孫瑞雪，米薇，葉子弘

1.中國(guó)計(jì)量大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，杭州 310018；2.中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，北京100029

蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）和蛋白-配體相互作用，涉及多種藥物作用機(jī)制［1］。蛋白-蛋白結(jié)合的調(diào)節(jié)也代表了一種新興的治療模式，蛋白質(zhì)界面為藥物開發(fā)提供了一類新的靶點(diǎn)。在PPI 中尋找關(guān)鍵的蛋白、發(fā)現(xiàn)新的藥物靶標(biāo)、診斷標(biāo)記物以及治療靶點(diǎn)，可為相關(guān)疾病的治療和靶向藥物的開發(fā)提供參考，并可協(xié)助探尋疾病成因。單克隆抗體（mAbs）具有作用機(jī)制明確、高結(jié)合親和力和對(duì)選定靶點(diǎn)有特異性等優(yōu)勢(shì)，已成為蛋白質(zhì)治療的主要類別［2-3］。蛋白質(zhì)的功能主要通過(guò)與其他蛋白質(zhì)相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)，因此PPI 網(wǎng)絡(luò)是識(shí)別遺傳變異功能后果的重要工具。與疾病有關(guān)的基因突變被定位到細(xì)胞過(guò)程的重要PPIs，通過(guò)引入攜帶突變的蛋白或病原體蛋白的外源性表達(dá)，將疾病狀態(tài)與野生型參考圖進(jìn)行對(duì)比，有望揭示疾病發(fā)病過(guò)程中網(wǎng)絡(luò)的變化。

基于質(zhì)譜技術(shù)（mass spectrometry，MS）的蛋白互作方法正蓬勃發(fā)展，并越來(lái)越廣泛地應(yīng)用于科學(xué)研究中?；谫|(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)方法的發(fā)展使得通過(guò)測(cè)定動(dòng)態(tài)蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成、翻譯后修飾、組裝、結(jié)構(gòu)和PPI來(lái)全面表征蛋白質(zhì)復(fù)合物成為可能［4］。盡管目前的質(zhì)譜分析方法在靈敏度和細(xì)胞通量方面尚存在缺陷，但使用液滴微流體，可以將樣品的檢測(cè)限從μL 精確到nL，這大大提高了分析性能。到目前為止，基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)和結(jié)構(gòu)生物學(xué)已經(jīng)越來(lái)越廣泛地與基于質(zhì)譜的方法相融合，逐漸被用于補(bǔ)充結(jié)構(gòu)生物學(xué)工具［5］。

1 經(jīng)典的蛋白互作研究方法

研究蛋白質(zhì)間相互作用的經(jīng)典方法較多，主要包括生物物理學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)等方法。熒光共振能量轉(zhuǎn)移（fluorescence resonance energy transfer，F(xiàn)RET）可直接作用于活細(xì)胞，能夠監(jiān)測(cè)實(shí)時(shí)或者瞬時(shí)的PPI，檢測(cè)相互作用位點(diǎn)，監(jiān)測(cè)復(fù)雜的相互作用動(dòng)力學(xué)［6］。表面等離子體共振技術(shù)（surface plasmon resonance，SPR）具有實(shí)時(shí)分析、樣品用量少、樣品無(wú)需標(biāo)記、自動(dòng)化和中到高通量篩選能力等優(yōu)勢(shì)，這廣泛地促進(jìn)了治療性單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)和發(fā)展［7］。此外，SPR 和MS 的結(jié)合為蛋白質(zhì)間相互作用的鑒定和表征提供了一個(gè)非常靈敏的工具［8］，該技術(shù)可使用相對(duì)少量的材料測(cè)量膜蛋白與配體分子互作的實(shí)時(shí)定量結(jié)合親和力和動(dòng)力學(xué)參數(shù)［9］。經(jīng)典的蛋白互作方法優(yōu)缺點(diǎn)見(jiàn)表1。

表1 經(jīng)典的蛋白質(zhì)互作方法優(yōu)缺點(diǎn)Table 1 Advantages and disadvantages of classical protein interaction methods

雙分子熒光互補(bǔ)（bimolecular fluorescent complimentary，BiFC）技術(shù)可直接顯示活細(xì)胞中的PPIs，提供關(guān)于PPIs 發(fā)生的亞細(xì)胞位置的空間信息，該技術(shù)靈敏度高，可用于檢測(cè)內(nèi)源性或近內(nèi)源性表達(dá)蛋白互作，以及微弱和短暫互作。但它測(cè)量PPI 的動(dòng)態(tài)或?qū)崟r(shí)變化并不理想，在某些情況下，它可能檢測(cè)到假陽(yáng)性的熒光信號(hào)，這與重組片段的熒光強(qiáng)度有關(guān)，而與正在研究的兩個(gè)蛋白質(zhì)之間（或非特異性）的相互作用無(wú)關(guān)［10］。

酵母雙雜交技術(shù)（yeast two-hybrid technique，Y2H）可用于全基因組范圍內(nèi)蛋白質(zhì)間相互作用的高通量研究，能夠在真正的細(xì)胞環(huán)境中檢測(cè)體內(nèi)的相互作用［11］，有助于避免一些與細(xì)胞裂解相關(guān)的并發(fā)癥和人為因素［12］。它可以篩選目標(biāo)基因的互作蛋白，檢測(cè)瞬時(shí)或弱相互作用，繪制蛋白質(zhì)相互作用圖譜，篩選藥物靶標(biāo)，定量檢測(cè)互作強(qiáng)度。但Y2H 需要兩個(gè)互作的蛋白進(jìn)入細(xì)胞核以驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄，所以不適合用于某些細(xì)胞膜受體蛋白和細(xì)胞外蛋白［13］。在某些情況下使用酵母宿主可能無(wú)法檢測(cè)到來(lái)自其他生物體的PPIs，原因是表達(dá)不良、缺乏必要的翻譯后修飾、輔助因子或其他結(jié)合因子［14］。

2 親和純化-質(zhì)譜

親和純化-質(zhì)譜（affinity purification-mass spectrometry，AP-MS）的原理是將目的蛋白固定在固體載體上（最常見(jiàn)的是瓊脂糖或磁珠），利用目的蛋白與互作蛋白的相互作用將互作蛋白固定在載體上，從而實(shí)現(xiàn)從復(fù)雜混合物中的分離，隨后將分離得到的混合物用質(zhì)譜鑒定［15］。

親和純化與定量質(zhì)譜聯(lián)用已成為研究蛋白質(zhì)復(fù)合物以及整個(gè)生物體蛋白質(zhì)組在體內(nèi)相互作用的主要方法，這種組合產(chǎn)生高度可靠的蛋白互作數(shù)據(jù)，通過(guò)使用定量蛋白質(zhì)互作信息，可以將特定蛋白質(zhì)相互作用物與非特定背景蛋白質(zhì)區(qū)分開［16-18］。但分析AP-MS 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)較困難，需要MS專業(yè)知識(shí)和特定的生物信息學(xué)工具。串聯(lián)親和純化（tandem affinity purification，TAP）結(jié)合質(zhì)譜技術(shù)可以識(shí)別互作蛋白并對(duì)蛋白復(fù)合物進(jìn)行純化，TAP-MS 已被用于分析許多不同生物體中的蛋白互作和蛋白質(zhì)復(fù)合物。同時(shí)，TAP 還可以分析突變體對(duì)蛋白質(zhì)相互作用和關(guān)聯(lián)的影響，還可能發(fā)現(xiàn)結(jié)合位點(diǎn)［19］。

3 生物素鑒定-質(zhì)譜

生物素鑒定-質(zhì)譜（biotin identification-mass spectrometry，BioID-MS）的原理是原核生物素連接酶分子（BirA）連接目的蛋白，當(dāng)細(xì)胞中融合蛋白表達(dá)后，接近目的蛋白的互作蛋白被生物素化而帶上生物素標(biāo)簽，隨后用帶親和素的固相載體進(jìn)行捕獲，可分離得到生物素化的蛋白，最后使用MS 鑒定可得到目的蛋白的互作蛋白［20］。BioIDMS 的核心優(yōu)勢(shì)是它在天然細(xì)胞環(huán)境中檢測(cè)PPIs時(shí)，細(xì)胞的正常生命活動(dòng)基本不會(huì)受到干擾，通過(guò)改變?nèi)诤系鞍字g連接部分的長(zhǎng)度，可以調(diào)控檢測(cè)范圍，該技術(shù)在蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域意義重大。

BioID-MS 還適合識(shí)別微弱或瞬時(shí)互作、難溶性蛋白互作、翻譯后修飾介導(dǎo)的蛋白互作等。它在檢測(cè)低豐度蛋白方面可能比AP-MS 更有效［21］。該技術(shù)被用于鑒定冠狀病毒復(fù)制、HIV 病毒蛋白互作網(wǎng)、細(xì)菌宿主識(shí)別、有絲分裂相關(guān)蛋白互作等［22］。但低表達(dá)水平的PPI 伴侶也可能導(dǎo)致假陰性，在某些情況下，生物素化過(guò)程本身可能會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)的行為/相互作用造成影響。

4 氫氘交換質(zhì)譜法

4.1 氫氘交換質(zhì)譜法的原理

氫氘交換質(zhì)譜法（hydrogen deuterium exchange mass spectrometry，HDX-MS）的原理是蛋白質(zhì)樣品在不同的時(shí)間點(diǎn)用氘進(jìn)行標(biāo)記，通過(guò)降低pH 至2.5 來(lái)淬滅交換，氘化的樣品保持在0 ℃以避免回交，樣品酶解后，用HPLC 及UPLC 分離多肽，最后用MS 檢測(cè)。因?yàn)殡葰渲?，質(zhì)譜信號(hào)將逐漸向高質(zhì)荷比（m/z）方向移動(dòng)。通過(guò)對(duì)反應(yīng)前后HDX-MS 數(shù)據(jù)的比較，不同HDX-MS 譜的肽段可以突出蛋白與小分子/其他蛋白互作中潛在的相互作用界面［23］。

4.2 氫氘交換質(zhì)譜法的應(yīng)用

20 世紀(jì)90 年代以來(lái)，HDX-MS 在學(xué)術(shù)界被廣泛應(yīng)用，其中包括對(duì)蛋白質(zhì)復(fù)合物、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能、配體結(jié)合、構(gòu)象變化和折疊/展開/再折疊的動(dòng)態(tài)特性、由變構(gòu)效應(yīng)引起的構(gòu)象變化等的研究。Puchades 等［24］基于HDX-MS 揭示了溶液中血凝素（hemagglutinin，HA）三聚體的構(gòu)象動(dòng)力學(xué)。該技術(shù)在修飾的氨基酸水平相對(duì)較低或在多個(gè)位點(diǎn)有修飾時(shí)也可用來(lái)評(píng)估蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）在單個(gè)位點(diǎn)的影響。它可以識(shí)別抗體-抗原互作表位，了解抗原-抗體的相互作用和識(shí)別表位對(duì)于設(shè)計(jì)有效的蛋白治療藥物尤為重要。此外，該技術(shù)可進(jìn)一步輔助藥物研發(fā)與表征蛋白質(zhì)治療的高階結(jié)構(gòu)以及動(dòng)態(tài)的微小變化，可以作為一種有效的常規(guī)檢查方法，用于生產(chǎn)過(guò)程各個(gè)階段的質(zhì)量控制。Puchades等［24］應(yīng)用該技術(shù)探索各種藥物分子在血凝素上的主要抗原表位，并在藥物開發(fā)的早期階段確定候選藥物。

HDX-MS 可作為篩選候選藥物庫(kù)、早期和晚期先導(dǎo)物優(yōu)化的工具和蛋白質(zhì)治療藥物生產(chǎn)中的常規(guī)質(zhì)量控制方法［25］。它還可以揭示配體結(jié)合位點(diǎn)和誘導(dǎo)構(gòu)象變化，為理解藥物的定量構(gòu)效關(guān)系（quantitative structure-activity relationship，QSAR）提供依據(jù)。該方法在單克隆抗體治療的發(fā)展中貢獻(xiàn)巨大，可作為一種可靠的方法來(lái)定位抗體-抗原在其固有溶液狀態(tài)下的相互作用構(gòu)象表位［26-28］，也被用于詢問(wèn)抗體偶聯(lián)藥物的高階結(jié)構(gòu)，以評(píng)估藥物偶聯(lián)過(guò)程如何影響單克隆抗體的構(gòu)象和動(dòng)力學(xué)特性［29］。Pan 等［30］首次將HDX-MS 應(yīng)用于mAb和相應(yīng)的抗體-藥物偶聯(lián)物（antibody-drug conjugate，ADC）直接比較，以了解藥物結(jié)合對(duì)ADC 的構(gòu)象和動(dòng)力學(xué)的影響，研究發(fā)現(xiàn)，ADC 和單抗在溶液中具有非常相似的構(gòu)象和動(dòng)力學(xué)參數(shù)，且HDX-MS 數(shù)據(jù)表明，藥物偶聯(lián)過(guò)程不會(huì)在蛋白質(zhì)骨架上引起大規(guī)模的構(gòu)象變化。

HDX-MS 有助于新藥物的設(shè)計(jì)和發(fā)現(xiàn)，已用于單克隆抗體、抗體-藥物偶聯(lián)物和生物類似抗體的評(píng)估和開發(fā)［31］。

4.3 氫氘交換質(zhì)譜法的優(yōu)勢(shì)

HDX-MS 可用于研究蛋白質(zhì)中氫鍵網(wǎng)絡(luò)和折疊，特別是當(dāng)樣本有限時(shí)，優(yōu)勢(shì)明顯。HDX-MS 與其他方法相結(jié)合，如化學(xué)交聯(lián)，有助于闡明單個(gè)蛋白質(zhì)和大型蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象動(dòng)力學(xué)［32］。Yang 等［33］通過(guò)SPR 結(jié)合HDX-MS 技術(shù)對(duì)血清樣本中存在的抗體進(jìn)行了全面的定量和定性評(píng)估，SPR 技術(shù)提供抗體親和力信息和抗原特異性抗體定量信息，MS提供血清抗體與其抗原之間結(jié)構(gòu)相互作用信息，這對(duì)開發(fā)治療性抗體或疫苗至關(guān)重要。Domina等［34］通過(guò)噬菌體結(jié)合HDX-MS技術(shù)確定了NHBA的結(jié)合位點(diǎn)。Rafalik等［35］通過(guò)HDX-MS 結(jié)合酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)揭示了抗原-抗體的親和力和特異性的信息，以及表位信息。Calvaresi 等［36］通過(guò)尺寸排阻色譜結(jié)合HDX-MS 實(shí)現(xiàn)了從蛋白質(zhì)-脂質(zhì)系統(tǒng)中高效地在線去除脂質(zhì)成分，在抗原表位定位期間耗盡抗原中的抗體，以及在HDX-MS 分析二硫鍵結(jié)合蛋白過(guò)程中消除MS 干擾化合物，如三（2-羧乙基）膦（TCEP）。它與低溫電子顯微鏡（cryogenic electron microscope，Cryo-EM）有互補(bǔ)性，通過(guò)HDX-MS 測(cè)量分離和復(fù)合的蛋白質(zhì)，可以揭示分子間相互作用如何影響其動(dòng)力學(xué)和變構(gòu)調(diào)節(jié)，低溫電磁可能有助于解釋HDX質(zhì)譜的結(jié)果，尤其是當(dāng)晶體學(xué)信息不可用時(shí)。

表位作圖是識(shí)別參與抗原-抗體相互作用的結(jié)合位點(diǎn)的過(guò)程，表位的鑒定對(duì)于開發(fā)新的基于抗體的治療和疫苗至關(guān)重要。揭示表位也有助于闡明靶蛋白的作用機(jī)制，HDX-MS 在表位定位方面的優(yōu)勢(shì)源于其高靈敏度和對(duì)蛋白質(zhì)大小的極大耐受性，即使是大的蛋白質(zhì)復(fù)合物，如組織相容性復(fù)合物，也可以通過(guò)表位作圖鑒定［37］。Bereszczak等［38］應(yīng)用HDX-MS 對(duì)病毒衣殼進(jìn)行表位分析，并檢測(cè)了兩個(gè)重要的單克隆抗體片段FabE1 和Fab3120 以及乙型肝炎病毒衣殼中的核心抗原。Fernandez 等［39］利用HDX-MS 技術(shù)對(duì)乙型肝炎病毒、輪狀病毒、登革熱病毒和乙型腦炎病毒進(jìn)行了表位作圖，這表明HDX-MS 技術(shù)在病毒組裝領(lǐng)域表位作圖中有巨大的應(yīng)用潛力。

5 化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜法

5.1 化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜法的原理

化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜法（chemical cross-linking mass spectrometry，CX-MS）的原理是對(duì)一個(gè)選定的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合物在其自然狀態(tài)下加入化學(xué)交聯(lián)劑，交聯(lián)劑可以共價(jià)連接空間上接近的氨基酸殘基，其次交聯(lián)蛋白被水解，生成的肽混合物被分離，并用LC-MS 進(jìn)行分析。隨后對(duì)MS 數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，以闡明交聯(lián)肽的序列以及交聯(lián)位點(diǎn)，交聯(lián)位點(diǎn)可用于確定蛋白質(zhì)單體或復(fù)合物的結(jié)構(gòu)域和氨基酸側(cè)鏈的鄰近程度，識(shí)別蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間潛在的結(jié)合位點(diǎn)。

5.2 化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜法的應(yīng)用

CX-MS 主要應(yīng)用于解析蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和研究蛋白質(zhì)間互作。解析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)對(duì)于了解蛋白質(zhì)的功能具有重要作用，蛋白質(zhì)功能的調(diào)控主要取決于其構(gòu)象和相互作用的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)。有許多用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)界面結(jié)構(gòu)表征的技術(shù)，如最常見(jiàn)的X 射線結(jié)晶學(xué)，該技術(shù)能夠確定抗體與其抗原互作的精確位點(diǎn)，但X 射線結(jié)晶學(xué)對(duì)于蛋白質(zhì)樣品的純度、濃度及結(jié)晶性等有嚴(yán)格的要求，不適合解析大分子蛋白質(zhì)復(fù)合體的結(jié)構(gòu)，且無(wú)法捕捉相互作用蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)［40］。CX-MS 能與蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)軟件相結(jié)合從而確定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象，能夠固定弱/瞬時(shí)互作，以及幫助區(qū)分直接互作還是間接互作，確定蛋白質(zhì)互作的界面［41］。

Chavez 等［42］演示了CX-MS 技術(shù)在鑒定組織樣本中蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)特征和相互作用方面的應(yīng)用，為小鼠心臟中存在的蛋白質(zhì)復(fù)合物提供了系統(tǒng)結(jié)構(gòu)生物學(xué)視角，每個(gè)確定交聯(lián)肽對(duì)都提供了一個(gè)有用的分子探針，可用來(lái)量化組織中蛋白質(zhì)構(gòu)象或蛋白互作的變化，并可能幫助識(shí)別分子相互作用，作為線粒體靶向治療心血管或其他疾病的新靶點(diǎn)。Huang 等［43］利用此方法探測(cè)了牛血清白蛋白的三維結(jié)構(gòu)。CX-MS 也被廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)組的細(xì)胞裂解物、完整的細(xì)胞或細(xì)胞器、同時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)蛋白質(zhì)組的PPIs 及其空間信息［44-45］。定量CX-MS 方法已被用于研究耐藥癌細(xì)胞相互作用的信息，熱休克蛋白90（Hsp90）和有絲分裂抑制劑誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)構(gòu)象和相互作用的變化，以及擬磷酸化突變和核苷酸結(jié)合對(duì)Hsp90 與其輔伴侶Aha1 相互作用的影響［46］。定量CX-MS 將在可視化蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和相互作用動(dòng)力學(xué)中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用［47］。

5.3 化學(xué)交聯(lián)質(zhì)譜法的優(yōu)勢(shì)

CX-MS 的日益普及很大程度上歸因于它在結(jié)構(gòu)生物學(xué)中作為一種整合方法，可創(chuàng)建更可靠的目標(biāo)蛋白模型。許多技術(shù)可以與CX-MS 結(jié)合使用，如將不同的低分辨率方法結(jié)合，可以生成更精確的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)構(gòu)模型，特別是那些傳統(tǒng)技術(shù)難以研究的結(jié)構(gòu)［48］。

當(dāng)CX-MS 與冷凍電鏡和天然質(zhì)譜結(jié)合使用時(shí)，這些空間約束數(shù)據(jù)可以指導(dǎo)分子建模，并繪制蛋白質(zhì)復(fù)合物的動(dòng)態(tài)行為圖［49-50］。Courouble 等［51］通過(guò)將HDX-MS 與CX-MS 相結(jié)合，闡明了SARSCoV-2 全長(zhǎng)nsp7：nsp8 復(fù)合物的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)特征。Zhang等［52］成功地利用HDX-MS、CX-MS和分子對(duì)接技術(shù)確定了IL-7/IL-7Rα 結(jié)合界面，并預(yù)測(cè)了蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)復(fù)合物在溶液中的三維四級(jí)結(jié)構(gòu)。此外，交聯(lián)試劑可以共價(jià)連接兩個(gè)或多個(gè)非共價(jià)相互作用的蛋白質(zhì)，且與相互作用的時(shí)間和強(qiáng)度無(wú)關(guān)，因此即使是短暫的和弱的PPI 也可以被保留下來(lái)［53-54］。CX-MS 有助于確定交聯(lián)氨基酸側(cè)鏈的位置，從而將物理作用位點(diǎn)限制在特定的結(jié)構(gòu)區(qū)域［55］。

6 展望

本文介紹了基于質(zhì)譜的PPI 方法的一般原則及各種方法的優(yōu)缺點(diǎn)，如表2 所示。質(zhì)譜具有靈敏度高、可高通量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，采用質(zhì)譜檢測(cè)蛋白互作可在一定程度上彌補(bǔ)經(jīng)典方法的局限性?；谫|(zhì)譜的方法檢測(cè)的結(jié)構(gòu)特征可以與傳統(tǒng)的技術(shù)互補(bǔ)，如X 射線晶體學(xué)、電磁和核磁共振波譜學(xué)等。CX-MS 將會(huì)極大地推動(dòng)生物大分子復(fù)合體結(jié)構(gòu)和蛋白互作的研究。HDX-MS 技術(shù)不僅能夠分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，還能分析結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)變化，但設(shè)備條件限制了該技術(shù)在國(guó)內(nèi)的應(yīng)用，因此，提高數(shù)據(jù)自動(dòng)解析度是HDX-MS技術(shù)推廣的關(guān)鍵。未來(lái)HDX 質(zhì)譜將繼續(xù)在評(píng)估蛋白質(zhì)治療的高階結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用。相信更先進(jìn)的質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)將更廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)互作領(lǐng)域。蛋白質(zhì)復(fù)合物的組成及其互作表面、化學(xué)計(jì)量學(xué)、動(dòng)力學(xué)等方面的研究將進(jìn)一步提高這些技術(shù)在整合結(jié)構(gòu)生物學(xué)中的應(yīng)用價(jià)值。

表2 基于質(zhì)譜的蛋白互作方法優(yōu)缺點(diǎn)Table 2 Advantages and disadvantages of protein interaction methods based on mass spectrometry