，重慶1號毛葉山桐子果實中糖含量的升高，可能是其更早達(dá)到形態(tài)學(xué)成熟的原因之一。本研究中僅測定了毛葉山桐子果實中總糖的含量，對其中糖的種類有待進(jìn)一步實驗研究。

圖3 不同時期2個品種不同部位總糖含量變化Fig. 3 Changes in total sugar content in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars during different growth periods

2.3.2 蛋白質(zhì)含量分析

如圖4所示，2個品種在蛋白質(zhì)含量上表現(xiàn)出完全不同的規(guī)律性。在研究時期內(nèi)，果實生長環(huán)境的溫度逐漸降低，重慶1號毛葉山桐子果實不同部位的蛋白質(zhì)含量整體呈現(xiàn)升高的趨勢，且蛋白質(zhì)含量果肉＞整果＞種子；有研究顯示[27]，三七葉片中的可溶性蛋白質(zhì)含量在5 ℃和10 ℃條件下，均表現(xiàn)出較25 ℃時更高的水平，進(jìn)而認(rèn)為三七的耐低溫性與可溶性蛋白含量相關(guān)，由此推測出，粗蛋白質(zhì)含量的升高，伴隨著可溶性蛋白含量的增加，使得重慶1號毛葉山桐子果實具有更佳的耐低溫性。重慶2號毛葉山桐子的整果、果肉中蛋白質(zhì)含量變化整體表現(xiàn)出下降趨勢，在多數(shù)時期蛋白質(zhì)含量種子＞整果＞果肉；溫度降低同樣使得植物體內(nèi)的控制蛋白質(zhì)合成的相應(yīng)酶活性降低，從而讓蛋白質(zhì)含量減低[28]。蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)物氨基酸，可通過糖異生途徑而為種子萌發(fā)所利用[29-30]， 蛋白質(zhì)對于植物種子的萌發(fā)有著不可替代的作用，高蛋白質(zhì)含量有利于植物種子的迅速萌發(fā)[31]，因此，隨著果實的不斷成熟，2個品種的種子中蛋白質(zhì)含量會逐漸有所升高。

圖4 不同時期2個品種不同部位蛋白質(zhì)含量變化Fig. 4 Changes in protein content in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars during different growth periods

2.3.3 灰分、粗纖維含量分析

如圖5所示，重慶1號、2號毛葉山桐子果實在灰分含量上的變化趨勢，灰分含量整體均呈現(xiàn)出果肉＞ 整果＞種子，整果、果肉、種子灰分含量均呈上升趨勢。重慶1號毛葉山桐子果實中，果肉與果實（P＜0.05）、果肉與種子（P＜0.01）間灰分含量的變化存在不同水平的相關(guān)性，重慶2號毛葉山桐子果實中各部位間均未顯示出相關(guān)性。2個品種灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)，整果為5.0%～7.3%、果肉為8.3%～11.5%、種子為1.7%～3.0%。不同植物果實間灰分含量差異明顯，研究發(fā)現(xiàn)，秋葵果實的灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%～8%，與毛葉山桐子果實灰分含量相近[32]，而紅棗、枸杞果實灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%～4%[33-34]，桑椹果實灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)則低于0.1%[35]。文冠果種子中的灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為2%～3%[36]，與毛葉山桐子種子中灰分水平相當(dāng)。另外有研究顯示，藍(lán)莓果實中果皮部分的灰分含量 更高[37]，可解釋在毛葉山桐子果實中，果肉部分（本研究中將果皮歸入果肉部分）的灰分含量更高。

圖5 不同時期2個品種不同部位灰分含量變化Fig. 5 Changes in ash content in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars

如圖6所示，重慶1號、2號毛葉山桐子果實的粗纖維含量由差值法計算得出，其含量大小受其他成分含量影響較大。不同品種間及部位間存在差異，粗纖維含量均顯示出種子＞整果＞果肉，總體而言，重慶1號毛葉山桐子果實粗纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)，整果為51.1%～58.3%、果肉為37.8%～45.6%、種子為63.3%～74.6%，重慶2號毛葉山桐子粗纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)，整果為47.1%～52.2%、果肉為43.2%～48.0%、種子為53.9%～62.3%。研究發(fā)現(xiàn)，橄欖中的總膳食纖維質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)37%～51%[38]，毛葉山桐子鮮果中粗纖維相較之稍高；另外，橄欖中總膳食纖維含量受不溶性膳食纖維含量的影響，這一關(guān)系在毛葉山桐子果實中有待進(jìn)一步的研究驗證。

圖6 不同時期2個品種不同部位粗纖維含量變化Fig. 6 Changes in crude fiber content in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars

2.4 總酚及總黃酮含量分析

2.4.1 總酚含量分析

酚類化合物在油脂中的溶解度較低，故對脫脂后殘渣進(jìn)行測定[39]，并結(jié)合粗脂肪含量計算出總酚含量。酚類化合物具有抗炎、抗氧化、抗動脈粥樣硬化等功效，它的存在對人體的健康很重要[40-41]。由表1可知，2個品種總酚含量均表現(xiàn)為種子＞整果＞果肉，在酚類化合物生物活性開發(fā)利用方面，種子部分要優(yōu)于果肉部分。重慶1號在多數(shù)生長時期不同部位間的總酚含量差異顯著，果實和果肉中的含量表現(xiàn)出略微下降趨勢，其余均表現(xiàn)出不同程度的上升。有研究發(fā)現(xiàn)，核桃多酚的含量與組成主要取決于溫度和降水等自然因素，以及成熟期和貯藏時間[42-43]，推測毛葉山桐子中總酚含量與環(huán)境溫度間存在一定的關(guān)聯(lián)，溫度的升高和降低使得不同品種、不同部位呈現(xiàn)出不同的規(guī)律性。

表1 2個品種不同部位干基總酚含量 Table 1 Total phenols contents in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars (on a dry basis)mg/g

2.4.2 總黃酮含量分析

由表2可知，2個品種在總黃酮含量上表現(xiàn)出不同的規(guī)律性。在重慶1號中，多個時期總黃酮含量表現(xiàn)為整果＞種子＞果肉，在生長過程中呈波動狀態(tài)，果實中整體含量呈下降趨勢；重慶2號表現(xiàn)為果肉＞整果＞種子，整果和種子中總黃酮含量基本保持上升趨勢，果肉中含量則在生長中期達(dá)到最大值36.90 mg/g，后續(xù)逐漸下降，含量總體趨勢為上升。對于黃酮類化合物，不同品種間存在不同的含量和規(guī)律性差異。徐宏化等[44]對不同種質(zhì)的美國山核桃脫脂種仁進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，其中的總多酚含量為11～48 mg/g，總黃酮含量為3～22 mg/g，毛葉山桐子果實在二者上均表現(xiàn)出更高的水平。另外有研究發(fā)現(xiàn)，蓮子胚、柑橘等[22,45]中大量的黃酮類C-糖苷、柚皮苷等黃酮類化合物構(gòu)成了其中的苦味因素，推斷毛葉山桐子果實中所帶有的苦味成分極大程度上還與其中含有的黃酮類化合物有關(guān)，但毛葉山桐子果實的苦味程度是否隨會總黃酮含量的上升有所增加，有待進(jìn)一步研究驗證。

表2 2個品種不同部位干基總黃酮含量 Table 2 Total flavonoids contents in different parts of I. polycarpa var. vestita Diels fruit from two cultivars (on a dry basis)mg/g

2.5 脂肪酸組成與相對含量變化分析

在研究的整個生長時期內(nèi)，各部位油脂的脂肪酸相對含量變化表現(xiàn)出相同的規(guī)律性，各種脂肪酸相對含量隨時間的變化程度相對較小。表3顯示，每月20日采集的2個品種，整果油脂中的脂肪酸組成及相對含量，以對整體變化趨勢進(jìn)行分析。以11月20日采集的2個品種，在不同部位油脂的脂肪酸組成為例，比較不同果實部位間的差異性，結(jié)果見表4。

表4 2個品種不同部位脂肪酸相對含量Table 4 Fatty acid composition in different fruit parts of two cultivars%

由表3可知，毛葉山桐子油脂中的多不飽和脂肪酸主要為亞油酸和亞麻酸，亞麻酸以γ-亞麻酸為主，亞油酸為油脂中的優(yōu)勢脂肪酸，其含量與葵花籽油接近[46]。重慶 1號毛葉山桐子果實中亞油酸呈現(xiàn)升高的趨勢，重慶2號毛葉山桐子果實則在亞油酸有些許升高后逐漸下降，已有研究證明，十八碳脂肪酸與棕櫚酸間存在一定的對應(yīng)關(guān)系，十六碳脂肪酸烷鏈會被拉伸和去飽和而合成十八碳脂肪酸，而這一過程的缺乏或不足將導(dǎo)致十八碳脂肪酸減少，十六碳脂肪酸含量升高[47]，這可能是生長中后期重慶2號果實油脂中，棕櫚酸、棕櫚烯酸含量升高而亞油酸、多不飽和脂肪酸含量減少的原因。重慶2號整果中，亞油酸、不飽和脂肪酸相對含量水平整體較重慶 1號高。另外，溫度會影響植物體內(nèi)去脂肪酸飽和酶的活性，進(jìn)而調(diào)節(jié)油脂中的脂肪酸組成[48]。隨著溫度的降低和生長時期的延長，重慶1號果實油脂中不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸含量不斷增加，表明油脂的品質(zhì)在不斷提高，且低溫促進(jìn)了不飽和脂肪酸的積累。但高不飽和脂肪酸含量會對后續(xù)油脂的貯藏產(chǎn)生隱患，故注重毛葉山桐子油脂的貯藏環(huán)境尤為關(guān)鍵。

表3 2個品種在不同階段果實油脂脂肪酸相對含量Table 3 Fatty acid composition in whole fruit oils of two cultivars at different growth stages%

不同部位油脂的脂肪酸組成氣相色譜圖及相對含量見圖7、表4。由表4可知，種子與果肉部分油脂中的各脂肪酸含量差異顯著，種子油中的亞油酸、總不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸含量均顯著高于果肉油；α-亞麻酸僅存在于果肉油中，種子油中未檢測出該種成分。種子油中總不飽和脂肪酸含量可達(dá)85%，多不飽和脂肪酸含量可達(dá)77%；另外，種子油中十六碳脂肪酸（特別是棕櫚酸）的相對含量較果肉油低，十八碳脂肪酸（除亞麻酸外）的相對含量則較果肉油高，花生酸相對含量則在2個品種中表現(xiàn)出不同的規(guī)律。

圖7 脂肪酸組成氣相色譜圖Fig. 7 Gas chromatograms of fatty acid composition in whole fruit, pulp and seed oils

2.6 PCA與綜合評價

在對數(shù)據(jù)進(jìn)行KMO（Kaiser-Meyer-Olkin）及Bartlett檢驗的基礎(chǔ)上，運用PCA法對2個品種毛葉山桐子果不同時期、不同部位（整果、果肉和種子）的化學(xué)成分（粗脂肪、總糖、蛋白質(zhì)、灰分、粗纖維含量）、活性成分（總酚及總黃酮）、油脂脂肪酸組成（亞油酸、總不飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸）等參數(shù)進(jìn)行綜合評價。

PCA結(jié)果（表5）顯示，共提取出了4個PC，相對應(yīng)的特征值均大于1，累計貢獻(xiàn)率為84.726%，說明4個PC能夠反映不同品種、不同生長期、不同部位毛葉山桐子原料的絕大部分信息，因此，可選取前4個PC作為綜合性變量代替原有的11個參數(shù)變量值，對毛葉山桐子原料進(jìn)行全面、綜合的評價。前4個PC中，決定PC1大小的指標(biāo)主要是總糖、灰分、總酚含量、亞油酸相對含量、多不飽和脂肪酸含量，貢獻(xiàn)率達(dá)47.716%，對毛葉山桐子綜合評價的影響最大；PC2貢獻(xiàn)率為16.553%，主要指標(biāo)是粗脂肪、粗纖維含量，對綜合評價的影響相對較高；PC3貢獻(xiàn)率為10.750%，決定指標(biāo)為總黃酮、蛋白質(zhì)含量；PC4決定指標(biāo)為不飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸相對含量，貢獻(xiàn)率為9.707%，PC3、PC4顯示出一定程度的影響。

表5 PC的特征向量及總方差解釋Table 5 Eigenvectors of principal components and their contribution to total variance

各個PC能夠從不同方面體現(xiàn)毛葉山桐子的質(zhì)量水平，但某一PC得分無法完全反映原料的整體情況，故需將各PC進(jìn)行結(jié)合，以各PC對應(yīng)的方差相對貢獻(xiàn)率為權(quán)重，計算出各原料的綜合得分，結(jié)果如表6所示。

表6 不同時期2個品種不同部位的PC得分及綜合得分Table 6 Principal component scores and comprehensive scores of different fruit parts of two cultivars at different growth periods

為更直觀比較2個品種毛葉山桐子在不同時期、不同部位的得分情況，將綜合評價結(jié)果繪制成熱圖，并進(jìn)行聚類分析，結(jié)果如圖8所示。結(jié)果顯示：綜合評價的最佳結(jié)果為重慶2號毛葉山桐子在12月20日采集果實的種子部分，說明該部分具有更高的綜合利用潛質(zhì)；而重慶1號果肉部分在整個生長期均表現(xiàn)出較低的綜合得分，利用潛質(zhì)最低；總體而言，2個品種在各個時期的種子部分評分更高，更加具有研究與利用潛質(zhì)。另外，聚類分析將2個品種的種子部分綜合評分聚為一組，說明2個品種在種子部分具有相似的得分結(jié)果與利用潛質(zhì)。

3 結(jié) 論

不同品種毛葉山桐子果實的基本化學(xué)成分、油脂脂肪酸組成及其相對含量存在差異。2個品種毛葉山桐子果實具有不同的形態(tài)學(xué)成熟期。果肉部分中的粗脂肪、總糖、灰分、總黃酮等含量高于種子部分，而粗纖維、總酚等的含量，種子部分高于果肉部分。毛葉山桐子果實是良好的油脂來源，2個品種整體粗脂肪水平在11%～20%之間，整果與果肉粗脂肪含量間具有顯著相關(guān)性。重慶1號毛葉山桐子果實中各部位干基粗脂肪含量差異性顯著（P＜0.05），重慶2號整體差異不顯著，分別將盛花期后198、182 d左右作為油料的最佳采收期。不同品種毛葉山桐子果實油脂中脂肪酸組成基本一致，以棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸和花生酸為主。種子較果肉油脂中亞油酸、多不飽和脂肪酸相對含量及綜合評分更高，可根據(jù)需要選擇不同品種及部位的原料。

實驗對考察的11個指標(biāo)進(jìn)行PCA，提取出4個PC，累計貢獻(xiàn)率達(dá)84.726%，能夠很好地反映出所有毛葉山桐子原料的綜合情況。以4個PC各自的方差貢獻(xiàn)率建立了綜合評價模型，計算出各毛葉山桐子原料的綜合得分，得到綜合利用潛質(zhì)最佳的結(jié)果，為12月20日采集的重慶2號果實的種子部分；2個品種在各部位的綜合得分差異顯著（P＜0.05），不同品種間種子部分的利用價值相似、各個時期種子部分均顯示出更高的利用潛質(zhì)。